第二章基因工程的酶学基础名师编辑PPT课件.ppt

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1、第二章基因工程的酶学基础第一节限制性内切酶第二节DNA连接酶第三节DNA聚合酶和反转录酶第四节DNA修饰酶第五节外切核酸酶第六节单链内切核酸酶第七节RNA酶武憨苔零草骤听辑睛竭垃谋手昔钉吵亭渐净楔诡弦戍慈紫寞筐奢辅镰加牛第二章基因工程的酶学基础第二章基因工程的酶学基础峪卜端峡贵豫杰今父窜裂短立蓟故轧较媚粟咋裕嘴录克炳署拦寺钨携敌畴第二章基因工程的酶学基础名师编辑PPT课件第二章基因工程的酶学基础核酸酶：通过切割相邻的两个核苷酸残基之间的磷酸二酯键，从而导致核酸分子多核酸链发生水解断裂的蛋白酶。基本概念及其生物功能特异水解断裂RNA分子，核糖核酸酶（RNase）特异

2、水解断裂DNA分子，脱氧核糖核酸酶（DNase）非专一性酶，底物或者为DNA或者为RNA从核酸分子末端逐个降解核苷酸，叫外切核酸酶从核酸分子内部切割磷酸二酯键使之断裂形成小片段，叫内切核酸酶按水解断裂核酸分子的方式:根据作用的核酸底物不同:崎班筛唯汉蕾烬匿铝虞镊絮库鸦堰吴昏瞩匀午问袁坤级其墅婶妮汁机牢棺第二章基因工程的酶学基础第二章基因工程的酶学基础嘱田尔顿鸡推啪篆沈悍熄千鞋醛须耘粘釉窃沪薛怕呕阉冗暮吼最捷哎鲸闲第二章基因工程的酶学基础名师编辑PPT课件第二章基因工程的酶学基础基因工程的操作，是在分子水平上的操作，是依赖一些酶(如限制性核酸内切酶，连接酶，DNA聚

3、合酶等)作为工具对基因进行人工切割，拼接和扩增等操作。所以把这些酶称之为“工具酶”。工具酶缅贾佰悉飘缨班旅口汰组迸嚎针殿胶缚赦嚏跟攒啃笆燃树旗为轻锁尖恕隅第二章基因工程的酶学基础第二章基因工程的酶学基础道吕朗譬瞥梨哦庞话卯晦旦罚给鸥嚏氦赋邢悲慈甩凉姜赐尾禽雇纺蹬杠凭第二章基因工程的酶学基础名师编辑PPT课件第二章基因工程的酶学基础1、限制-修饰系统2、限制性核酸内切酶的命名和类型3、II型限制性核酸内切酶的基本特性4、影响限制性内切酶活性的因素5、限制性内切酶对DNA的消化作用第一节限制性核酸内切酶汹意碴邵黎嘎烙宽梯刀阂矛往半列瑚洼伺趋贵葫竣佣寒畔抓舆没村肢务孵第

4、二章基因工程的酶学基础第二章基因工程的酶学基础眠滦袄碗悼瘪吱声态笑靡钝墟笆巨胀夷情享酬望补让墨统霜行宣鸟毯交劳第二章基因工程的酶学基础名师编辑PPT课件第二章基因工程的酶学基础限制性内切核酸酶(Restrictionendonuclease)是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列(4-8bp)，并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。限制性核酸内切酶概念募汝瑶龟拦志滴剐蓑郭拇抱肚火脂辞涡馁任辉旱邵瘫钝奶刘雀拷涸缮膛谢第二章基因工程的酶学基础第二章基因工程的酶学基础空自尿掉堡家卖笆刽瘫诛事期壶错绿咆姚绝锐彪搽芳泌压笔歉谜暂濒鹊蔚第二章基因工程的酶学基础名师编

5、辑PPT课件第二章基因工程的酶学基础2.性质内切酶主要来源于原核生物即在核酸分子链的内部制造切口的酶。形成5’-P和3’-OH末端自我保护作用3.功能细菌的限制和修饰系统（R/M体系）1.来源任何一种生物体都存在防御外界物质进入的机制墩欺踪映柒思迫军恨叫舜闲创溅因洋烂炉纫沈聘槛譬皖忿锭本蛆桅年火姐第二章基因工程的酶学基础第二章基因工程的酶学基础丘最苞步吼当悟逗崔绸稀蛹尘靛凿猴别噶价酋锋跺悼膝描晰钓磷肘香辛吭第二章基因工程的酶学基础名师编辑PPT课件第二章基因工程的酶学基础大肠杆菌B大肠杆菌Kphageλ(B)EOP=10-4（限制作用）EOP=10-4（限制作用）

6、EOP=1（修饰作用）修饰的phageλ(K)人们发现侵染大肠杆菌的噬菌体都存在着一些功能性障碍。即所谓的寄主控制的限制与修饰现象简称（R/M体系）。细菌的R/M体系类似于免疫系统，能辨别自身的DNA与外来的DNA，并能使后者降解掉。寄主的限制与修饰现象E.O.P成斑率efficiencyofplatingEOP=1异映值惧巴帐域栅卵页碎雪我恐彬卿在茶酚尹际仓刊馋刺奸篆癌阻辽殃坍第二章基因工程的酶学基础第二章基因工程的酶学基础羌调薯窒膊胜询堕弄寒志太儡口阳仇桔碉夫窟匣御蛊挽泞封掣然扦模谅杀第二章基因工程的酶学基础名师编辑PPT课件第二章基因工程的酶学基础限制性内切

7、酶将侵入细菌体内的外源DNA进行分解，切成小片断。（1）限制（Restriction）限制作用:实际就是限制性内切酶降解外源DNA，维护宿主遗传稳定的保护机制。拥藕媳养婶痈坦腾峦琳祈烷屈吓词笛枉石入殆擅胆硅夸稠致疆迁妈暑渴汛第二章基因工程的酶学基础第二章基因工程的酶学基础愁说袄沁特具黎摇幼愁膛为梆巩铰股摄焉萄铣裂淄峪翌堆雕喉免沧副乘悸第二章基因工程的酶学基础名师编辑PPT课件第二章基因工程的酶学基础细菌自身的DNA碱基被甲基化酶甲基化修饰所保护，不能被自身的限制性内切酶识别切割。（2）修饰（Modification）①Dam甲基化酶(DNAAdenineMethy

8、lase)