降解生淀粉真菌的筛选、鉴定及其产生淀粉酶的性质研究.pdf

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1、广西农业科学2010,41(7):637-641GuangxiA咖culturalSciences·637·降解生淀粉真菌的筛选、鉴定及其产生淀粉酶的性质研究林海娟1’2,冼亮1.2,段承杰1一,刘君梁-一,冯家勋·,2.(1广西大学生命科学与技术学院,南宁530005;2广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁530005)摘要:以生木薯粉为唯一碳源,对收集的土壤样品悬浮液进行培养、12/l(I溶液染色,经摇瓶复筛和菌株发酵上清液BSDE活力测定,筛选出10株RSDE活力较高的真菌;)td'RSDE活力最高的真菌菌株I一31进行形态学观察和ITS(Internaltrans

2、cribedspacer)序列分析,将其鉴定为青霉属。对青霉l一3l的酶学性质进行测定,结果发现其RSDE对生木薯淀粉的最适作用pH和温度分别为5.0和55。C;分别以玉米和大米为底物时,其RSDE的生淀粉分解活力比(RDA)较高,为59.O%和58.8%;青霉l一31RSDE对生木薯粉的吸附率约为37.O%。HPLC检测发现,以该菌株RSDE水解生木薯粉4h,仅释放出葡萄糖,说明青霉1—31产生的RSDE主要为生淀粉糖化酶。电镜观察结果发现,经青霉1—31RSDE处理,可使生木薯粉颗粒光滑完整的表面变得粗糙,形成无数小坑,说明青霉1—31RSDE对生淀粉具有较强的水解作用。因

3、此,青霉l一31RSDE在各种生淀粉如木薯、玉米、大米和马铃薯生淀粉等加工业中具有一定的应用潜力。关键词:生淀粉酶;青霉;筛选;降解;酶性质中图分类号:Q949.31文献标识码:A文章编号:1002—8161(2010)07—0637—05Screeningandidentificationofrawstarchhydrolyzingfungalstrainsandcharacteristicsoftheirrawstarch-degradingenzymeLINHai-juanl一,XIANLian91一,DUANCheng-jiel一,LIUJun-lian91一,FENG

4、Jia-xunl,2‘(1CollegeofLifeScienceandTechnology,GuangxiUniversity,Nanning530005,China;2GuangxiKeyLal)0ratoryofSubtropicalBioresourceConservationandUtilization,Nanning530005,China)Abstract:Thesuspensionsofcollectedsoilsampleswereculturedinisolatedplatesbyusingrawstarchassolecarbonsource,andsta

5、inedbyICKIsolutionafterculturingfor5days.Thestrainwithsignificanthydrolyzingzonewasisolatedandpurified.Tenfungalstrainswitllhigherrawstarch-degradingenzyme(RSDE)activitytorawcassavastarchwerescreenedandRSDEactivityWagdeterminedinfermentedsupernatant.Among10strains,afungalstrain1—31showinghig

6、herRSDEactivityWasidentifiedonthebasisofmorphologicalobservationandinternaltranscribedspacer(ITS)regionsequenceanalysis,asaPcnicilliumsp.TheRSDEofPenicillium1-31showedmaximumactivityatpH5.0and50℃.Thevaluesofrawstarch-degrsdingability(RDA)oftheRSDEwemabout59.0and58.8%whenC01andricewereusedast

7、hesubstrate,respectively.TheadsorptionrateofRSDEinPenicil]ium1-31toraWcassavastarchWasabout37.O%.HPLCanalysisrevealedthattheBSDEcouldreleasegluco舱onlyfromrawcassavastarchin4hours.indicatingthattheRSDEfromPenicillium叩.1-31Wasmainlyrawstarch-degradin

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