SZDB∕Z 313-2018 H5N6 亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测.pdf

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1、ICS11.220B41SZDB/Z深圳市标准化指导性技术文件SZDB/Z313—2018H5N6亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法Methodofthereal-timeRT-PCRfordetectionofsubtypeH5N6avianinfluenzavirus2018-07-04发布2018-08-01实施深圳市市场监督管理局发布SZDB/Z313—2018目次前言.................................................................

2、...............II1范围...............................................................................12规范性引用文件.....................................................................13术语和定义.........................................................................14

3、原理...............................................................................15仪器与试剂.........................................................................16生物安全要求.......................................................................27样品采集和前处理.........

4、..........................................................28核酸提取...........................................................................39核酸提取...........................................................................410分析条件设定..............................

5、........................................411结果判定..........................................................................4附录A(规范性附录)试常用剂配制....................................................6附录B(资料性附录)实时荧光RT-PCR反应体系配制....................................7附录C(资

6、料性附录)H5N6亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR典型扩增曲线图例..............8ISZDB/Z313—2018前言本文件按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本文件的附录A为规范性附录,附录B和附录C为资料性附录。本文件由深圳市检验检疫科学研究院提出。本文件由中华人民共和国深圳出入境检验检疫局归口。本文件起草单位:深圳市检验检疫科学研究院、深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心、深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心。本文件起草人:刘建利、孙洁、曾少灵、秦智锋、曹琛福、廖立珊、卢体康

7、、陶虹、张彩虹、詹爱军、林庆燕、陈书琨、吕建强、杨俊兴。IISZDB/Z313—2018H5N6亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法1范围本文件规定了H5N6亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR的检测方法。本文件适用于快速检测禽类咽拭子、鼻拭子、泄殖腔拭子、组织样品等临床样品中H5N6亚型流感病毒。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验

8、方法GB/T18088出入境动物检疫采样GB/T18936高致病性禽流感诊断技术GB19442高致病性禽流感防治技术规范GB19489实验室生物安全通用要求3缩略语CT值CYCLETHRESHOLD,反应管的荧光信号达到设定阈值时所经历的循环数DEPCDIETHYLPROCARBONATE,焦碳酸二乙酯FAM6-CARBOXY-FLUORESCEIN,6-羧基荧光素RT-

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