家蚕化学感受蛋白BmCSP8表达谱及多克隆抗体制备-论文.pdf

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1、中国摩擘c曼报2014，30(19)：298-303ChineseAgriculturalScienceBulletin家蚕化学感受蛋白BmCSP8表达谱及多克隆抗体制备邓培渊，李玉华，袁丹丹，王国霞，李长看’(郑州师范学院自然博物馆，郑州450044；郑州师范学院生命科学系，郑州450044：河南省煤炭总医院眼科，郑州450000)摘要：为阐明昆虫化学感受蛋白(chemosensoryproteins，CSPs)基因在昆虫不同组织部位和发育时期表达特性，运用半定量RT-PCR的方法分析了家蚕Bm

2、CSP8基因的时空表达谱。结果显示：(1)BmCSP8基因在雌、雄蛹中均表达，但在卵期不表达，在幼虫阶段，低龄期高于高龄期的表达量；(2)BmCSP8基因广泛分布于成虫身体各组织，但雌雄间的表达存在差异性，在主要感受器官触角中的表达量较低；运用重组BmCSP8蛋白成功制备兔多克隆抗体，Western—blot分析发现抗血清与触角蛋白发生特异性结合，为深入研究其生理功能打下基础。以上结果表明，BmCSP8基因可能参与了家蚕觅食的生理过程，且具有其他尚未明确的非嗅觉功能。关键词：家蚕；化学感受蛋白；半

3、定量RT-PCR；蛋白纯化；多克隆抗体中图分类号：Q966，Q786文献标志码：A论文编号：2013．3039ExpressionProfilingandPreparationofPolycionalAntibodyofChemosensoryProteinBmCSP8intheSilkworm．BombyxmoriDengPeiyuan‘，LiYuhua2，YuanDandan，WangGuoxia2,LiChangkan(。MuseumofNatural^幻ZhengzhouNormalUni

4、versity，Zhengzhou450044；2Departmentoj嗨Science,ZhengzhouNormalUniversity，Zhengzhou450044；3DepartmentofEye,HenanCoalGeneralHospital，Zhengzhou450000)Abstract：Inordertoclarifytheexpressioncharacteristicsofchemosensoryprotein(CSP)geneindifferenttissueparts

5、anddevelopmentalstagesininsect，thespatio—temporalexpressionprofileofBmCSP8wasinvestigatedusingsemi—quantitativeRT—PCR．Theresultsshowedthat：(1)BmCSP8wasexpressedinlarvaandpupastage，butnotineggstage．Inlarvastage，theexpressionwasmoreinyoungerstagesthanth

6、atinolderstages．(2)BmCSP8Wasexpressedinvariousadulttissuesincludingantenna，head(withoutantenna)，wing，leg，thoraxandabdomen．Butthereweredifferencesexistingbetweenfemaleandmale，andtheexpressionlevelwaslowinantennawhichWastheprimarysenseorgansofinsect．(3)

7、RabbitpolyclonalantibodywaspreparedsuccessfullybyrecombinantBmCSP8protein，Western—blotanlysisshowedthatantiserumcouldcombinedspecificallywiththeantennaprotein，italsoprovidedafoundationforfurtherresearchontheBmCSP8physiologicalfunctions．Theseresultssug

8、estedthatBmCSP8mayhasunknownnon—olfactoryfunctions，andmostlikelyinvolvedinthephysiologicalprocessofforaging．Keywords：Bombyxmori；chemosensoryprotein；semi——quantitativeRT—-PCR；proteinpurification；polyclonalantibody基金项目：国家自然基金“家蚕嗅觉受体与信息素结合蛋白相互作用的