人参皂苷Rb1改善高脂喂养肥胖小鼠胰岛素抵抗和脂肪异位沉积-论文.pdf

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1、第38卷第23期中圈中药杂志Vo1．38，Issue232013年12月ChinaJournaIofChineseMaterisMedicsDecember，2013·药理·人参皂苷Rb改善高脂喂养肥胖小鼠胰岛素抵抗和脂肪异位沉积尚文斌，于希忠，王国强，赵娟(南京中医药大学第一临床医学院临床医学实验中心，江苏南京210023)[摘要]人参皂苷Rb，是人参的主要活性成分，前期体外实验显示人参皂苷Rb能够抑制脂肪细胞脂肪分解和促进葡萄糖转运的作用。本研究利用高脂饮食诱导的肥胖小鼠，研究人参皂苷Rb对胰岛素抵抗和脂肪异位沉积的影

2、响及其作用的分子机制。将高脂喂养的肥胖雄性C57／L小鼠，随机分为高脂组(DIO组)，人参皂苷Rb组(Rb组)和罗格列酮组(Rog组)，继续给予高脂饲料喂养，另设立正常饲料喂养的C57／L小鼠为正常组(Nc组)；分别按20，10mg·kg体重给予Rb组和Rog组小鼠每天腹腔注射人参皂苷Rb和罗格列酮，NC组和DIO组以等量的生理盐水腹腔注射。治疗2周后，进行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTr)，3d后，处死小鼠，留取血清，检测胰岛素、游离脂肪酸(FFA)及生化指标；称取肝脏质量，检测肝脏内甘油三酯含量和病理检测；称取附睾脂

3、肪质量，蛋白印迹检测PDE3B，HSL，周脂素。结果显示人参Rb治疗2周明显改善肥胖小鼠的葡萄糖耐量，除了0—120min，Rb组葡萄糖耐量曲线下面积(0～30，0—60，0—90min)较DIO组均显著下降(P<0．05，=5)，胰岛素抵抗指数(HOMA—IR)显著下降(P<0．05，n=5)；并且Rb显著降低了肥胖小鼠肝脏内的脂肪水平(P<0．05，n=5)，肝脏质量／体重也明显下降(P<0．05，n=8)；Rb治疗后，肥胖小鼠血中升高的FFA水平也明显下降(P<0．05，=8)；附睾脂肪中周脂素表达水平得到部分恢复，

4、但对PDE3B的表达以及HSL的表达和磷酸化激活未见明显影响。以上研究结果表明人参皂苷Rb能够通过上调脂肪组织周脂素的表达，减少游离脂肪酸的释放和甘油三酯的异位沉积，这可能是其改善机体胰岛素抵抗和糖代谢异常的作用机制之一。[关键词】人参皂苷；胰岛素抵抗；脂肪分解；肝脏脂肪沉积人参是中医临床常用的补益类中药，人参及其1材料多种有效成分具有抗糖尿病的作用，而人参皂苷1．1动物6周龄健康雄性、体重20g左右C57／LRb是人参的最主要的活性成分。作者的前期体外小鼠，购自上海斯莱克实验动物责任公司，动物许可研究发现人参皂苷Rb促进

5、3T3一L1前脂肪细胞向证号SCXK(沪)2007-0005。脂肪细胞的分化并抑制脂肪分解，减少游离脂肪酸1．2试剂普通饲料热量组成碳水化合物占(FFAs)的释放。j，并且通过激活胰岛素信号通路60％、蛋白质22％、脂肪10％、纤维素和其他成分促进脂肪和肌肉细胞的葡萄糖转运，表明其有胰岛8％，高脂饲料：猪油20％、白糖4％、奶粉2％、胆固素样的作用HJ，这些结果部分阐明了人参皂苷Rb醇1％、普通饲料73％，2种饲料均购自上海斯莱克的抗糖尿病作用的分子机制，但是人参皂苷Rb对实验动物责任公司。人参皂苷Rb及罗格列酮购自于机体

6、整体胰岛素敏感性的影响以及抑制脂肪酸溢中国食品药品检定研究院；小鼠游离脂肪酸试剂盒出的分子机制尚缺乏深入研究。本研究利用高脂喂购自日本Wako公司．／J、鼠胰岛素ELISA试剂盒购养的肥胖小鼠模型，观察人参皂苷Rb对机体胰岛自瑞典Mercodia公司；TG测定试剂盒购自美国Sig—素敏感性和脂肪异位沉积的影响，并探索其可能的ma公司；抗．actin抗体、抗HSL抗体、Phospho．HSL机制。(Ser563)、抗perilipin抗体和羊抗兔第二抗体均购自美国CellSignalingtechnology；ECL化学发光

7、检测[收稿日期]2013-O6-08试剂盒、BCA蛋白检测试剂盒购自Pierce公司。[基金项目]国家自然科学基金项目(81073110)；江苏省中药药效1．3仪器血糖仪(OneTouch@UltraEasy。M)购与安全性评价重点实验室开放课题(P09014)自强生(中国)医疗器械有限公司，酶标仪购自[通信作者]尚文斌，副教授，Tel：(025)85811146，E—mail：wbs—hang@hotmm1．colnBioTek公司，电泳仪、半干转膜系统均购自Bio．·4119．第38卷第23期圈2013年12月。dou

8、rn。羹壹VoD1．ec3e8m，Ibsesru，e20213Rad公司。3结果2方法3．1人参皂苷Rb改善肥胖小鼠的糖耐量和胰岛2．1造模及给药将38只小鼠分为2组，分别为素抵抗腹腔注射葡萄糖耐量试验显示高脂喂养肥正常饲料组(NC，／'t=8)和高脂饲料组(=30)，高胖小鼠与正常小鼠相比，葡萄糖耐量