DPPH自由基SOP

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1、主要目的：——为了测定样品清除DPPH1由基的能力主要原理：——自由基消除剂与DPPK电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用酶标仪进行快速的定量分析。实验室签章试剂J1,1-二苯基-1-苦味肌基自由基（DPPH甲醇（分析纯）仪器设备96孔酶标板UV-Vis可见多功能酶标仪移液枪200仙由程枪头三、实验方法♦前期准备配置2g/L的DPPHP醇标准溶液。♦DPPHB由基清除能力参照Brand-Williams（1995）［1］报道的方法，将其稍加改动后应用在96孔酶标板中［Brand-WilliamsW,CuvelierME.BersetC.U

2、seofafreeradicalmethodtoevaluateantioxidantactivity[J].LWT-FoodScienceandTechnology,1995,28(1):25-30.VermaAR,VijayakumarM,RaoCV.MathelaCS.InvitroandinvivoantioxidantpropertiesandDNAdamageprotectiveactivityofgreenfruitofFicusglomerata[J].FoodandChemicalToxicology,2010,48(2):704-709.］。在酶标板的每孔中

3、，依次加入不同体积（10、20、30、40、50、60、70、80、90和100仙L）的样品溶液和200L的DPPFfe准溶液（2g/L）,最后用甲醇溶液补齐至总体积300pL。室温反应30min后，于515nm下用UV-Vis可见多功能酶标仪测定其吸光度（EL340,Bio-TekInstruments,Inc.,Winooski,VT,USA）。番茄样品消除自由基的能力表示为EQ（清除1pgDDPHE50惭需的样品用量（八干重））。EQ越小，表示抗氧化活性越高。平行测定三次，取平均值计算。清除DPPHB由基能力用如下公式计算：消除率％=（1-AiAj）x100%Ac其中：A

4、i为样品溶液加DPPHC剂混合液白^吸光度，Aj为样品溶液加甲醇的吸光度，Ac为DPPHS液加样品溶剂的吸光度。