甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因植物表达载体的构建 与遗.pdf

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1、遗!传!"#"$%&’(!)*+,+-."!"!#"##!$!#%&$!’’#研究报告甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因植物表达载体的构建与遗传转化柑橘的研究胡!蓉#!魏!泓!陈善春$!何永睿$!第三军医大学实验动物中心$重庆#’’’%I"摘!要!基因工程领域的研究进展使得植物体成为具有重要经济价值的药用蛋白的生产体系(以含甲型肝炎病毒结构基因9JK2的克隆载体*>JK2%2&"为模板$用甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因特异引物进行L>:扩增$得到全长!F!M0衣壳蛋白融合基因序列(经测序鉴定后正向克隆于植物表达载体*7N&!&中$衣壳蛋白融合基因位于*7N&!&质粒HD

2、JK2左右边界区间内$处于>5OP%$(启动子控制之下(经限制性内切酶分析和L>:鉴定后利用冻融法将重组质粒*7N&!&D2导入根癌农杆菌Q72##’#(以锦橙!/+01234(+-*-3+3R80.9M"上胚轴为转化材料$通过根癌农杆菌介导法将衣壳蛋白融合基因转化到植物基因组中(&!’株转化外植体经卡那霉素$’E?)Q筛选$其中&%株生长状况良好未出现白化现象的拟转化芽微嫁接到实生砧木继续培养(L>:分析证明$&%株拟转化植株中有$株植物基因组中已导入甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因$转化率为#S&T(此研究是对遗传转化柑桔表达外源蛋白的初步探讨$为进一步研究食用

3、疫苗开辟了新途径(关键词!甲型肝炎病毒衣壳蛋白融合基因’柑橘’植物表达载体’遗传转化’食用疫苗中图分类号!UBI!!!!文献标识码!2!!!文章编号!’!$%VABB!!!’’#"’#V’#!$V’B!"#$%&’(%)"#"*%+,-./#%012&,$$)"#3,(%"&4)%+5,2/%)%)$6!/2$)7-&"%,)#8’$)"#9,#,/#79,#,%)(:&/#$*"&;/%)"#"*!)%&’$<=)#,#$)$>$?,(@#$YCNW+6?$>WCK(;56D>;)6$$WCZ+6?D:)4$WX:+6?!5678160819’-+:6;/*-

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