生化PBL知识分享.ppt

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1、生化PBL镰刀型细胞贫血症是1949年世界上最早发现的第一个分子病由此开创了疾病分子生物学。其分子病理是β基因发生单一碱基突变，正常β基因第6个密码子为GAG，编译谷氨酸突变后变为GTG编译缬氨酸，这种单个氨基酸的替代即形成HbS。在临床上，血红蛋白S病有3种主要形式：①纯合子状态即镰状细胞贫血；②杂合子状态，即镰状细胞性状；③血红蛋白S与其他异常血红蛋白的双杂合子状态，包括血红蛋白S-β珠蛋白生成障碍性贫血、血红蛋白C病、血红蛋白D病等。简介直接原因：正常的血红蛋白是由两条α链和两条β链构成的四聚体，其中每条肽链都以非共价键与一个血红蛋白相连接。α链由141个氨基酸组成，β链由14

2、6个氨基酸组成。镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白的分子结构与正常人的血红蛋白的分子结构不同。位于β链上从N末端开始的第6位的氨基酸，在正常的血红蛋白分子中是谷氨酸，在病态的分子中却被缬氨酸所代替。由于带负电的极性亲水谷氨酸被不带电的非极性疏水缬氨酸所代替，致使血红蛋白的溶解度下降。在氧张力低的毛细血管区，血红蛋白形成管状凝胶结构(如棒状结构)，导致红细胞扭曲成镰刀状(即镰变)。根本原因：基因突变，CTT突变为CAT病因图1、血红蛋白的α—链和β—链的空间结构有何特点？维持血红蛋白四级空间结构的力量包括哪些化学键？答:(1)血红蛋白是由四条多肽链组成的──二条α链(每条α链含141个氨基

3、酸残基)和二条β链(每条β链含146个氨基酸残基)。每条多肽链的螺旋结构形成一个疏水性的空间，可保护血红素分子不与水接触，Fe2+不被氧化。Fe2+位于血红素卟啉环的中央，与卟啉环的4个吡咯基、O2及多肽链上的组氨酸形成六配位体。每个血红蛋白分子可逆结合4个氧分子，每克血红蛋白可结合1.34mL氧气。（2）范德华力、氢键、离子键和疏水键作用还有亚基间的二硫键。2、镰刀细胞性贫血的分子基础是什么？点突变(pointmutation)发生於β-多肽链基因(HBB基因)上的第六个密码子(condon)，GAG突变成GTG。结果令到β-多肽链(β-珠球蛋白)上的第六个氨基酸被置换，由谷氨酸(

4、glutamicacid)置换成缬氨酸(valine)，谷氨酸是一个亲水氨基酸，氨基酸位点位于血红蛋白分子外部，易与水结合。但是缬氨酸是一个疏水氨基酸，这样的氨基酸分子暴露在血红蛋白分子外部是不利的。由于这样的疏水作用，血红蛋白分子的这个位点不易与水结合，水溶性降低，众多的血红蛋白分子相互聚集沉淀，形成纤维状的纤维沉淀。这样的结果是使得红细胞的形态结构发生变化，红细胞特有的圆饼状结构消失，变成扁平细长的镰刀型细胞。3、用什么方法可以诊断镰刀细胞性贫血？答：诊断方法：基因检测，限制性内切酶分析法。限制性内切酶分析法是利用限制性内切酶和特异性DNA探针来检测是否存在基因变异。当待测DNA

5、序列中发生突变时会导致某些限制性内切酶位点的改变，某特异的限制性酶切段的状态在电泳迁移率上也会随之改变，借此可作出分析诊断。4、为什么患者的红细胞会变成镰刀状？答：正常人血红蛋白β亚基的第6位氨基酸是谷氨酸，而镰刀形细胞贫血患者的血红蛋白中，谷氨酸变成了缬氨酸，即酸性氨基酸被中性氨基酸替代，仅此一个氨基酸之差，原是水溶性的血红蛋白，就聚集成丝，相互黏着，导致红细胞变形成为镰刀状而极易破碎，产生贫血。5、患者产生症状的病理生理学基础是什么？答：引起贫血的原因主要有3种：（1）红细胞丢失，如溶血或出血；（2）红细胞生成缺陷，如缺铁性贫血或异常血红蛋白病；（3）血浆容量增大，如孕期，这不是

6、真贫血，被称为假性贫血。临床上，通常根据红细胞的形态特征来划分贫血类型。此病的症状包括：精神不振和呼吸急促、出现黄疸症。镰状细胞性贫血状、骨骼及胸部或腹部出现剧烈疼痛，这是因为狭窄的血管阻塞所致。脱水、感冒或严重的感染更容易引发前述症状镰状红细胞贫血症6、镰刀细胞性贫血在世界范围内的分布特点镰刀型细胞贫血症主要发生在黑色人种中,在非洲黑人中的发病率最高。人们在非洲疟疾流行的地区，发现镰刀型细胞杂合基因型个体对疟疾的感染率，比正常人低得多。这是因为镰刀型细胞杂合基因型在人体本身并不表现明显的临床贫血症状，而对寄生在红血球里的疟原虫却是致死的，红血球内轻微缺氧就足以中断疟原虫形成分生孢子

7、，终归于死亡。因此，在疟疾流行的地区，不利的镰刀型细胞基因突变可转变为有利于防止疟疾的流行。这一实例，也说明基因突变的有害性是相对的，在一定外界条件下，有害的突变基因可以转化为有利。此外，镰刀形细胞贫血症在意大利、希腊等地中海沿岸国家和印度等地,发病人数也不少,在我国的南方地区也发现有这类病例。7、镰刀细胞性贫血患者的血红蛋白在电泳行为上与正常的血红蛋白有何差别？正常的血红蛋白是由两条α链和两条β链构成的四聚体，其中每条肽链都以非共价键与一个血红素相连接。