高效液相色谱测量发酵液中灵菌红素含量文献综述

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1、文献综述高效液相色谱测量发酵液中灵菌红素含量摘要：高效液相色谱法是具有分离分析效能高、速度快、检测灵敏度高等特点的分离技术[1]。高效液相色谱(highperformanceliquidchromatographyHPIC)自20世纪70年代问世以来，经过近30年的发展，在基础理论、仪器装置和色谱柱等方面的研究已趋于成熟，现在已成为化学学科中最有优势的分离分析方法之一。现对高效液相色谱的组成、技术、应用、前景作一综述。关键词高效液相红色素抗癌抗菌高效液相色谱的应用范围十分广泛，几乎能够分析所有的有机、高分子、生物样品。具估计，目前已知的化合

2、物中，有80%的化合物需要用高效液相色谱法进行分离分析。此外，对无机物的分析也有很好的效果，特别是对生命活性物质的分离分析，有着其他分析方法不可替代的作用，已广泛应用于石油化工、生物化学、临床医学、食品卫生、环境监测、医药工业、商品检验、地质勘探、油田开发等领域的分离分析。lHPLC技术简介[2][3][4]HPLC法按分离原理可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子色谱法、尺寸排阻色谱法、亲和色谱法。由于HPLC技术的分析必须在高效液相色谱仪中进行，所以该仪器对此技术非常重要。高效液相色谱仪主要包括进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处

3、理系统，分述如下。1．1进样系统一般高效液相色谱仪采用隔膜注射进样器或高压进样阀完成进样操作。现代的许多新型仪器采用自动进样系统，取样、进样、洗针全部自动完成，减少了手工进样的误差，保证进样量的恒定，但自动进样的成本较手工进样要高很多1．2输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪3部分。高压泵是输液系统最重要的部件，常用的泵按输出液体情况分为恒压泵和恒流泵。现代的仪器装有压力检测装置，以便在压力超过设定值时自动停泵，以防损坏仪器梯度仪是可进行梯度洗脱的装置，它和流动相贮液器一起使流动相可随色谱柱固定相和样品性质的改变而改变，使各种物质

4、都能获得有效分离。1．3分离系统该系统中最重要的为色谱柱，除此之外还包括连接管和柱温箱。色谱柱一般长度为1O～50cm，内径为4.6mm或3.9mm，通常由优质不锈钢材料制成，柱内装有直径为5～10μm粒度的固定相。高效液相色谱的柱温箱可使温度从室温调到60℃，且保持恒定。1．4检测系统HPLC常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器、荧光检测器和电化学检测器4种。每种检测器都有自身的特点和应用范围，可以根据被分离物质的不同选择合适的检测器。1．5数据处理系统HPLC的结果分析现在已经广泛使用计算机和色谱工作站来进行，该系统可完成数据的采集

5、、贮存、显示、打印和处理等操作，使分析结果的获取更加快速、准确，同时节约大量的时间。2高效液相色谱的应用2.1HPLC在医学中的应用[5]2.1.1HPLC测血药浓度临床上应用的一些药物由于其有效血药浓度范围狭窄，个体差异大，且不同厂家产品存在生物利用度差异，其血药浓度与药效和毒性密切相关，在治疗过程中需要常规监测其血药浓度。沈建幸等[6]建立以高效液相色谱法同时测定苯巴比妥、苯妥英、卡马西平血药浓度的方法，方法为取患者血清经二氯甲烷提取后在C18柱上分析，流动相为甲醇一水(54：43)，柱温为30°C，检测波长为254nm，流速为0.8m

6、l／min。结果表明此方法简便稳定，用于苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的血药浓度监测效果良好。此外测定一些药物的血药浓度可研究该药在人体的药代动力学及药效学赵丽等[7]用HPLC法测定八血浆中的普鲁卡因，于仁娈等[8]用HPLC法测定盐酸二甲双胍的血药浓度，结果都表明该方法准确、简便、专属性强、灵敏度高，适用于临床药代动力学及药效学研究。2.1.2测定中药中的有效成分由于中药药物成分复杂，所以需要建立有效、准确的方法测定中成药有效成分的含量，以控制产品质量。马开等[9]用HPLC测定痛可停胶囊中欧前胡索和异欧前胡索含量，结果显示该法测定的欧前削

7、素和异欧前胡索分别在60~325μg和50~250μg范围内与峰面积呈线性关系，平均回收率分别为98.3％和98.7％，RSD分别为1.73％和1.65％，表明该法可作为痛可停胶囊的含量测定方法。曾海静等[10]为了有效控制复方葛根合剂质量，测定其有效成分葛根索含量，研究采用HPLC法测定其中葛根索含量，结果表明此方法操作简便，结果准确可靠，精密度好，可用于复方葛根合剂中葛根索的含量测定。2.2高效液相色谱在食品分析中的应用[11]2.2.1蛋白质与氨基酸的分析[12][13]蛋白质是由几十到几千个氨基酸分子借助肽键和二硫键相互连接的多肽链

8、，相对分子质量大，在溶液中的扩散系数小，粘度大，易发生变性，这使他们的色谱分离情况不理想，因此蛋白质的分离和分析问题至今仍是具有挑战性的课题。MarAm.Yust[14]等用反向