免疫亲和层析-超高效液相色谱法测定大米中4种黄曲霉毒素-论文.pdf

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1、中国卫生检验杂志2014年8月第24卷第16期ChinJHealthLabTec，Aug2014，Vol24，No16·食品与药品检验·免疫亲和层析一超高效液相色谱法测定大米中4种黄曲霉毒素李可，丘汾深圳市福田区疾病预防控制中心，广东深圳518040摘要：目的建立大米基质中4种黄曲霉毒素B。、B、G和G的超高效液相色谱荧光检测器的测定方法。方法甲醇水提取大米中的黄曲霉毒素，免疫亲和柱净化富集。C．柱(3．0mm×50mm×1．7Ixm)分离，一定比例的甲醇乙腈水等度洗脱，萤光检测器定量检测。结果黄曲霉毒素B。、G在0．25Ixg／

2、L～4．00Ixg／L线性范围，黄曲霉毒素B：、G2在0．076g／L～1．20L线性范围，相关系数均在0．999及以上。本方法在大米介质中，总黄曲霉毒素检出限为0．04L。不剐加标浓度水平的回收率在75％～96％，精密度在0．79％一4．O％。结论该方法分离度好，分析数据速度快，准确度高，重复性好，适合大米中黄曲霉毒素B、B、G和G的检测分析。关键词：超高效液相色谱；免疫亲和层析；黄曲霉毒素中图分类号：TS210．7文献标识码：A文章编号：1004—8685(2014)16—2328—03Determinationoffourk

3、indsofaflatoxinsinricebyimmunoafinitychromatography·—-UPLCuKe．QIUFenFutianDistr~tCen~rforDiseaseControlandPrevention，Shenzhen518040，ChinaAbstract：ObjectiveToestablishamethodforanalysisofaflatoxinsB1，B2，G1andG2inriceusingUPLCandfluorescencedetector．MethodsTheaflatoxins

4、wereextractedfromricewithmethanolandwater，thenenrichedandpurifiedbyimmunoaf-finitycolumn．TheseparationwascarriedoutonC18column(3．0mmx50mm×1．7Ixm)withwater+methanol+acetonitrileatacertainproportionasmobilephase．Fluorescencedetectorwasusedforquantitativeanalysis．Results

5、TheaflatoxinsB1，Glshowedgoodlinearityintherangeof0．25g／L～4．00L(r>0．999)，whiletheaflatoxinsB2andG2showedgoodline—arityintherangeof0．076Ixg／L～1．20L(r>0．999)．Thetotaldetectionlimitofaflatoxinsinthericewas0．04g／L．Therecoverywerebetween75％and96％withRSDsof0．79％～4．0％．Conclus

6、ionThemethodissuitablefordetectionandanalysisofaflatoxinsinthericewithbetterseparationeffect，speed，goodaccuracyandrepeatability．KeyWords：Ultrahighperformanceliquidchromatography；Immunoaffinitychromatography；Aflatoxins黄曲霉毒素(aspergillusflavustoxin，Aflatoxins)是王君等研究表明虽然大

7、米中黄曲霉毒素含量水平低世界卫生组织癌症研究机构划定的I类致癌物。目于花生J，但因其膳食摄人量高，在人群大米和玉米前分离鉴定出来的有20余种，是一组毒性强、理化性对我国人群黄曲霉毒素膳食暴露中提供的贡献率都质稳定、不容易分解的化合物。黄曲霉毒素B(Aria．达到了90％，远远高于花生和花生油。toxinB1，AFB1)、黄曲霉毒素B2(AflatoxinB2，AFB2)、黄曲霉毒素常用的测定方法是高效液相色谱黄曲霉毒素G(AflatoxinG，AFG。)、黄曲霉毒素G法J，该方法仪器分析时间长，对于响应较低的AFG(Aflatox

8、inG，AFG：)位居黄曲霉毒素中毒性最强几和AFB灵敏度较低，如果柱后衍生条件不严格控制，种之列。我国在2011年修订了真菌毒素限量¨J，对可能出现假阳性或结果重复性差等情况，达不到大米粮食、花生、调味品等各类食品AFB的限量作出了不介质中痕量水