超声辐照对培养的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

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1、重庆医科大学硕士学位论文超声辐照对培养的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响姓名：张俊霞申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：黄晶2003.5.1重庆医科大学硕士研究生毕业论文英文缩写VSMCSHIFUMTTELISABrdUEDTAPBSUSEBSDMSOO．DDABmlnsecMHzWCmrpm符号说明英文缩写英文全称VascularsmoothmusclecellsHighintensityfocusedultrasound3一(4，5一dimethylthiazol-2y1)一2，5一diphenyltetrazolium

2、bromideEnzyme—linkedimmtmosorbentassay5-Bromo—-2--DeoxyUridineEthylenediaminetetraaceticacidPhosphate—bufferedsolutionUltrasoundexposureBovineseD．1mDimethylsulfoxideOpticdensityDiaminobenzidineMinuteSecondMegahertzWaRCentimeterRevolutionsperminute中文全称血管平滑肌细胞高强度聚焦超声四

3、甲基偶氮唑盐酶联免疫吸附实验溴脱氧尿苷乙二胺四乙酸磷酸盐缓冲溶液超声辐照小牛血清二甲基亚砜光密度二氨基联苯胺分秒兆赫瓦特厘米转数／分重庆医科大学硕士研究生毕业论文超声辐照对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响摘要目的：观察超声波的声强、频率、照射时间三因素不同水平对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和凋亡的影响，筛选用于防止介入治疗后血管再狭窄的较理想的超声辐照参数，并对其生物学效应的机理作初步探讨。f{方法：单声源压电陶瓷超声辐照系统声强连续可调。以工作频率f0．705MHz，2．170MHz，5．700MHz，强度0．5

4、W／cm21．0W／cm22．0W／tin2辐照体外培养的VSMCs，台盼蓝排斥实验分析不同条件超声辐照后即刻细胞存活率，以此为基础，利用MTT比色法描述不同条件超声辐照后5天VSMCs的生长动力学变化，得出较理想的辐照条件；用BrdU掺入法检测超声辐照对VSMCsS期DNA复制的影响；ELISA法检测不同条件辐照后4hrVSMCs凋亡情况。结果：1．超声辐照对培养的血管平滑肌细胞有直接杀伤作用，该作用随辐照强度和辐照时间的增加而增加，相同辐照强度和时间下，低频超声该作用更显著。O．705MHz，0．5W／cm2，5min组与

5、对照组相比存活率为0．977+_0．021VS0．997_+0．006，P>0．05；2．17MHz，2．0W／era20．5min组与对照组相比存活率为O．583±0．047VS0．997_+O．006，P<0．05。重庆医科大学硕士研究生毕业论文2．MTT法测定细胞生长曲线：超声辐照组较对照组VSMCs生长曲线平缓，0．705MHz组以0．5W／cm2，5min辐照最为明显，实验第5天辐照组与对照组0．D值分别为0．313±0．011，0．639±0．013，P<0．05。3．BrdU掺入法测定s期细胞增殖的结果：O．70

6、5MHz，0．5W／cm2，5min超声辐照组BrdU阳性细胞率低于对照组(40．5±6．8％VS55．8±3．3％．P<0．05)。4．ELISA检测发现0．705MHz，0．5W／cm2，5min超声辐照的凋亡富积因子(enrichmentfactor)与阳性对照相比为1．851±O．087VS1．924±o．074，P=0．836>o．05。2少舡一／结论：一定剂量的超声辐照对培养的VSMCs有明显的杀伤作用。在本实验设置的辐照参数中，0．705MHz，0．5W／cm2，5min超声辐照在无明显杀伤细胞的情况下能较好地抑

7、制培养的VSMCs生长，一定程度上阻止S期DNA复制。实验发现并非辐照强度越强，时间越长，超声诱导凋亡的作用越显著，这可能与细胞发生死亡而非凋亡有关。本研究提示USE是一种潜在的治疗血管增殖性疾病的手段。关键词：血管平滑肌细吟超声辐照J}增殖，凋亡，重庆医科大学硕士研究生毕业论文PRoLIFERATIoNINHIBITIoNANDAPoPTOSISINDUCTIoNoFCULTUREDVASCULARSMooTHMUSCLECELLSAFTERULTRASoUNDEXPoSUREABSTRACTPurpose：Unchecke

8、dproliferationofvascularmusclecells(VSMCs)andsubsequentrestenosisremainamajorlimitationafterinterventionaltherapy．Inthisstudywescreendiffe