定心藤水溶性多糖的研究.pdf

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1、摘要定心藤(MappianthusiodoiesHand．MaZZ．)为瑶医常用药材铜钻，有独特的药效，当前对定心藤的酮类、萜类及生物碱类化合物等有一定的研究，但对其多糖的研究较少。多糖作为一种生物活性物质，具有重要的作用，广泛应用于医学。定心藤是南方少数民族地区的草药，民族特色浓厚，同时有悠久的民族传统医药理论可供借鉴。因此对定心藤多糖的研究可更全面的展现其应用价值。本文以定心藤为原料，分析了其水溶性多糖(简称DXTc)提取的最佳条件，并测定其理化性质，通过分离纯化，得到初步纯化多糖DXT，各级分多糖DX

2、Tl、DXT2、DXT3、DXT4、DXT5及纯化多糖DXT5l，测定各级分多糖组成和纯化多糖结构，并对各级分多糖及＼DXT；。进行体外清除自由基活性的研究。上述研究可为了解定心藤多糖的药理作用、合理利用这种瑶药提供理论依据。实验结果如下：正交法分析结果表明DXTc的最佳提取条件为料液比1：8，提取温度80℃，提取时间2h，提取率可达1．6％。DXTc糖含量为65．66％，蛋白含量为9．91％，糖醛酸含量为15％。DXTc经脱淀粉脱蛋白得到DXT，DXT经酸性乙醇分级得到DXTl、DXT2、DXT3、DXT

3、4、DXT5。DXT5经DEAE—SephadexA一25柱层析和SephadexG一15纯化，得多糖DXT51。DXT5l经HPLC检测呈单一对称峰，纸层析检验呈单一斑点，表明DXT，，为分子量和极性都均一的纯化多糖，相对分子量约为20000。DXT5l经纸层析和GC分析表明其单糖组成为鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)，不含有半乳糖醛酸。单糖组成摩尔比为Rha：Ara：Xyl：Man：Gal：Glc=1．00：8．90：0．40：0

4、．80：1．20：6．20。除GC分析外，还采用了IR、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化及其产物GC—MS、NMR等方法对DXT5l的结构进行分析。结果表明多糖DXT51具有分枝结构，主链由Ara和Glc构成，其中0【一(1_4)或0【一(1_5)糖苷键的Ara与0【一(1_2)糖苷键的Ara连接构成多糖DXT5l的主链之一；Glc以CL一(1—6)糖苷键连接构成多糖DXT51的主链之一，且在4位上有分枝，平均每13个糖残基有5个分枝。支链由Rha、Ara、Man、Gal、Glc构成，其中Rha以1_3连

5、接，Ara以l一3连接，Man以l_3连接，Gal以1_2连接，Glc以1—3连接。Rha、Ara、Xyl、Gal、Glc都有一部分构成分子的末端残基。清除自由基实验表明，定心藤多糖具有清除·OH、DPPH的能力，清除率与多糖浓度和时间有关，说明定心藤多糖是一种良好的·OH、DPPH清除剂。关键词：定心藤，多糖，提取、分离纯化，结构研究，自由基ABSTRACTMappianthusiodoiesHand．MaZZ．，whichisthegeneralmedicalmaterialsnamedTongZuan

6、ofChineseYaomedical，hassomequitespecialefficacy．Onthecontrarywiththevariousresearchsonitscomponentssuchasthechemicalcompoundsofketones，terpenesandalkaloids，theresearchonthep01ysaccharidescomponentislimited．Asakindofbioactivator，thepolysaccharidesholdanimpo

7、rtantmedicalpositionthusiswidelyusedinthemedicaldomain．Besides，MappianthusiodoiesHand．MaZZ．isakindherbalmedicinederivedfromtheminorityofsouthChina，andadditionaltothestrongethniccharacteristics，italsopossesseshistoricaltraditionalmedicaltheoryvaluableforres

8、earchandreference．Consequently，implementingresearchonthep01ysaccharidesofMappianthusiodoiesHand．MaZZ．willcomprehensivebenefitdisplayingtheapplicationworth．ThestudymainlyincludedthebestextractedconditionsofWat