课题1 菊花的组织培养xuean.doc

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1、课题1菊花的组织培养学案学习目标1.说明植物组织培养的基本原理和细胞分化。2.学习植物组织培养的基本技术。3.进行菊花或其他植物的组织培养。学习重点与难点重点：1.植物组织培养的相关概念和过程2.影响植物组织培养的因素难点：1•影响植物组织培养的因素。一.植物组织培养的相关概念和基本过程1、植物组织培养的相关概念【自主学习】(1)植物组织培养：在条件下，将植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的上，给予条件，诱导其产生,最终形成。(2)细胞分化：植物的个体发育过程中，细胞在、和上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因的结果。(3)细胞的全能性：的

2、植物细胞仍然具有发育成为的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。(4)愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞,是一种的呈无定形状态的O(5)脱分化:由的植物组织或细胞产生的过程，称为脱分化，又叫去分化。(6)再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成,这个过程叫做再分化。【问题探究】问®：1：分化的细胞体现全能性的原因？问题2：请大家依据概念找出体现全能性的前提条件？冏豊耳“佃It今他是&交也井毎能屮it传扬质的发嵐72、植物组织培养的基本过程【自主学习】(1)过程示意图移植人为使用植物激素控制

3、亠试管苗＞完整的植物体【问题探究】问题4：思考脱分化、再分化过程进行的细胞变化是？细胞分化后形成的愈伤组织的全能性有何变化？问题5：该过程成功的关键步骤有哪些?（2）脱分化和再分化的比较比较内容脱分化再分化细胞变化过程形成体特点需要条件二•影响植物组织培养的因素【自主学习】1•内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。同种植物材料，,等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择的茎上部新萌生的侧枝。2•外部因素：（1）营养条件常用的是培养基，其主要成分包括：,如;，如;等（2）植物激素植物激素中和是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。以及等，都会影响实验结果。（

4、3）环境因素等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养，一般PH控制在;温度控制在;每天用日光灯照射—小时。【问题探究】问题6：MS培养基中，各种营养成分各有什么作用？与微生物培养基的配方相比，有什么不同？问题7、植物为自养生物，为什么在培养的过程中需要加入糖类等有机物?问题&生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响?问题9：总结植物组织培养的条件？三•实验操作过程1•制备MS固体培养基实验室一般使用4C保存的配制好的培养基母液来制备(1)配制各种母液。配制母液时，大量元素浓缩,微量元素浓缩。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照lmg/ml的质量

5、浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。(2)配制培养基。配制1LMS培养基时，将称量好的琼脂加入800mL,加热熔化，然后加入,取配置好母液，依次加入，定容至lOOOmLo,然后分装到锥形瓶中，每瓶分装由于菊花茎段的组织培养比较容易，因此不必添加o(3)灭菌。分装好的培养基连同其他机械一起进行。2•外植体消毒选取菊花茎段时，要取o过程：流水冲洗〜软刷刷洗〜流水冲洗流水冲洗〜软刷刷洗f流水冲洗〜无菌吸水纸吸干外植体表面〜体积分数为的酒精中摇动2〜3次，持续〜无菌水清洗亠无菌吸水纸吸干外植体表面〜质量分数为0.1%的溶液中1〜2minf无菌水

6、中至少清洗3次，目的。【思考1】在选取菊花茎段的时候，为什么要选取生长旺盛的嫩枝？【思考2】在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？3•接种接种前，用将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在进行，并且每次使用器械后，都要用o接种过程中插入外植体时上端朝上，每个锥形瓶接种个外植体。注:外植体接种与细菌接种相似之处是操作步骤,而且都要求操作。4•培养接种后的锥形瓶最好放在中培养。培养期间,温度控制在18-22X?,并且每天用日光灯光照12h5•移栽移栽前应先打开培养瓶的，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。然后将幼苗移植到的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时

7、间，进行壮苗。最后进行露天栽培。6•栽培【思考3】实验操作过程中为什么要进行一系列的消毒、灭菌，实验中是如何做到无菌操作的？【思考4】你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗?【思考5】外植体在培养过程中可能会被污染，你认为造成污染的原因有哪些?四•结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录生根苗的移栽是否合格【知识补充】1.无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键植物组织培养不同于抒插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培