Sorcin的表达影响人胶质瘤细胞对顺铂的敏感性-论文.pdf

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1、中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2013。29(7)：1202．1206[文章编号]1000-4718(2013)07-1202-05Sorcin的表达影响人胶质瘤细胞对顺铂的敏感性木刘宁，孙连坤，杨晓春，马丽伟，苏静△(吉林大学白求恩医学院病理生理学系，吉林长春130021)[摘要]目的：研究可溶性耐药相关钙结合蛋白(sorein)在人胶质瘤细胞对顺铂敏感性中的作用。方法：构建pSilencer3．1．H1-sorcinsiRNA表达质粒；质粒转染人胶质瘤U251细胞；RT-PCR和Wes

2、ternblotting法检测sorcinmRNA和蛋白表达的变化；MTY法检测U251细胞的生存率；Westernblotting检测耐药相关蛋白的表达变化。结果：经酶切和测序鉴定，成功构建pSilencerr3．1-HI-sorcinsiRNA表达载体；将该表达载体转染U251细胞，RT—PCR和Westernblotting结果显示soreinmRNA和蛋白表达量降低(P<0．05)；MTr结果显示，抑制sorein表达可增强U251细胞对顺铂的敏感性(P<0．05)；同时发现抑制U251细胞的sorcin表达能降低耐药相关蛋白P

3、-糖蛋白(P．sp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的蛋白水平(P<0．05)。结论：抑制sorein表达增强U251细胞对顺铂的敏感性，其作用机制可能与降低耐药相关蛋白P-gP和MRP1的表达有关，提示sorein可能与胶质瘤细胞顺铂耐药有关。[关键词]神经胶质瘤；顺铂；耐药性；可溶性耐药相关钙结合蛋白[中图分类号]R739．41[文献标志码]Adoi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．07．010Efectofsorcinexpressiononsensitivityofhumangliomacellsto

4、cisplatinUUNing，SUNLian—kun，YANGXiao-chun，MALi-wei，SUJing(DepartmentofPathophysiology，NormanBethuneCollegeofMedicine，朋inUniversity，Changchun130021，China．E-mail：sujing@flu．edu．cn)[ABSTRACT]AIM：Toinvestigatetheefectofsoreinexpressiononthesensitivityofhumangliomacellstocisp

5、l—atin．METHODS：pSilencerTM31-H1-sorcinsiRNArecombinantplasmidwasconstructed，andtransfectedintohumansli—．omaU251ceNs．RT-PCRandWesternblottingwereusedtoanalyzetheexpressionofsorcinatmRNAandproteinlevelsaf-tertransfection．TheviabilityofU251cellsWasmeasuredbyMTYassay．Theprot

6、einexpressionofP-glycoprotein(P—gP)andmultidrugresistance·associatedprotein1(MRP1)inU251cellsWasdetectedbyWesternblotting．RESULTS：TheplasmidpSileneerTM3．1一Hl-sorcinsiRNAwassuccessfullyconstructed，andWasconfirmedbyrestrictionenzymedigestionandsequenceanalysis．Theexpressio

7、nofsoreinatmRNAandproteinlevelsWassignificantlydecreasedaftersorcinsiRNAWastransfectedintoU251cells(P<0．05)．InhibitionofsoreinexpressionsignificantlydecreasedtheviabilityofU251cellstreatedwithcispMtin(P<0．05)，andtheexpressionofP—gPandMRP1proteinsWasalsoinhibited(P<0．05)．

8、CONCLUSION：InhibitionofsorcinexpressionincreasesthesensitivityofU251cellstocisplatinbydecreasingtheex-p