Gankyrin基因沉默对人卵巢癌SKOV3／CDDP细胞顺铂耐药性的逆转作用和机制-论文.pdf

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1、中国癌症杂志2014年第24卷第1期CHINAONCOLOGY2O14Vo1．24No．135Gankyrin基因沉默对人卵巢癌SKOV3／CDDP~胞顺铂耐药性的逆转作用和机制王倩程垫天津市水阁医院妇产科，天津300120[摘要]背景与目的：卵巢癌是常见的妇科肿瘤，抗肿瘤药耐药性的产生是卵巢癌治疗失败的主要原因之一，Gankyrin基因被认为与肿瘤耐药性密切相关，本文探讨了Gankyrin基因沉默对卵巢癌耐顺铂细胞系SKOV3／DDPJI[~铂耐药性的逆转作用及机制。方法：应用real—timePCR技术考察Gankyrin在

2、SKOV3~NSKOV3／DDPfm胞中的表达，应用MTS法检~6ankyrin对SKOV3／DDP细胞顺铂耐受性的影响，应用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡和细胞内罗丹明一123(Rhodamine—I23，Rh一123)含量的变化，Westernblot和rea卜timePCR技术检测肿瘤细胞耐药相关蛋白MDR1、Caspase3／8、SurvivinUBc卜2蛋白表达，Westernb1ot法检~lJp53、NF—KB和PTEN蛋白表达UAKT磷酸化水平。结果：Gankyrin在SK0V3／DDP细胞中表达升高，沉默Gankyr

3、in基因后可增加SKOV3／DDP细胞对顺铂的敏感性。基因沉默前后耐药逆转倍数(resistantfactor，RF)为i．81和2．45，肿瘤细胞中Rh一123含量提高了1．73和2．42倍，细胞凋亡率是对照组的2．23倍和4．23倍，耐药相关蛋白MDR1、Survivin和Bc卜2蛋白水平显著下降，MDR1mRNA表达是对照组的62．8％和21．6％，SurvivinmRNA表达是对照组的24．5％和i0．3％，Bc卜2mRNA表达是对照组的47．5％和18．4％，Caspase一3／8、P53和PTEN表达水平上升，AKT

4、磷酸化和NF—KB水平下降。结论：沉默Gankyrin基因可逆转SKOV3／DDP对顺铂的耐药性，可能与抑制药物外排，促进细胞凋亡有关，PTEN／AKT／NF—KB／p53信号通路可能是其中心环节。[关键词]Gankyrin基因；卵巢癌；顺铂耐药DOI：10．3969／j．issn．1007—3969．2014．01．006中图分类号：R737_31文献标志码：A文章编号：1007—3639(2014)01．0035．06TheeffectsandmechanismsofGankyrinsilencingonreversingt

5、hecisplatinresistanceofhumanovariancancerSKOV3／DDPcelllineWANGQian，CHENGKun(DepartmentofGynaecologyandObstetrics，TianjinShuiGeHospital，Tianjin300120，China)Correspondenceto：WANGQianE—mail：wangqiansgh@126．corn[Abstract]Backgroundandpurpose：Ovariancanceristhecommongynec

6、ologicalcancer，andthedrugresistanceofanti—tumordrugwasoneofmajorreasonsfortherapyfailure，somestudiesconsideredthatthereisaclosedrelationshipbetweenGan@rinanddrugresistance．Inthisstudy,weinvestigatedtheefectsandmechanismsofGankyrinsilencingonreversingthecisplatinresis

7、tanceofovariancancerdrug—resistantSKOV3／DDPcellline．Methods：TheexpressionofOankyrininSKOV3andSKOV3／DDPcellswasmeasuredbyrea1．timePCRassay,MTSassaywasemployedtodeterminetheeffectofGankyrinonSKOV3／DDPsensitivitytocisplatin，apoptosisrateandintracellularconcentrationofrh

8、odamine．123rRh一123)weredeterminedbyflowcytometry,theexpressionofmulti．drugsresistantproteinMDR1Caspase一3／8．SurvivinandBcl一2weredete