顺铂与CIK细胞对A549细胞杀伤协同作用机制的初步研究-论文.pdf

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1、中华肿瘤防治杂志2013年8月第2o卷第16期CHINJCANCERPREVTREAT，August2013，Vo1．20No．16《实验研究／论著l顺铂与CIK细胞对A549细胞杀伤协同作用机制的初步研究张晓娟梅家转赵继智冯睿婷刘桂举郑州人民医院肿瘤内科，河南郑州450003【摘要】目的：探讨不同浓度顺铂作用人肺腺癌A549细胞24h后，NKG2D配体表达的改变及细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)杀伤活性的变化。方法：MTT法测定顺铂作用A549细胞24h的5O抑制浓度(ICs。)；流式细胞仪检测IC。、1／2IC。和1／4IC。浓度顺铂分别作用A549细胞24h后，A549细胞表面NKG2D

2、配体表达的变化，配体包括MHC-I类链相关分子MICA和MICB以及人巨细胞病毒糖蛋白UL16结合蛋白ULBP1、ULBP2和ULBP3；乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时，CIK细胞对IC。浓度的顺铂作用前及作用24h后A549细胞的杀伤活性。结果：不同浓度顺铂作用24h后，A549细胞表面MICA(F一12．490，P一0．002)、MICB(F一41．492，P<0．001)、ULBP2(F：375．773，P<0．001)和ULBP3(F=59．594，P<0．001)表达均显著升高；ULBP1表达降低，F一55．693，P<0．001。效靶比lO：1时，IC5。浓度顺铂作用24h前、后

3、的A549细胞的杀伤活性分别为(11．88±1．57)和(17．64±1．44)，F一21．770，P=0．010；2O：l时分别为(35．56±1．98)和(46．39士3．51)，F一21．653，P一0．010；30：l时分别为(45．03±1．74)和(73．81±1．62)％，F：439．578，Pd0．001。结论：顺铂提高A549细胞NKG2D配体MICA、MICB、ULBP2和ULBP3的表达，增强A549细胞对CIK细胞杀伤的敏感性。【关键词】肺癌；顺铂；细胞因子诱导的杀伤细胞；NKG2D配体；化疗中华肿瘤防治杂志，2013，20(16)：1229—1231Sequentia

4、leffectofCisplatinonkillingeffectofCIKcelltohumanlungadenocarcinomaA549celllineZHANGXiao—juan，MEIJia—zhuan，ZHAOJi—zhi，FENGRui—ting，LIUGui—juDepartmentofOncology．ZhengzhouPeople’sHospital，Zhengzhou450003，P．R．China[ABSTRACT]OBJECTIVE：ToanalysetheeffectsofcisplatinontheexpressionofNKG2Dligandsandthecyt

5、otoxicityofcytokine-inducedkiller(CIK)ceilsagainsthumanlungadenocarcinomacelIlineA549after24htreatedwithdifferentconcentrationsofcisplatin．METHODS：TheICI。ofcisplatinagainstA549cellsweremeasuredbyMTTassay．ExpressionofNKG2Dligands(MICA，MICB，ULBP1，ULBP2，ULBP3)onsurfaceofA549eellbeforeandafter24htreated

6、bycis-platin(IC5o，1／2IC5o，1／4IC5o)wereassaiedbyflowcytometery．CytotoxicitiesofCIKceilsagainstA549ceilswereana—lyzedbyLDHreleasingassayateffector—to—targetcellratio(E：T)ofl0：l，20：1，3O：1．RESULTS：ExpressionsofMICA，MICB，ULBP2，ULBP3wereincreasedinA549cellstreatedwithdifferentconcentrationsofcisplatinfor2

7、4h(Fvalueswere12．490，41．492，375．773，59．594，allP