MiR-34a在大鼠肝脏再生终止阶段的作用及机制研究.pdf

《MiR-34a在大鼠肝脏再生终止阶段的作用及机制研究.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、．T——heStudyontheRolesandMolecularMechanism．ofMiR一34aintheTerminationPhaseofRat学科名称：专业名称：研究生：．L—iverRegeneration．生物化学与分子生物学董瑞琦指导老师：缪明永副教授陈欢讲师培养单位：第二军医大学基础部二。一一年五月、．C≥#{i&IJ粤p，{t1．；，．。寸气，知rj执}'，‘f．I／lIlll／／lllllll／1111111flfIll／／lllIJlllflllllll

2、Y1909284独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作．除了文中特别加以标注和致谢

3、的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果．与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。’学位论文作者签名：童诲筠日期：乃fI‘年夕月／z日．．·．：-．．··．‘’．‘‘．o‘一学位论文版权使用授权声明：：一．j‘一．：一、．．．’’‘本人完全了解第二军医大学有关保留：使用学位论文的规定，第二。军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权第三军医大学可以将学位论文全。文或部分内容编入《中国学位论文全文数据库》、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》等数据库进行检索。可以采用

4、影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：‰苟导师箪日期：乃『1年，月f乙日日期：目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3英文缩写词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．7引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．8第一部分miR．34a及相关靶基因在大鼠肝再生终止阶段的表达⋯⋯⋯⋯．10第二部分miR．34a对肝细胞BRL．3A生物学功能影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30第三部分miR．34a靶基因INHB

5、B的验证⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39第四部分大鼠再生模型下调miR．34a的初步研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52在读期间发表论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯63MiR．34a在大鼠肝脏再生终止阶段的作用及机制研究摘要人和动物的肝脏具有很强的再生能力。大鼠的肝脏在70％切除(PHx)后，可启动再生反应，在7．10天内基本恢复原有的体积和体质量，这个过程叫做肝再生。肝再生的过程可以分为

6、三个时期：启动期、再生期和终止期。肝再生过程受到很多种复杂因素的精密调控，包括各种生长因子、细胞因子和激素等。肝脏再生与肝癌都表现为肝细胞极强的增殖能力，但两者有明显区别t肝癌具有无限细胞分裂和增殖能力，缺乏终止机制，而肝再生具有自动终止机制。长期以来，肝再生研究主要集中在肝脏再生启动和增殖阶段相关正调信号，而对肝脏再生终止、肝脏组织重塑和肝脏大小精确调控等负调信号及其分子机制的研究和认识很少。因此，研究肝再生的负调机制，找出各种调控分子的变化规律和相应的分子机制，不仅有助于对肝再生的进一步认识，对肝癌病理机制的认识和治疗靶点的探索等也具有积极意义。microRNA(miRNA，miR)是长度

7、为22．25nt的单链短序列非编码RNA，它可以与靶mRNA的3’非编码区的特定部位结合使得翻译抑制或mRNA降解，属于转录后负性调控。它参与了动植物发育、细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡和肿瘤发生等重要生理和病理过程。研究证明miRNAs通过下调不同癌基因或抑癌基因，而发挥抑癌基因或癌基因的作用。因此，有理由认为这些对细胞增殖具有正调或负调作用的miRNAs可能是肝再生复杂调控网络中的重要部分。但至今有关miRNAs与肝脏再生研究还很少，几个研究只限于肝脏再生启动和增殖阶段，还没肝再生终止相关的miRNAs研究报道。为此，本课题采用miRNAs芯片筛选大鼠肝再生后期(PHx后5d)miRNAs差

8、异表达谱，并对显著表达差异miRNAs检索targetscan数据库和MAS软件分析获得受此miRNAs调节的相应靶基因；进一步利用大鼠肝脏再生模型和肝细胞系，以及荧光素酶报告基因分析和基因干预技术等来探讨miRNA在肝再生终止中作用及可能机制。结果1．miRNAs芯片筛选和验证大鼠肝再生后期(PHx后5d)miRNAs差异表达miRNAs共10条(下调2条，上调8条)，其中表达差异达2倍以上的只