高效液相色谱法测量患儿血清甲氨蝶呤浓度.pdf

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1、国际检验医学杂志2014年7月第35卷第13期lntJLabMed，July2014，Vo1．35，No．13·检验技术与方法·高效液相色谱法测量患儿血清甲氨蝶呤浓度张诗海，孙丽(安徽省儿童医院医学检验中心，安徽合肥230051)摘要：目的建立测定惠儿血清中甲氨蝶呤浓度的方法，用于临床患儿血药浓度监测。方法色谱柱采用岛津原装柱(250mm×4．6mm，5m)，流动相为0．025mol／L磷酸二氢钠溶液(pH为5．41)一甲醇(76：24，V／v)，流速1．0mI／min，检测波长313nm，柱温35

2、℃，样品经10高氯酸沉淀蛋白后，取上清液13OL加1OL1mol／INaOH后直接进样。结果血浆中甲氨蝶呤的浓度在0．00～4．84umol／L和4．84～10．O0vmol／L范围内与峰面积线性关系良好，rl=1，r2：1，平均回收率分别为61．67和71．83，日内及日间精密度的RSD小于1O和12(n一3)。结论所用方法简便快速、准确可靠、灵敏度高、重现性好、线性范围宽和成本低，适于甲氨蝶呤的血药浓度监测。关键词：色谱法，高压液相；甲氨蝶呤；血清D()I：10．3969／j．issn．1673

3、-4130．2014．13．O42文献标识码：A文章编号：1673-4130(2014)13-1762—02HPLCmethodfordeterminingserummethotrexateconcentrationinchildrenpatientsZhangShihai，SunLi(AnhuiProvincialChildrensHospital，Hefei，Anhui230051，China)Abstract：ObjectiveToestablishaHPLCmethodfordetermin

4、ingtheserummethotrexate(MTX)concentrationinchildrenpatientsformonitoringtheblooddrugconcentrationinclinic．MethodsThechromatographicanalyticalcolumnwastheShimaduzC18colum(250mmX4．6mm，5m)，themobilephasewas0．025mol／LNaH2PO4(pH5．41)一methanol(76：24，V／V)．The

5、flowratewas1．0mL／rnin．Thedetectionwavelengthwas313nm．Thecolumntemperaturewassetat35℃．Theplasmasamplesweredepositeddowntheproteinwith10HC104，thesupernatantliquid130Laddedwith1mol／LNaOH10Lwasdirectlyinjectedfordetermination．ResultsThemassconcentrationofM

6、TXintherangeof0．00—4．84／2mol／Land4．84—10．00umol／Lshowedthegoodlinearrelationwiththepeakarea，r1=1，r2—1．Themeanrecoveryrateswere61．67and71．83．Intra—dayandinter-dayprecisionwere<10and12，respectively(一3)．ConclusionTheusedmethodissimple，accurateandreliablew

7、ithhighsensitivity，goodreproducibilityandwidelinearityrange，whichissuitableforthemonitoringbloodMTXconcentration．Keywords：chromatography，highpressureliquid；methotrexate；serum甲氨蝶呤(MTX)是临床常用于小儿急性淋巴细胞白IfIL病加1O高氯酸溶液40L，涡旋混合30s，12000r／min离心和淋巴瘤的化疗药物，由于受到患者肝

8、脏代谢功能和体内药物10rain，取上清液130“L置另一干净离心管中，加入1mol／I浓度蓄积分布等个体差异的影响，临床常出现药物中毒现象，氢氧化钠溶液1OL，涡旋混合15s，取2OL进样分析。监测甲氨蝶呤的血药浓度很是必要。常用于测定甲氨蝶呤的1．3．3标准品和质控品的处理取MTX对照品适量，分析方法主要有微生物法、荧光偏振免疫法和高效液相色谱法。高天平准确称定，用1mol／L的NaOH溶液配制成96．82效液相色谱法以其测量价格便宜、准确而被临床采用。笔者用mo