rapd分子标记技术在植物研究上的应用

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1、安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2013,41(25):10236—10238责任编辑石金友责任校对卢瑶RAPD分子标记技术在植物研究上的应用谭云,李忠海,黎继烈,贾媛(中南林业科技大学生命科学与技术学院,湖南长沙410004)摘要RAPD分子标记技术是利用随机引物,通过PCR扩增来检测DNA多态性的技术。文中主要介绍了RAPD分子标记技术的概念、基本原理以及优缺点,总结了RAPD分子标记技术在植物研究上的应用现状,并对RAPD分子标记技术在植物遗传多样性分析、基因指纹图谱构建、亲缘关系分析、品种鉴定以及药用植物和珍稀植物等方面的研究前景进行了展

2、望。关键词RAPD;遗传多样性;基因指纹图谱;品种鉴定中图分类号S188文献标识码A文章编号0517—6611(2013)25—10236—03ApplicationofRAPDMolecularMarkerTechnologyinPlantResearchTANYunetal(DepartmentofLifeScienceandTechnology,CentralSouthUniversityofForestry&Technology,Changsha,Hunan410004)AbstractRandomamplifiedpolymorphicDNAmolecularma

3、rkertechnologyuserandomprimersthroughPCRamplificationtodetecttheDNApolymorphism.Theconcept,basicprinciple,advantagesanddisadvantagesofRAPDmoleeularmarkertechnologywereintroduced,theappli—cationstatusinplantresearchwassummarized,theresearchprospectofRAPDmolecularmarkertechnologyinplantgenet

4、icdiversityanalysis,geneticfingerprintingconstruction,phylogeneticanalysis,varietyidentification,medicinalplantsandrareplantswereforecasted.’KeywordsRAPD;Geneticdiversity;Geneticfingerprint;Varietyidentification近年来,随着人们不断对遗传学和分子生物学进行了一系列随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链为引物,以所探索和研究,越来越多的遗传标记方法被发掘,包括在表现研究基因组

5、DNA为模板进行PCR扩增,经35—40个循环,型水平上对基因间接反映的遗传标记,如形态标记、细胞学产生大量不同长度的具有的多态性DNA片段,扩增产物通标记和生化标记,以及在DNA水平上对遗传变异的直接反过聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳分离,经EB染色或银染来映的遗传DNA分子标记。检测扩增产物DNA片段的多态性。这些扩增产物的目前,常用的DNA分子标记技术有:RFLP(Restriction多态性就反映了基因组相应区域的DNA多态性。虽然每FragmentLengthPolymorphism)技术、RAPD(RandomAmpli—一个引物检测基因的DNA多态性是有限的,但是

6、随机引物fledPolymorphismsDNA)技术、AFLP(AmplifiedFragment数量很多,基本上可以覆盖整个基因组,所以从理论上讲,LengthPolymorphism)技术和ISSR(Inter—SimpleSequenceRAPD分子标记技术可对物种的整个基因组DNA进行多态Repeat)技术。其中,RAPD分子标记技术与其他DNA技术性检测。相比较,具有操作简便、灵敏度高和多态性丰富等优点,是研1.3RAPD分子标记技术与PCR技术比较RAPD分子究物种遗传多样性和系统进化的重要技术,并在农业、林业、标记技术的本质是PCR反应,其继承了PCR技术效

7、率高、样医学、动物学、植物学和微生物学的各个领域都得到广泛应品用量少、灵敏度高、特异性强和检测容易的优点,并具有自用。在植物研究方面的应用,主要集中在物种遗传多样性分身独特的优点:①PCR反应所用引物为1对,长度为2Obp析、亲缘关系探讨、基因指纹图谱的构建以及物种品种鉴定左右,而RAPD分子标记所用引物为1个,长度为10bp;②等方面。笔者简要综述了RAPD分子标记技术的原理与特经典的PCR反应复性温度高,一般为60℃左右,而RAPD分点,详细描述了该技术在植物研究中的主要应用,并对其应子标记仅为36℃左右;③经

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