抗戊型肝炎病毒IgG抗体定量线性标准品的标定及初步应用.pdf

《抗戊型肝炎病毒IgG抗体定量线性标准品的标定及初步应用.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、中国生物制品学杂志2008年9月第21卷第9期ChinJBiologicalsSeptember2008，Vo1．21No．9·799·中国图书分类号R392．33文献标识码A文章编号1004·5503《2008)09·0799-04【诊断制品】抗戊型肝炎病毒IgG抗体定量线性标准品的标定及初步应用黄维金-吴星周诚-何鹏葛胜祥乔杉，张华远‘蓝海云辜文洁梁争论祁自柏李河民【摘要】目的建立抗戊型肝炎病毒(Anti．HEV)IgG抗体的定量线性标准品，并进行初步应用。方法利用抗-HEVIgG和抗一HEVIgMELISA检测试剂筛选出

2、1份抗．HEVIgG阳性血清L9，经基因1型和4型的HEVORF2C．端抗原及239抗原进行Westernblot确认后，用WHO定量标准品，由3个实验室协作标定，利用量反应平行线法计算其抗．HEVIgG的含量。考察已标定的L9血清的稳定性，并用所标定的1．5倍系列稀释的血清对国内外6家抗．HEVIgG试剂的灵敏度进行检测。选择一灵敏度较高的试剂，在其线性范围内取L9的5个稀释度作为抗一HEVIgG抗体定量线性标准，对高、中、低浓度的3份临床血清重复检测5次，考察其重复性；对实验感染猴的系列血清中抗．HEVIgG含量进行定量检

3、测，考核该定量线性标准品的应用效果；并对每次定量试验中的线性方程进行分析，确定相关系数r值和斜率k值的范围。结果经国内外试剂检测筛选出的阳性血清L9与基因1型和4型的HEVORF2C．端抗原及239抗原均有阳性反应。经协作标定，L9血清抗．HEVIgG含量为16．9U／ml。L9血清在一20~C下保存6、12、18个月，2～8~C保存24、48、96h后，定量结果均在95％置信区间内，且抗一HEVIgG含量均未明显下降。6家抗．HEVIgG检测试剂灵敏度差异较大，范围为0．035．o0U／ml。确定L9血清从0．42U／ml开

4、始的5个1．5倍系列稀释度，作为某一试剂抗一HEVIgG抗体定量线性标准品。利用该线性定量标准检测高、中、低浓度的3份临床血清，定量结果重复性较好；对实验感染猴系列血清进行定量检测，结果可有效地反映抗体水平变化趋势；94％的定量检测试验，r≥0．98，1．15≥k≥0．95。结论已建立了抗一HEVIsG抗体定量线性标准品，可用于疫苗免疫原性评价和流行病学调查。【关键词】戊型肝炎病毒；IgG抗体；标准品；定量CalibrationandPreliminaryApplicationofLinearQuantitationStand

5、ardforAnti·HEVIgGAntibodyHUANGWei-jin，WUXing，ZHOUCheng，etal(~NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBio-logicalProducts，Beijing100050，China)【Abstract】objectiveTodevelopalinearquantitationstandardforanti—hepatitisEvirus(HEV)IgGantibody．MethodsAnanti-HEVIgGp

6、ositiveserumsampleL9wasscreenedbyusingAnti—HEVIgMELISAkitandAnti—HEVIgGEUSAkitandcon-finnedbyWesternblottingwithHEV0RF2C—terminalantigenofgenotypes1and4and239antigen．thencalibratedby3laborato-tiesusingWHOquantitationstandard．Calculatetheanti·HEVIgGcontentbydose—resp

7、onseparallellineassay，andevaluatethesta-bilityofcalibratedserumsample．Thesensitivitiesof6domesticandimportedanti—HEVIgGELISAkitswereevaluatedwiththecali—bratedserumsamplediluted1．5一f0ldserially．Alinearquantitationstandardforanti—HEVIgGantibodyconsistedof5dilutionsof

8、L9withinthelineardeterminationrangeofahighlysensitivekitandevaluatedforreproducibilitybyrepeattestfor3clinicalserumsam-pies，athigh，moderat