原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

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1、原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响罗小平，杨进，程宇，徐朝军作者单位:415000湖南省常德卷烟厂职工医院心内科(罗小平);410007长沙市，湖南中医药大学第一附属医院胸心外科(杨进、程宇、徐朝军)【摘要】目的研究原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT实验检测原花青素对体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响，运用流式细胞术、基因组DNA电泳观察凋亡特征性“梯状”条带检测细胞凋亡，采用Caspase活性定量检测试剂盒分析Caspase-9、Caspase-3的活性。结果原花青素对人冠状动脉平滑肌细胞具有明显的抑制

2、作用，且其作用有剂量依赖性。流式细胞仪检测显示原花青素可以显著诱导人冠状动脉平滑肌细胞凋亡，DNA电泳显示原花青素作用于人冠状动脉平滑肌细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带。原花青素作用后人冠状动脉平滑肌细胞Caspase-9、Caspase-3活性明显升高。结论原花青素可能通过线粒体信号通路抑制人冠状动脉平滑肌细胞的生长并诱导其凋亡。【关键词】原花青素;人冠状动脉平滑肌细胞;细胞凋亡【中图分类号】R543．3【文献标识码】A【文章编号】1674－3296(2010)20－0020－03Effectofprocyanidinonprolifera

3、tionandapoptosisinhumancoronaryarterysmoothmusclecellsLUOXiao-ping*，YANGJin，CHENGYu，etal．*DepartmentofCardiovasology，TheStaff-workerHospitalofChangdeCigaretteFactory，Hunan415000，China【Abstract】ObjectiveTostudytheeffectofprocyanidinsonproliferationandapoptosisinhumancoronaryarte

4、rysmoothmusclecells．MethodsTheeffectofprocyanidinoncellviabilityinhumancoronaryarterysmoothmusclecellswase-valuatedbyMTTassay．CellapoptosiswasobservedbyflowcytometryandDNAladderanalysis．ActivitiesofCaspase-9andCaspase-3wereassayedwithCaspasecolorimetricassaykit．ResultsProcyanid

5、inonhumancoronaryarterysmoothmusclecellswassignificantlyinhibited，andtheireffectsweredosedependent．Flowcytometryshowedthatprocyanidincansignificantlyinduceapoptosisinhumancoronaryarterysmoothmusclecells，DNAelectrophoresisshowedthatprocyanidininhumancoro-naryarterysmoothmusclece

6、llsapoptosisincell-specificDNAladderbands．ProcyanidindescendantscoronaryarterysmoothmusclecellsCaspase-9，Caspase-3wassignificantlyincreased．ConclusionProanthocyanidinmaybethroughthemitochondri-alpathwayinhibitshumancoronaryarterysmoothmusclecellgrowthandinducedapoptosis．【Keywor

7、ds】Procyanidin;Humancoronaryarterysmoothmusclecells;Apoptosis原花青素是植物中广泛存在的一大类多酚类聚合物的总称，为双黄酮的衍生物，由不同数目的黄烷醇聚合而成。它在自然界中广泛存在，主要存在于植物的果实、种子、花和外皮中，也存在于某些饮料(茶叶、啤酒)、蔬菜、水果和粮食中。研究发现，原花青素具有抗氧化、清除自由基、心血管保护、抗肿瘤、抗炎、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡等广泛的生物活性［1～5］。本实验观察原花青素对人冠状动脉细胞增殖及凋亡的影响，并初步探讨其机制。1材料与方法1．1主要试剂PC

8、(含量＞95%)购自天津尖峰公司，用无菌三蒸水溶解至所需浓度，过滤除菌后保存;Medium231培养基购自G