皋兰县养殖场羔羊腹泻的流行病学调查及防治

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分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学专业硕士学位论文皋兰县养殖场羔羊腹泻的流行病学调查及防治ThelambofGaolanfarmdiarrhealdiseaseepidemiologyinvestigationandprevention魏文娇指导教师姓名陈智华教授（甘肃农业大学兰州730230）学位名称兽医硕士专业领域兽医学论文答辩日期2017年11月2日学位授予日期2017年12月答辩委员会主席贾宁教授评阅人魏润生研究员魏彦明教授袁莉刚教授2017年11月2日 摘要羔羊腹泻是由多种病因引起的一种常见疾病，也是影响羔羊发育、引发羔羊死亡的主要疾病之一，其主要特征是羔羊出现不同程度的拉稀、下痢。本文主要通过问卷调查、实地调查与实验室抽样检测等方法了解皋兰县县级标准化养殖场羔羊腹泻的病因、症状及流行病学调查。皋兰县羔羊腹泻全年平均发病率是34.61%，死亡率是19.7%，因此，对羔羊腹泻的病因进行正确分析，并对其进行有效的防治将会对养羊业产生积极的意义。通过临床症状及病理解剖结合细菌学检测发现引发皋兰县羔羊腹泻的病原菌主要是大肠杆菌，导致羔羊严重发生下痢。通过药物疗效对比实验，表明氧氟沙星注射液和金氟康，对羔羊腹泻的治疗效果相对于其他几种药物而言，治愈率较高，其治愈率均达90%以上，分别为92.31%和90.91%。因此探索羔羊腹泻的病因并研究其防治方法将对皋兰县养羊业的良好持续发展产生重要作用，为羔羊腹泻的诊断和防控提供技术手段和参考依据。通过辅助防治措施，进行了配种时间和产羔时间与羔羊腹泻的相关性研究，数据分析表明，母羊集中在7～9月配种，12月至次年2月产冬羔，较传统7～9月和10～11月分散配种，产冬春两羔，羔羊腹泻发病率下降了9%。经临床试验并结合皋兰县肉羊饲养的实际情况，制定了以预防（以检促防、卫生防疫、免疫预防、药物预防）为主，辅之加强饲养管理（优化母羊饲养管理、加强羔羊的饲养管理）、氧氟沙星注射液和金氟康等药物治疗相结合的综合性防控模式。通过实施综合防控模式，羔羊腹泻的平均发病率降低为10.8%。关键词：羔羊；腹泻；症状；防治II SUMMARYLambdiarrheaisacommondiseasewhichcausedbymanyfactors,affectingthegrowthanddevelopmentoflambandcausinghigherdeathoflambs.ThisstudymainlyaimsatGaolancountystandardizationfarmlambdiarrheadiseaseetiology,symptomsanditsprevention,controlandsoon.Throughthesamplingquestionnairesurvey,fieldinvestigationandlaboratorydetectionmethods,wefoundthattheannualaverageincidenceofGaolanlambdiarrheawas34.61%,andmortalitywas19.7%.Astothelifeofthelambandsurvivalconstituteswasgreatthreat.Therefore,Investigationandanalysisthecauseofthelambdiarrhea,andcarriesontheeffectivepreventionwillhaveextremelyimportantsignificanceonsheepindustry.Throughtheclinicalsymptomsandpathologicalanatomycombinedwithbacteriologicaldetection,itwasfoundthatthepathogenicbacteriathatcausedthediarrheaoflambinGaolancountryweremainlyE.coli,leadingtoseverediarrheaofthelamb．TheresultofdrugefficacycomparationexperimentshowedthatofloxacininjectionandgoldoffluconazolemoresuitablefortreatmentGaolanlambdiarrheathanotherdrugs.Thecurerateishighandabove90%,92.31%and90.91%,respectively.Sotoexplorethecauseofdiarrhealamb,studythemethodofpreventionandcureofGaolansheepgoodgeneratesanimportantimpactonsustainabledevelopment.Theresultswillprovidetechnicalreferenceforthelambdiarrheapreventionandcontrol.Throughsecondarypreventionmeasures,forthebreedingandlambingtimediarrhealdiseasewiththelamb,thecorrelationresearch,dataanalysis,focusonbreedingin7to9monthinDecembertothefollowingtwoyearstoproducewinterlamb,thantraditional7to9monthsand10to11monthscatterbreeding,producingwinterandlamb,andtheincidenceoflambdiarrheadropped9%.TheclinicaltrialanderrorandcombinedwiththeactualsituationofGaolancountymuttonsheepbreeding,workedouttoprevent(topromotepreventioncheck,healthandepidemicprevention,vaccineanddrugprevention)isgivenpriorityto,strengthenthemanagementofauxiliary(optimizesheepbreedingmanagement,strengtheningthemanagementofthelamb),ofloxacininjectionandgoldoffluconazolecombinedmedication,comprehensivepreventionandcontrolmode.Throughtheimplementationofpreventionandcontrolmode,theaveragelambdiarrheamorbidityandmortalityrateswasdecreasedto10.8%.Keywords：Lamb；Diarrhea；Symptoms；PreventionandtreatmentIIIIII 目录摘要.......................................................................................................................................IISUMMARY.............................................................................................................................III引言............................................................................................................................................1第一章皋兰县羔羊腹泻的流行病学调查..............................................................................31．调查内容与方法..................................................................................................................31．1调查目标.......................................................................................................................31．2调查范围、区域和对象...............................................................................................31．3调查内容.......................................................................................................................31．4调查方法.......................................................................................................................42．调查结果..............................................................................................................................42．1养殖现状.......................................................................................................................42．2皋兰县羔羊腹泻的流行历史和区域...........................................................................42．3皋兰县羔羊腹泻的发病情况.......................................................................................52．4皋兰县羔羊腹泻的流行特点.......................................................................................62．4．1流行特点..............................................................................................................62．4．2影响因素..............................................................................................................72．5主要临床症状...............................................................................................................92．6主要病理剖检变化.....................................................................................................102．7诊断.............................................................................................................................112．7．1微生物学检查...................................................................................................112．7．2血清学检测........................................................................................................132．7．3生化试验............................................................................................................132．7．4肠内容物毒素测定............................................................................................142．7．5动物试验............................................................................................................142．7．6药敏试验............................................................................................................143．小结....................................................................................................................................15第二章皋兰县羔羊腹泻的药物防治和产羔时间调整.......................................................171．药物防治............................................................................................................................171．1药理作用.....................................................................................................................171．2实验方法及数据统计.................................................................................................181．2．1预防效果试验....................................................................................................18IVIV 1．2．2治疗效果试验....................................................................................................181．3防治结果.....................................................................................................................192．产羔时间的调整................................................................................................................202．1实验原理.....................................................................................................................202．2实验方法.....................................................................................................................213．小结....................................................................................................................................22第三章皋兰县羔羊腹泻的综合防控技术............................................................................231．加强预防工作....................................................................................................................231．1以检促防.....................................................................................................................231．2加强环境卫生和消毒工作.........................................................................................231．3免疫预防.....................................................................................................................231．4药物预防.....................................................................................................................242．加强饲养管理....................................................................................................................242．1加强怀孕母羊的饲养管理.........................................................................................242．2加强羔羊的饲养管理.................................................................................................243．综合防控效果....................................................................................................................25第四章结论............................................................................................................................27参考文献..................................................................................................................................29附表..........................................................................................................................................32表1皋兰县羔羊腹泻问卷调查表.........................................................................................32表2生产记录（按日或变动记录）.....................................................................................33表3兽药使用记录..................................................................................................................34表4饲料、饲料添加剂使用记录.........................................................................................35表5消毒记录.........................................................................................................................36表6免疫记录..........................................................................................................................37表7诊疗记录.........................................................................................................................37表8防疫监督监测记录..........................................................................................................39表9病死畜无害化处理记录.................................................................................................40作者简介..................................................................................................................................41V 导师简介..................................................................................................................................42原创性声明..............................................................................................................................43学位论文版权认定和使用授权书..........................................................................................43VIVI 引言皋兰县位于甘肃中部，黄河中上游，所辖六镇，石洞镇、黑石镇、什川镇、忠和镇、水阜镇，九合镇，57个行政村，3个社区。总耕地43万亩，年日照时数2786小时，年气温≧10℃，有效积2518—2940℃，年平均气温7.1℃，无霜期144天，年降水量260㎜，光照资源丰富，自然条件优越，地形属黄土高原丘陵沟壑区，多为黄土梁峁、沟谷和小川台地等类型，地势为北高南低、西高东低，呈西北向东南倾斜，山脉多为南北走向，平均海拔1700米左右，属温带半干旱气候。皋兰县土地肥沃自然条件优越，耕地面积29.3万亩，天然草原面积247.35万亩，饲草资源极为丰富，为促进全县农业结构的战略性调整、发展畜牧业提供了有利的条件。畜牧业生产也得到了空前发展，已成为全县农业增效、农民增收的新增长点和农村全面建设小康社会的支柱产业之一。近年来，通过加强饲草料基地建设、畜种改良、舍饲圈养、加快出栏周转、转化利用农作物秸秆增加饲草料等有效措施，加强后续产业培育，促进草原畜牧业发展方式转[1]变。大力实施产业化经营战略，积极开展退耕还林、还草，种草养畜，发展规模养殖，在畜牧产业化经营方面迈出了新的步子，形成以黑石镇为龙头的辐射全县羔羊育肥产业，使全县百只以上的养羊专业户达到500户。同时，以县畜牧兽医局和乡镇畜牧兽医站为基础的服务网络初步形成，利用省市秸秆饲化项目、现代畜牧业全产业链建设项目、标准化肉羊养殖场项目及肉羊产业扶持项目等，养殖户实施种草养畜，暖棚养殖，青贮[2]氨化饲料。引进了以湖羊、无角道赛特、萨伏克羊为主的国内外优良品种，为积极实施肉羊品种改良计划、提升皋兰县肉羊产业，尽快使产业优势变为经济优势，振兴全县[3]经济，增加农民收入奠定了良好的基础。截止2016年底，全县羊只存栏107643只。[4-5]小尾寒羊作为皋兰县的优势种畜，早期生长发育快，体格高大，肉质好，四季[6]发情，繁殖力强，遗传性能稳定，适应性强等特点，其肉质细嫩，肥瘦适度，营养丰富，蛋白质含量高，胆固醇含量低，富含人体必需的各种氨基酸、维生素、矿物质元素等。小尾寒羊在皋兰县各乡镇均有分布，主要分布于黑石镇、石洞镇、九合镇及水阜镇。根据流行病学及调查结果分析，羔羊腹泻直接影响到皋兰县肉羊产业的发展，对畜牧业生产的危害严重。[7]羔羊腹泻是由多种病因引起的，以羔羊拉稀为主要特征的疾病。此病在皋兰县长期存在，是制约养羊业生产和发展的重要因素之一。羔羊腹泻病原复杂、发病迅速，其发病率和死亡率高，此病没有明显的发病季节和规律，从而给养羊业带来了严重的经济1 [8-9]损失。此病幼龄羔羊极易感染，通常发病有3个高峰期，分别为羔羊出生后1～7日、2～3月以及羔羊断乳后一周。据目前统计结果显示：皋兰县县级标准化养殖场羔羊腹泻全年平均发病率是34.61%，死亡率是19.7%，对羔羊的生命及其生存构成了很大的威胁。因此，对羔羊腹泻的病因进行正确分析，并对其进行有效的防治将会对皋兰县养羊业产生极其重要的意义。2 第一章皋兰县羔羊腹泻的流行病学调查1．调查内容与方法根据羔羊腹泻在皋兰县的发生和流行情况，在全县6个镇，百只以上的养羊专业户500户中，选取了30家县级标准化养殖场作为羔羊腹泻的调查样方。进行流行病学调查、病原分析、实验室诊断，结合当地环境因素，并考虑经济状况，进而总结出一套综合有效的防制方案进行推广。主要调查及掌握皋兰县羔羊腹泻的的发生、发展和流行的基本规律，为制定防治、控制及降低本病发病率的措施提供科学依据。1．1调查目标掌握全县肉羊饲养管理水平、动物卫生状况及流通状况；了解县级标准化养殖场羔羊腹泻的发病史；了解县级标准化养殖场羔羊腹泻诊断、检疫、监测等防控措施执行情况；通过实验室诊断了解县级标准化养殖场羔羊的发病与感染情况及其他影响因素。1．2调查范围、区域和对象皋兰县6个镇作为调查样方，对500个养羊场户进行问卷调查、现场调查。收集30个县级标准化养殖场羔羊的相关数据，并做相应的抽样检测。1．3调查内容[10]通过问卷调查表（附表1）了解当地羔羊腹泻的发病、死亡及其他情况。根据《养殖档案》中的生产记录，兽药使用记录，饲料、饲料添加剂使用记录，消毒记录，免疫记录，诊疗记录，防疫监督监测记录，病死畜禽无害化处理记录（见附表2-9），对规定数量的养殖户肉羊饲养管理水平、卫生防疫条件、检疫申报、病死畜禽无害化处理的情况进行现场调查。3 1．4调查方法采用问卷调查、实地调查与实验室抽样检测相结合的方式进行。问卷调查收集当地畜牧业生产、流通与疫情信息。2014年6月-2015年6月在6个镇共发放皋兰县羔羊腹泻情况调查问卷500份，收回480份，问卷调查表见附表1。现场调查结合养殖场填写的《养殖档案》中的生产记录，兽药使用记录，饲料、饲料添加剂使用记录，消毒记录，免疫记录，诊疗记录，防疫监督监测记录，病死畜禽无害化处理记录，了解皋兰县肉羊饲养状况及卫生防疫情况。实验室诊断在初步调查的基础上，根据临床症状，对尸体剖检，应用病原学及病理组织学等诊断方法进行诊断。2．调查结果2．1养殖现状皋兰县土地肥沃自然条件优越，耕地面积29.3万亩，天然草原面积247.35万亩，饲草资源极为丰富，为促进全县农业结构的战略性调整、发展畜牧业生产提供了得天独厚的条件。近年来，通过加强饲草料基地建设、畜种改良、舍饲圈养、加快出栏周转、转化利用农作物秸秆增加饲草等有效措施，加强后续产业培育，促进草原畜牧业发展方式转变。大力实施产业化经营战略，积极开展退耕还林、还草，种草养畜，发展规模养殖，在畜牧产业化经营方面迈出了新的步子，形成以黑石镇为龙头的辐射全县肉羊育肥产业，使全县百只以上的养羊专业户达到500户。同时，以县畜牧兽医局和乡镇畜牧兽医站为基础的服务网络初步形成，利用省市秸秆饲化项目、现代畜牧业全产业链建设项目、标准化肉羊养殖场项目及肉羊产业扶持项目等，养殖户实施种草养畜，暖棚养殖，青贮氨化饲料。引进了以湖羊、无角道赛特、萨伏克羊为主的国内外优良品种，为积极实施肉羊品种改良计划、提升皋兰县肉羊产业，尽快使产业优势变为经济优势，振兴全县经济，增加农民收入奠定了良好的基础。截止2016年底，全县羊只存栏107643只。2．2皋兰县羔羊腹泻的流行历史和区域羔羊腹泻在世界各国长期存在，是世界性疾病。我国羔羊腹泻最早记载是1930年[11]伊犁地区的部分县、乡流行，流行现状的准确数据不详，但羔羊腹泻在我国是最常见4 的、多发的、严重的顽固性动物疫病。引发羔羊腹泻的因素多而复杂，有细菌性因素，寄生虫性因素和病毒性因素等。细菌性因素主要有魏氏梭菌、大肠杆菌、沙门氏菌等病[12-14]原微生物。近年来我国羔羊腹泻发病率和死亡率居高不下，给农牧民造成巨大的经济损失，严重影响我国养羊业的发展。据皋兰县动物防疫站日志记载，羔羊腹泻在皋兰县七个乡镇（含兰州新区的西岔镇）都有发生。2003年羔羊腹泻发病死亡最严重，共发病33998只，发病率为38.2%，死亡15639只，病死率为46%。2．3皋兰县羔羊腹泻的发病情况羔羊腹泻多发生在比较寒冷的冬春季节。皋兰县属于温带大陆性气候，夏季炎热多雨，冬季严寒且降雪量小，四季分明，冬季万物凋零，导致皋兰县畜牧业发展的青草饲料季节性变化大，尤其是冬季青草量补给严重不足。加之位于黄土高原，地势较高，非常有利于蒙古西伯利亚冷空气的入侵，而大陆性气候的一大特征就是早晚温差大，所以在春秋季节冷空气对养羊业的威胁很大，而冬季虽然温度相对于春秋季节并无优势，但其波动基本稳定，没有太大的变动，所以冬季虽然温度寒冷，但其给羔羊生长带来的刺激却比较小。根据调查结果发现由于春冬季节天气较为寒冷，饲草更加匮乏、母乳分泌[15]不足、气候突变等因素都极易引发羔羊腹泻的发生。此外，在昼夜温差大，羔羊腹泻的发病率和死亡率也会增大，其他时间基本都是零星散发。收集整理了2013～2015年间皋兰县县级标准化养殖场羔羊腹泻的有关数据（见表1-1）。表1-12013～2015年县级标准化养殖场羔羊腹泻统计表Tab.1-1Statisticsoflambdiarrheaofcounty-levelstandardizationfarmfrom2013to2015县级标准化出生羔羊乡镇发病数（只）发病率（%）死亡数（只）死亡率（%）养殖场（场）（只）石洞镇46042203833.73112318.59水阜镇3277898335.3956620.37忠和镇3197169735.3640120.35九合镇3253890535.6651220.17什川镇3248778031.3643617.53黑石镇1412669458436.18268421.9合计3028485998734.61572219.75 从以上数据，初步得到，皋兰县县级标准化养殖场羔羊腹泻六个乡镇中黑石镇发病率及死亡率都最高，发病率高达36.18%，死亡率21.9%；什川镇发病率及死亡率最低，发病率为31.36%,死亡率为17.53%。皋兰县县级标准化养殖场羔羊腹泻的发病率为34.61%，死亡率高达19.7%。2．4皋兰县羔羊腹泻的流行特点2．4．1流行特点2013～2015年针对皋兰县羔羊腹泻流行病学调查，经临床症状、病理剖检和病原学鉴定，羔羊腹泻主要分为致病菌所致腹泻和寄生虫病所致腹泻两大类，其中致病菌主要有大肠杆菌、沙门氏菌、魏氏梭菌等病原微生物，寄生虫有球虫、隐孢子虫、结节虫等[16]。该病一般都是经消化道感染，例如在接触病羔和不卫生的环境，以及吸吮母羊的脏乳头时都可以受到感染。在少数情况下，可以通过子宫感染或经脐带和损伤的皮肤受到感染。收集整理了2013年6月-2014年6月，黑石镇县级规模养殖场患腹泻的396只羔羊腹泻情况调查统计表（表1-2）。表1-2羔羊腹情况调查统计表Tab.1-2Statisticsoflambdiarrhoealtypeandbasicsituations体重（㎏）发病季节发病年龄特征7-10周7～2021～3030以上冬春夏秋1-7日龄2-6周龄龄龄数量2601306235161329616占总数%65.732.81.559.340.783.115.41.5以上数据清晰地反映了羔羊腹泻在体重、发病季节以及发病年龄上的差异。从发病年龄来看，1～7日龄的发病率最高，占比达83.1%：从发病季节来看，羔羊腹泻在冬春季节较为多发，占比为59.3%；从羔羊自身情况来看，7～20㎏的羔羊发病率最高，占比可达65.7%，而且其发病率伴随体重的增长逐渐降低，30㎏以上的羔羊发病率仅占1.5%。6 2．4．2影响因素[17-18]经过多年的防治和研究，羔羊腹泻被确诊为条件性疾病，因而，有很多因素都[19][20]会导致羔羊腹泻的发生。通过调查发现皋兰县羔羊腹泻则是在母羊因素、羔羊自身因素、饲草搭配不当以及应激因素等多种因素影响下发生的。（1）母羊因素[21]母羊状况是影响羔羊生长发育最直接的因素。目前有很多地区都采用产冬羔的方式，此种方式有效降低了羔羊腹泻发生的概率。其理论依据是羊虽属于常年发情动物，[22]但夏末秋初配种正是母羊膘肥体壮之时，非常有利于受孕和妊娠。其次，通过秋季补膘和冬季补草料可以满足整个妊娠期羔羊生长所需要的营养要求，还能保证母羊生产后体质健壮。此外，冬季寒冷的气候虽不适合生物的生长，但是与此同时，也有效抑制了生产环境中病原微生物的生存和繁殖，从而减少病原数量，降低冬羔发生腹泻的概率。皋兰县黑石镇中窑村2013年春羔腹泻率为15.47%，2015年增加冬羔，减少春羔数量，发病率为8.52%，虽然发病率只减少了6.95%，但羔羊腹泻引发的死亡率和经济损失都大大降低，从而增加农民养殖肉羊的积极性。由于，妊娠期母[23]羊营养低，乳量不足、乳汁质量不佳，从而造成出生羔羊体质衰弱，病毒抵抗能力低下，引发羔羊腹泻；反之，分娩前如若给母羊大量精饲料就会使乳汁浓稠，其中蛋白质和脂肪的含量则会超过羔羊消化脂肪、吸收蛋白质的能力，从而会引发羔羊腹泻。另外，母羊突然变换饲草或其饲草变质，或是母羊患乳房炎，均会影响乳汁质量，引发羔羊腹泻。（2）羔羊自身因素[24]羔羊生理机能不健全。首先，羔羊尚未发育成熟的消化道使羔羊消化道机能不健[25]全，降低了羔羊对植物性蛋白和长链脂肪酸的消化能力。其次，羔羊尚未充分发育的[26]神经系统造成其大脑皮层不发达，降低了羔羊的体温调节能力和应激能力，以至于其对疾病的抵抗能力低下。羔羊体质弱。体重轻体质瘦弱的羔羊因其对外界环境的适应能力、对疾病的抵抗能力还有对乳汁质量的耐受力较差而极易引起腹泻症状。羔羊自身免疫力缺乏。初生羔羊的免疫力一般由初乳、体格、体质还有其抵抗力决定，如若这些因素不符合条件，就极易引起羔羊腹泻。若羔羊未吃初乳或初乳摄入量不足，就会使羔羊缺乏多种消化酶、维生素等，从而使羔羊营养不良、免疫力降低而致病。7 （3）应激因素因环境温度的改变，突然断奶以及饲草料的变换，羔羊受到剧烈哄赶、捉拿及圈舍[27]调换等人为因素的影响时都极可能引起羔羊消化系统的紊乱，从而引发羔羊腹泻。皋兰县大陆性气候特征显著，随着近几年地球温度的升高，皋兰县气候的不稳定性也随之增加，若在产羔季节气温骤变，保暖设施却极其简陋的环境之下，就会使羔羊因寒冷而增加其发病率。例如，2013年4月皋兰东升养殖场正当春羔临产之际，却意外遭受了南下的寒流影响，气温突降至0℃以下，而且此温度接连持续一周左右，并伴有雨加雪的天气，造成60多只羔羊发生腹泻而死亡。相对而言，位于石洞镇涧沟村的皋兰祥鑫养殖场因改善了圈舍结构，在圈舍上加盖塑料膜，提高了育羔室温度，使得其发病率相对于其他养殖场大大降低。（4）产羔及育羔条件不合格产房和育羔室条件不好，消毒不严格、病羔不隔离治疗或者隔离不及时则引发羔羊[28-29]腹泻的蔓延发展，从而增加其致病率，扩大腹泻发病范围。病原菌通过羔羊传代之后，其毒力和致病力都会增强，对羔羊的生命也将构成更大的威胁。消毒工作本该贯穿于产羔和育羔各个环节，而由此造成的羔羊腹泻以至羔羊死亡的案例也早已屡见不鲜，但是依然有很多的养殖户心存侥幸，按照以前羔羊生产的模式发展当下养殖业，最终还是付出了惨重代价。究其原因，最主要的还是限制于养殖户的文化水平，养殖户基本都来自于文化程度普遍较低的农村，而且大部分养殖场大多都是从家庭副业中发展而来的。农村相对于城市而言，落后的不仅只有经济的发展，还有知识接受人数和传统的思想观念，更重要的则是消息的流通速度缓慢和现代传媒的使用困难。因而，养殖户习惯于用自己落后于时代发展的传统思维去思考问题，总是在事情发生以后才去想解决方案，而不是未雨绸缪。但是，皋兰近年新建的兰州通达成农业科技有限公司则打破了以往的生产模式，建设了标准化暖棚羊舍、标准化育肥圈舍饲料库、饲料加工车间、青贮池、蓄水池、防疫设备、饲料加工设备和流转饲草地等，加强了羔羊的管理并改善了产羔和育羔的条件，实施了产前、产中、产后各个阶段的严格消毒措施，从而大大降低了羔羊腹泻的发病率和死亡率。（5）饲草搭配不当羔羊生长发育较快，物质代谢也比较旺盛，因此羔羊需要保质保量的营养物质。如若营养分量不足，就会导致羔羊营养缺乏，从而降低羔羊的生长速度和抵抗力，而引发8 [30]羔羊腹泻。例如羔羊缺乏维生素A，其胃肠道上皮细胞就会增厚或角质化，而角质化[31-32]的皮层极易破裂，从而成为细菌侵入羔羊体内的通道，引起胃肠溃疡而发生腹泻。[33]此外，羔羊缺铁或钴则极易引发贫血性腹泻。反之，羔羊饲料营养浓度过高，则会造[34-35]成羔羊消化不良，从而引起羔羊腹泻。（6）其它因素初生羔羊对外界环境和营养物质的要求都很高。因此，羔羊乳汁摄入量不足、补饲[36]过晚、母羊乳头不干净或是羊舍环境潮湿、寒冷、肮脏等都容易引发羔羊腹泻。[37]若母羊无奶或奶量不足，人工护理等工作没有做好，导致羔羊饥饱不均，这些都将成为羔羊腹泻的发病因素。2．5主要临床症状[38]为了研究羔羊腹泻临床症状的个性和共性，2013年至2015年，对皋兰县辐射各乡镇的30个县级标准化养殖场抽检的9987只1日龄-7周龄的羔羊开展临床症状分析（见表1-3）。表1-3皋兰县县级标准化养殖场羔羊腹泻临床症状调查表Tab.1-3InvestigationofclinicalsymptomsoflambdiarrheainGaolancountystandardizationfarm石洞镇水阜镇忠和镇九合镇什川镇黑石镇合计抽检羔羊数201492665784682942239495腹泻600280230300200130029102013年体温升高28813411014496624139672h内死亡240119100126845711240抽检羔羊数2500970620826900430010116腹泻858383217285320168037432014年体温升高412184104137157806179772h内死亡341156861191247001526抽检羔羊数152888269486675841468874腹泻580320250320260160433342015年体温升高278154120153125770160072h内死亡20312094113976001227通过调查发现，皋兰县羔羊腹泻潜伏期一般为1～2天，临床上常见感染埃希氏大[39]肠杆菌（E.coli）K99而引起的肠炎型（下痢型）腹泻。通常呈急性，平均发病率34.61%，平均死亡率为19.7%。9 数据显示大肠杆菌引起的败血型腹泻在羔羊中发病较少，主要见于2～6周龄的羔羊，但死亡率较高，一般在80%以上，呈急性经过，多在4～12h内死亡。发病羔羊中下痢型腹泻最常见，多发病于羔羊出生后3日以内，但偶有出生后8日内发病的羔羊，[40-41]下痢是是其特征症状。发病初期羔羊少动，不吮乳、稍后出现弓背、努责、卧地,体温升高至40～41℃，粪便呈黄色，继而就会变为浅灰白色，且含有乳凝块，严重情[42-44]况下粪便内会混有血液。排粪时里急后重非常至于身体衰弱，精神萎靡，食欲不振，[45-46]卧地不起，最终常因脱水而亡，如若不及时治疗，可于24～36小时内死亡。2．6主要病理剖检变化图1-1剖检变化Figure1-1Dissectionchanges2015年4月份在黑石镇、石洞镇、忠和镇、什川镇选取养殖条件及防疫条件相当的4家县级标准化养殖场，对因腹泻死亡的145只6周龄以内的羔羊进行剖检。发现死亡羔羊尸体严重脱水，剖检时见尸体消瘦，可视粘膜苍白，解剖胸部皮下有明显的出血10 [47]斑，腹腔有大量的纤维素性黄色液体；肝脏肿大，有大量针尖大小的出血点；脾脏略肿大，呈紫色；肾脏呈土黄色，肾盂处有明显的出血点，切面苍白；肩前和肠系膜淋巴[48-49]结充血，明显肿大达豇豆至蚕豆大，肺部有充血斑和小块化脓灶，气肿部分苍白；[50]胃肠充满乳样内容物，真胃和肠内容物呈灰黄色半液状，真胃及肠道黏膜充血发炎，[51]小肠粘膜充血有出血斑，肠道充满气体，空肠有出血点，盲肠有大量淡黄色积液。少数急性病例呈典型败血症状，胸、腹腔、心包均有大量积液。多数死羔还可见白肌病症状。表1-4不同腹泻理变化的羔羊数目统计Tab.1-4Numberofdifferentdiarrheicclinicopathologiclamb病理情况肝脾、肠系膜淋胃肠粘膜充血胸、腹腔、心脑膜有细小的脾脏肿大症状数巴结肿大、充血和有出血斑包均有积液点状出血调查总数145头1361402012202．7诊断[56][57]依据流行病学、临床症状、病理解剖做出初步诊断，采集病羔组织及肠内容物，[58]分离病原，采用常规实验诊断方法进行生化鉴定，做出确诊。2．7．1微生物学检查（1）被检病料采集4个县级标准化养殖场中，每个养殖场选取腹泻致死羊羔15只。无菌采集腹泻致死羔羊的肝、脾、肾、肺、淋巴结等病料各60份、肠内容物60份，0℃保存带回实验室置冰箱待检；用肝、脾、肾、肺、淋巴结、肠内容物病料涂片、经革兰氏染色、镜检。（2）染色镜检涂片先在载玻片上滴95%酒精2～3滴，用清洁纱布擦拭，以钟摆速度通过酒精灯焰3～4次。为使载玻片进一步清洁无油渍，再滴上1～2滴冰醋酸，用纱布擦净，轻轻拖过酒精灯焰。然后用铅笔在预涂病料处的背面划一圆圈，用以标记，翻过在标记处滴一滴生理盐水。最后取备用病料用灭菌剪刀剪下一小块，夹出以其新鲜切面在载玻片生理盐水上涂11 成一均匀薄层。项目组共涂片300份。干燥将载玻片放于载玻片架上室温自然干燥。固定手持已经自然干燥的涂好菌膜的载玻片，涂面朝上，在酒精灯火焰上通过2～3次，热固定细菌细胞。革兰氏染色将结晶紫染液加于涂膜上，染色（初染）1分钟；水洗后加卢戈氏碘液处理（媒染）1分钟；水洗后95%酒精脱色，脱色时频频摇动玻片，直至留下的液体无色为止（大约30秒）；水洗后加石碳酸复红稀释染色液（复染）30秒。水洗，用滤纸轻轻吸干，待标本充分干燥后进行镜检。革兰氏阳性菌（G+）中染料复合物不易从细胞内渗出，仍为紫色；革兰氏阴性菌（G-）中染料复合物容易从细胞内渗出，细菌被脱色为无色，再经石碳酸复红稀释液复染成红色。镜检将染色好的载玻片置于显微镜油镜下观察（用100倍的油镜X10-15倍目镜），在视野中可观察到单双排列的革兰氏阴性、两端钝圆的短小杆菌。（见图1-2）。图1-2油镜下观察大肠杆菌涂片图Figure1-2TheE.colismearmapobservingunderoilmirror（3）菌株分离与鉴别无菌将病料分别接种于血液琼脂平板和普通琼脂平板，进行需氧和厌氧培养，37℃培养24h，观察结果。并进行细菌的纯化，将分离、纯化的待检菌分别接种伊红美蓝（EMB）琼脂、s.s琼脂、改良麦康凯琼脂，37℃培养24h，观察结果。（培养基基础12 均购自上海科鉴生物科技有限公司）[59]菌落形态及培养特性在对360份病料（其中肝、脾、肾、肺、淋巴结各60份、肠内容物60份）的分离培养中，有300份病料的培养基中培养出了特征性菌落，60份病料未培养出，分离纯化的待检菌（在300份中随机选取50份）接种在鉴别培养基上（伊红美蓝琼脂、s.s琼脂、麦康凯琼脂、三糖铁各10份），全部培养出特征性菌落。菌落形态如下：普通琼脂平板上形成隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、半透明、直径1～2mm的灰白色菌落；血液琼脂平板上不溶血；伊红美蓝琼脂上形成紫黑色带金属光泽的菌落；s.s琼脂、麦康凯琼脂上形成粉红色菌落的为大肠埃希氏菌。2．7．2血清学检测[60]（1）埃希氏大肠杆菌K99因子血清制备用从中国兽医监察所引进的标准菌株C83912（K12：K99）免疫家兔制备。肌肉注射免疫成年健康家兔，共免疫三次，每次间隔两周，最后一次免疫十天后心脏采血，5000r/min离心分离血清。（2）血清学检测将K99血清用生理盐水作1：10稀释，取一滴于玻片上，用铂金耳挑取在改良的麦康凯琼脂平板上培养至生长旺盛的直径2mm左右的圆形透明菌落半个，与玻片上稀释好的K99血清混合，1min后出现凝集块，液体清亮者判为阳性（即具有K99吸附因子）。按上述方法，将每份病料的细菌培养物挑选5个优势菌落进行试验，得到同一结果。2．7．3生化试验（1）糖发酵试验：取纯培养物分别接种葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖发酵管，37℃培养2～3d，观察结果。（2）吲哚试验：取纯培养物接种蛋白胨水，37℃培养2～3d，加入吲哚指示剂，观察结果。（3）MR试验和VP试验：取纯培养物接种葡萄糖蛋白胨水，37℃培养2～3d，分别加入MR和VP指示剂，观察结果。（4）枸橼酸盐试验：取纯培养物接种枸橼酸盐培养基上，37℃培养18～24h，观13 察结果。（5）硫化氢试验：取纯培养物接种醋酸铅琼脂，37℃培养18～24h，观察结果。将待检菌接种糖培养基、枸橼酸盐、甲基红等生化培养基，37℃培养24～72h，观察结果见下表1-5。表1-5生化试验结果Tab.1-5Theresultsofbiochemicaltest葡萄糖乳酸麦芽甘露蔗糖吲哚M-R枸橼硫化V-P糖醇试验酸盐氢⊕⊕⊕⊕⊕++---注：“+”阳性，“-”阴性，“⊕”产酸产气，+/-大多数阳性/少数阴性2．7．4肠内容物毒素测定取腹泻死亡羔羊肠内容物5ml，加10ml生理盐水混匀，3000r/min离心20min，过滤除菌取滤液，将6只小鼠分为2组，每组3只，第一组为试验组，每只静脉注射滤液3ml；第二组为对照组，每只静脉注射生理盐水3ml。12h后试验组和对照组6只小鼠均[61]健康存活，说明肠内容物中不含致死性物质。羔羊不是被肠毒素致死。2．7．5动物试验将大气和CO2中培养的菌落纯化后分别接种于营养肉汤，37℃培养24h，比浊测其10浓度为2.0×10/ml。将6只小鼠分为2组，每组3只。第1组每只腹腔注射大气中培养的菌落菌液1ml，第2组每只腹腔注射CO2中培养的菌落菌液1ml。2h后两组小鼠出现呼吸困难；8h后，两组小鼠全部死亡。对死亡小鼠进行解剖，发现肝、脾、肺、心均有出血点，病料革兰氏染色镜检，均见革兰氏阴性小杆菌。由此证明分离的两个菌落均具有致病性。2．7．6药敏试验用K-B纸片扩散法进行（药敏试纸购于北京中诺泰安科技有限公司），37℃培养24h，观察结果并测量抑菌圈，结果见表1-6。14 表1-6大肠杆菌抑菌圈直径测量结果Tab.1-6MeasurementresultsoftheinhibitoryzonediameterofE.coliinhibitoryring抗生素抑菌圈（mm）抗生素抑菌圈（mm）抗生素抑菌圈（mm）PIP9ENR28TOB13GEN15CMP20PG0ERY18OXA0CRO18NOR0AKN14CFZ9CAR0STR0CXT0SXT0CTX0CS30表1-7按抑菌圈直径判断细菌的敏感性Tab.1-7SusceptibilityofbacteriajudgedbytheinhibitoryzonediameterofE.coli抑菌圈直径（mm）敏感度≧20mm极敏15-20mm高敏10-14mm中敏≦10mm低敏0mm不敏试验结果表明埃希氏大肠杆菌K99对硫酸粘菌素（CS）、恩诺沙星(ENR)、氯霉素（CMP）极敏；头孢三嗪(CRO)、氟哌酸（NOR）、丁胺卡那霉素（AKN）高敏；庆大霉素（GEN）、妥布霉（TOB）中敏；对青霉素（PG）、链霉素（STI）、复合磺胺（SXT）等具有耐药性。3．小结皋兰县县级标准化养殖场羔羊腹泻的平均发病率为34.61%，死亡率高达19.7%。皋兰县羔羊腹泻在体重、发病季节及发病年龄上存在一定的差异。从发病年龄来看，1～7日龄的发病率最高，占比达83.1%：从发病季节来看，冬春季节较为多发，比例为59.3%；从羔羊自身情况来看，7～20㎏的羔羊发病率最高，为65.7%。皋兰县羔羊腹泻则是在母羊因素、羔羊自身因素、饲草搭配不当以及应激因素等多种因素影响下产生的。通过开展流行病学调查，经临床症状、病理剖检和微生物学检查，可以证实该细菌与大肠埃希氏菌的特征相符合，且在有氧及厌氧条件下均可生长，为需氧兼性厌氧菌,也符合（E.coli）埃希氏大肠杆菌的特征。结合以上，确定羔羊发生的腹泻是由埃希氏大肠杆菌引起。15 通过肠毒素试验证明羔羊不是被肠毒素致死,而且在自然病例和动物试验中均能见到腹泻症状。因此，认为造成羔羊腹泻的（E.coli）大肠杆菌病为腹泻型。通过血清学检测，培养出的（E.coli）大肠杆菌菌落与K99血清混合，均呈阳性凝集反应，可以判定引起皋兰县羔羊腹泻的主要血清型为埃希氏大肠杆菌K99。16 第二章皋兰县羔羊腹泻的药物防治和产羔时间调整1．药物防治通过药敏实验做指导，在实验开展的两年时间里对发病羔羊进行各种药物治疗试验[62]，试验发现氧氟沙星注射液和金氟康（通用名恩诺沙星片）对皋兰县羔羊腹泻具有较好的治疗效果。1．1药理作用[63]氧氟沙星注射液属于动物专用的广谱杀菌药，对大多数革兰氏阴性菌和球菌有很好的抗菌活性，包括铜绿假单胞菌、克雷伯菌属、大肠杆菌、肠杆菌属、变形杆菌属、[64][65]沙门菌属、志贺菌属、弧菌属等。常对多重耐药菌也具有抗菌活性。对青霉素耐药的淋病奈瑟菌、产酶流感嗜血杆菌和莫拉菌属均具有高度抗菌活性。对铜绿假单胞菌等假单胞菌属的大多数菌株具抗菌作用。本品对甲氧西林敏感葡萄球菌具抗菌活性，对肺炎链球菌、溶血性链球菌和粪肠球菌仅具中等抗菌活性。对沙眼衣原体、支原体、军团菌具良好抗微生物作用，对结核杆菌和非典型分枝杆菌也有抗菌活性。对厌氧菌有微弱的抗菌活性，对厌氧菌感染无效。氧氟沙星为杀菌剂，通过作用于细菌DNA螺旋酶的A亚单位，抑制DNA的合成和复制而导致细菌死亡。金氟康通用名恩诺沙星注射液，其化学名称为：1-环丙基-6-氟-4-氧代-1，4-二氢-7-（4-乙基-1-哌嗪基）-3-喹啉羧酸。是动物专用的杀菌性广谱抗菌药物，对大肠杆菌、沙门氏菌、克雷伯氏杆菌、布鲁氏菌、巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、丹毒杆菌、变形杆菌、黏质沙雷氏菌、化脓性棒状杆菌、败血波特氏菌、金黄色葡萄球菌、支原体、衣[66]原体等均有良好作用。对厌氧菌作用微弱，对敏感菌有明显的抗菌后效应。其抗菌机制是作用于细菌细胞的DNA旋转酶，干扰细菌DNA的复制、转录和修复重组，细菌不能正常生长繁殖而死亡。其在动物体内广泛分布，能很好进入组织、体液（包括骨髓和前列腺）。肝脏代谢主要是脱去7-哌嗪环的乙基生成环丙沙星，其次为氧化及葡萄糖醛酸结合。主要通过肾脏（以肾小球分泌和肾小球过滤过）排出，15%-50%以原形从尿中排泄。17 1．2实验方法及数据统计1．2．1预防效果试验本次试验设二个实验组和一个对照组，试验羔羊是什川镇3个县级标准化养殖场的120只羔羊，按母体年龄、体质、胎次、预产期均匀搭配分成三组（用自喷漆在羔羊身上编号），每组40只。第一组用的药物为氧氟沙星注射液；第二组为金氟康；第三组为空白对照组。母体均为舍饲圈养，三组羔羊在出生吃过母乳后，分别注射规定药品进行腹泻预防，出现病羔后分别用预防药物按常规剂量给药治疗。第三组羔羊除正常保羔护理外不进行任何药物预防，不进行治疗。本次试验以出生至30日龄内为发病测定期，不以腹泻致死的不在计量范围内。计量时间为第一只羔羊产出时至最后一只羔羊产出30日。表2-1两种药物对羔羊腹泻的预防效果Tab2-1Preventioneffectofthetworugsforlambdiarrhoealdisease标数量发病数发病率有效率治愈数治愈率组别预防药物剂量识（只）（只）（%）（%）（只）（%）第氧氟沙星注一401ml410904100.00射液试验组组第二40金氟康3ml410904100.00组第对照三40————143565214.28组组试验结果表明氧氟沙星注射液、金氟康在预防羔羊腹泻的效果很好。氧氟沙星注射液和金氟康在预防羔羊腹泻的有效率为90%（36/40），对照组为65%（26/40），试验组较对照组高出25%。用两种药物进行治疗，治愈率可达100%。1．2．2治疗效果试验2014年10月开始至2015年10月，选择在皋兰县各兽药门店易买到且价格适中的5种抗生素类药物及5种含中药类药物，进行疗效对比试验，选择治愈率在90%的药物在全18 县范围内进行推广。在石洞镇、黑石镇、忠和镇、水阜镇、九合镇选取1-7日龄具有明显腹泻症状的病羔（母体年龄、体质、胎次、生产时间相近），在用氧氟沙星注射液（10ml/支，四川金瑞克药业有限公司，批号兽药字（2012）220232126）、金氟康（10ml/支、湖北武当动物药业有限公司，批号20140610），与土霉素注射液（10ml/支、成都新亨药业有限公司、批号20150623）、白头翁口服液（10ml/支、四川省泰兴动物药业有限公司，批号兽药字（2012）220446138）、羊痢灵（10ml/支、四川巴蜀动物药业有限公司，批号20120701）、氟苯尼考+金根注射液（5ml/支、重庆科慧隆动物药业有限公司、批号20150619）、羔泻灵（10ml/支、四川金瑞克药业有限公司、批号兽药字（2012）220232615）、炎克痢舒（10ml/支、四川省崇信动物药业有限公司、批号20150601、杨树花口服液（5ml/支、河南普特威动物药业有限公司、批号15052501）、穿白痢康片（300mg/片、黑龙江省北安市飞龙动物药厂、批号20150901）等药物分成两组进行治疗后，做疗效对比试验。其中“氧氟沙星注射液”一次肌肉注1ml，每日2次，连用2～3天；“金氟康”一次肌肉注3ml，每日2次，连用2～3天。其他药物则按照常规剂量服用，最终治愈标准为腹泻停止、粪便成型，精神及其食欲均恢复。判定治疗效果，详见表2-2，2-3。1．2．3防治结果表2-2金氟康、氧氟沙星药物对羔羊腹泻的疗效比较Tab.2-2ClinicaleffectcomparisonbetweenJinfukangandofloxacinonlambdiarrhoealdisease药品治疗数（只）治愈数（只）治愈率（%）金氟康14313090.91氧氟沙星26024092.31羊痢灵1057874.29羔泻灵21317984.04土霉素17610861.36分析试验数据，氧氟沙星注射液和金氟康对羔羊腹泻的治疗效果较其他几种药物要佳，治愈率分别达到92.31%和90.91%，而土霉素的治愈率仅为61.36%，治愈率较低，不推荐使用。19 表2-3氟苯尼考与炎克痢舒等药物对羔羊腹泻的疗效比较Tab2-3Curativeeffectcomparisonamongflorfenicolinjectioneandinflammation,suchasdysenteryshudrugonlambdiarrhea药品治疗数（只）治愈数（只）治愈率（%）氟苯尼考+金根注射液19818291.92白头翁口服液23518377.87炎克痢舒15710264.96杨树花口服液14310069.93穿白痢康片15611372.44通过对此次实验结果的检验和分析，发现氟苯尼考+金根注射液对羔羊腹泻的治疗效果相对于其他几种药物而言，效果较好，其治愈率为91.92%。表2-4氧氟沙星对羔羊腹泻的疗效观察Tab2-4Curativeeffectobservationofofloxacininjectiononlambdiarrhea年度病羔数治疗数治愈数（只）治愈率（%）一次服药二次服药小计一次服药二次服药合计组组组组2014345114105310892.12.6394.742015312132124412893.943.0396.97合计816246229723193.092.8595.94综合分析表2-2、2-3、2-4，可以发现2014～2015年间氧氟沙星对羔羊腹泻具有很好的疗效，其治愈率可达90%以上，而且一次服药治愈率也很高。氧氟沙星注射液和金氟康对羔羊腹泻的治疗效果较其他几种药物要佳，治愈率分别达到92.31%和90.91%。氧氟沙星对羔羊腹泻具有很好的疗效，其治愈率可达90%以上，一次服药治愈率也很高。氧氟沙星注射液、金氟康在预防羔羊腹泻的效果很好。氧氟沙星注射液和金氟康在预防羔羊腹泻的有效率为90%（36/40），对照组为65%（26/40），试验组较对照组高出25%。用两种药物进行治疗，治愈率可达100%。第二组药物中氟苯尼考+金根注射液对羔羊腹泻的治疗效果相对于其他几种药物而言，效果较好，其治愈率为91.92%，其他药物治愈率均在90%以下，不推荐使用。2．产羔时间的调整2．1实验原理20 小尾寒羊常年发情，但以春秋两季最旺盛。夏末秋初配种正值母羊膘肥体壮之时，极利于受孕和妊娠。通过抓秋膘和冬季的补饲草料措施，保证了整个妊娠期羔羊生长所需的营养要求及母羊产后体质健壮。再者，冬季寒冷的气候条件不利于环境中病原微生物的生存、繁殖和传播，减少了病原的数量，使冬羔发生腹泻的机率降低。而皋兰县春季天气变化多端，气温极不稳定，一定程度上使所产羔羊产生很大的应激反应，加上整个春季比较潮湿，有利于细菌的大量繁殖，更重要的是母羊在配种和产羔时节正值饲草料青黄不接，使所产羔羊发育不良，抵抗力很低，大大提高了羔羊腹泻的发病率。2．2实验方法在黑石镇、石洞镇选择年存栏量350只左右的20个养殖场户，将选择的这20个养殖场平均分成两组，每组10户，第一组(实验组)所有母羊集中在7～9月夏末秋初时配种，然后统计12月至次年2月份所产羔羊腹泻发病情况，第二组（对照组）按照皋兰县农民传统习惯，可以在7～9月配种，也可以在10～11月配种，统计12月至次年4月份所产羔羊腹泻发病情况。计量时间为第一只羔羊产出时至次年9月为止。2．3结果和分析表2-5不同季节羔羊腹泻调查结果Tab2-5Investigationresultoflambdiarrheaindifferentseasons冬季(10月-12月)春季（1月-3月）夏季（4月-5月）秋季（6月-9月）发死死发发死死发发死死发发死死乡镇发病病亡亡病病亡亡病病亡亡病病亡亡数率数率数率数率数率数率数率数率黑石1020.469．2265.265136220.4142.851镇12石洞1115.459295.8227791.820.4132.630.6镇04211414.合计919.1555.521151.540.4272.780.8122注：在定点的2个镇，黑石镇，石洞镇，每个镇选择10个养殖场（选择养殖数量在350只左右的养殖场，每个养殖场随机抽取全年所产羔羊50只），每个镇选择500只羔羊。由表2-5统计数据分析，羔羊腹泻一年四季的发病率由高到低依次是春、冬、秋、夏。即春季发病率最高，高达21%，冬季的发病率9.1%次于春季。因此，项目组就冬春两季对羔羊腹泻的相关性进行研究，经调查研究分析，适时配种，即集中每年在7～21 9月夏末秋初时配种，对降低皋兰县羔羊腹泻有一定的防治效果。表2-62014年12月～2015年9月羔羊腹泻发病情况调查统计表Tab2-6IncidenceinvestigationforlambsdiarrheafromDecember2014toSeptember20152014年122015年2月2015年4月2015年7月月-2015年1-2015年3-2015年6-2015年9小计产羔组别月月月月数发病发病发病发病发病发病发病发病发病发病数率数率数率数率数率第1组151521514.2583.8110.70028418.7黑石第2组145018712.919013.1302.120.140928.2第1组108215814.6756.9141.30024722.8石洞第2组105215314.513612.9272.620.231830.2第1组259737314.41335.12510053120.4合计第2组250234013.632613572.340.272729.1从上表可看出黑石镇实验组和对照组腹泻发病率分别为18.7%和28.2%，石洞镇分别是22.8%和30.2%。统计数据，实验组发病率要比对照组发病率降低九个百分点。3小结在药物的防治中，氧氟沙星注射液和金氟康对羔羊腹泻的治疗效果较其他几种药物要佳，治愈率分别达到92.31%和90.91%。氧氟沙星对羔羊腹泻具有很好的疗效，其治愈率可达90%以上，而且一次服药治愈率也很高。氧氟沙星注射液、金氟康在预防羔羊腹泻的效果很好。氧氟沙星注射液和金氟康在预防羔羊腹泻的有效率为90%（36/40），对照组为65%（26/40），试验组较对照组高出25%。用两种药物进行治疗，治愈率可达100%。第二组药物中氟苯尼考+金根注射液对羔羊腹泻的治疗效果相对于其他几种药物而言，效果较好，其治愈率为91.92%，其他药物治愈率均在90%以下，不推荐使用。而对产羔时间做相应调整，保证了整个妊娠期羔羊生长所需的营养要求及母羊产后体质健壮。黑石镇实验组和对照组腹泻发病率分别为18.7%和28.2%，石洞镇分别是22.8%和30.2%。统计数据，实验组发病率要比对照组发病率降低九个百分点。22 第三章皋兰县羔羊腹泻的综合防控技术为了有效防控皋兰县羔羊腹泻，降低羔羊腹泻的发病率和死亡率，减少农民经济损失，促进皋兰养羊业进一步发展，结合皋兰县县级标准化养殖场在舍饲及放牧环境下羔羊腹泻的实际情况，研究制定了综合性防控措施。1．加强预防工作1．1以检促防坚持做好“以检促防”，按照“早、快、严、小”的原则进行防治，坚持预防为主、防治结合的方法与措施。对病原定期进行诊断和菌型鉴定，以便及时发现和控制疫病的发生，发现有病羔羊，及时进行隔离观察。做到早发现、早隔离、早治疗。1．2加强环境卫生和消毒工作做好产前、产中、产后羊舍的卫生消毒工作。首先，刚出生的羔羊断脐后，应立即使用2.5%的碘酊对脐部进行消毒。其次，要保证羊舍及周围环境的清洁，及时处理粪便，清扫羊舍，保持产羔、育羔环境，并且要对用具进行定期消毒。尤其是临产前和产羔结束时，羊舍的环境卫生和消毒工作非常重要，此时可以在地面铺撒石灰，并辅之以2%～4%的烧碱对地面及墙面进行喷雾消毒，然后加之以福尔马林或过氧乙酸进行熏蒸消毒。1．3免疫预防怀孕母羊产前2～4周可根据养殖场疫情进行疫苗注射，以便母羊在临产前体内抗[67]体浓度达到高峰，羔羊吸吮后能得到较强的抗体保护。一般在母羊产前2～3周接种羊三联四防苗（预防羊快疫、羊猝狙、羊肠毒血病和羔羊痢疾），羔羊可以从母羊的初[68]乳中获得足够的母源抗体产生被动获得免疫。羔羊大肠杆菌K99基因工程苗在母羊产前2周接种，以保证羔羊获得充足的母源抗体。妊娠母羊在临产前10天应用亚硒酸钠维生素E进行肌肉注射3ml/只，以达到补硒的作用。23 1．4药物预防[69]新生羔羊哺乳前，灌服抗生素如土霉素、硫酸庆大霉素、磺胺类等药物，氯霉素的每天1～2次，每次0.15～0.2g，连续灌服三天，有一定的预防效果。并对出生1～3[70]日龄的羔羊肌肉注射1.5ml的亚硒酸钠维生素E，预防羔羊白肌病的发生。[71-72]未发病的羔羊，为了增强抵抗力，可以用初乳及酸乳进行饮食预防。给予较长时间较大量的酸乳，可以使羔羊获得足够的免疫体和维生素A，并能促进生长发育和预[73]防肠道细菌的危害。也可以在羔羊出生后1～2h内皮下注射母血5～10ml进行预防。[74]初生羔羊可在12小时内口服200mg土霉素粉或环丙沙星水溶性粉，坚持每日服用1次，连续3～5天即可有效预防羔羊腹泻。2．加强饲养管理2．1加强怀孕母羊的饲养管理[75]加强怀孕母羊的饲养管理，尤其是怀孕后期母羊的饲养管理对羔羊腹泻的发病率有极大的影响。首先，应对母羊适当补充精饲料，比如玉米、豆饼等，还可添加一些矿[76]物质、VB、VC及微量元素，确保优质饲草的均衡供应，以便母羊有充足的奶水哺育羔羊，增强羔羊的抵抗能力。其次，要确保母羊的乳房清洁，在羔羊吃初乳前，做好母羊乳房、乳头的消毒工作，可在挤掉几滴奶后喂养羔羊，此法能有效控制因乳房或乳头带菌而导致的羔羊腹泻。另外，还要做好产房夏季的防暑降温和冬季的保暖防寒工作，并保持产房干燥通风，清洁卫生，还应勤换垫草以降低羔羊腹泻发生的风险。2．2加强羔羊的饲养管理2．2．1确保羔羊及早吃到初乳[77]产后15～30分钟内，应该使羔羊吃到初乳，以此来得到母源抗体的保护，避免病毒的侵害。2．2．2适时补饲羔羊在1～2月龄以后，要逐渐采食草料，并以母羊乳汁辅之，也可以有效保护羔24 羊免受病毒侵害。另外，此时的草料应选用优质精饲料、青绿饲料或是青干草，并且要由少到多逐步增加饲料，锻炼羔羊的肠胃机能。但是，饲喂露水草和雨水草却是羔羊饲养管理的一大禁忌。其三，加强羔羊断奶后的管理。一般情况下，羔羊在3．5～4月龄断奶。此时的羔羊主要以青绿牧草为食，并伴之以少量母羊乳汁，而这时要对羔羊采取一次性断奶，之后更需注意羔羊饲草、饲养方式和环境之间的逐渐过渡。2．2．3调整配种时间及产羔季节适时配种，即集中每年在7～9月夏末秋初时配种，对降低皋兰县羔羊腹泻有一定的防治效果：集中在7～9月配种，12月至次年2月产冬羔，较传统7～9月和10～11月分散配种，产冬春两羔，羔羊腹泻要下降九个百分点。3．综合防控效果经临床试验并结合皋兰县肉羊饲养的实际情况，制定出以预防（以检促防、卫生防疫、疫苗注射、药物预防）为主，辅之加强饲养管理（优化母羊饲养管理、加强羔羊的饲养管理）、氧氟沙星注射液和金氟康等药物治疗等相结合的综合性防控模式。通过在黑石镇和石洞镇的4家县级标准化养殖场实施，结合羔羊腹泻的分布状况、发病特点、[78]流行规律等状况，进行了综合性防治技术研究有效降低了羔羊腹泻的发病率。（见表3-1）。表3-1综合防控措施防治羔羊腹泻实施效果统计表Tab3-1Effectofcomprehensivemeasuresforthepreventionandcontroltolambdiarrhea养殖场场址产羔数（只）发病数（只）发病率（%）皋兰瑞亮养殖场黑石镇白坡村2022512.38皋兰云翔养殖场黑石镇石青村1822111.54兰州沃源畜牧专石洞镇中堡村258259.69业合作社皋兰祥鑫养殖场石洞镇涧沟村3864010.36合计102811110.8以上防控措施通过在黑石镇及石洞镇的4家标准化养殖场实施，数据表明相对调查初期平均发病率34.61%降到完成期2015年的10.8%，降低了23.81%。25 通过以上综合防控措施的实施，羔羊腹泻发病率明显降低，经济、社会、生态效益[79-80]显著，科技投入产出比为1：5。下一步将在全县进行大面积推广应用，对皋兰县畜牧业健康发展起到了积极的推动作用。26 第四章结论1．通过开展羔羊腹泻流行病学调查、资料查询和数据统计皋兰县羔羊腹泻呈地方流行性，该病放牧季节很少发生，冬春产羔旺季（舍饲）期间常发，尤其春季所产羔羊发病率和死亡率极高，83.7%的发病羔羊为1～7日龄的羔羊，其特征是发生腹泻和消化道病变，致死率很高。羔羊腹泻在皋兰县长期顽固性存在，平均发病率为34.61%，死亡率为19.7%，在实验的6个镇中，什川镇发病率最低，为31.36%；黑石镇发病率最高，为36.18%。2．通过开展流行病学调查，经临床症状、病理剖检和微生物学检查，证实造成皋兰县羔羊腹泻的细菌是埃希氏大肠杆菌，血清型为埃希氏大肠杆菌K99。3．开展了氧氟沙星注射液、金氟康在预防羔羊腹泻的效果很好。氧氟沙星注射液和金氟康在预防羔羊腹泻的有效率为90%，对照组为65%，试验组较对照组高25%。4．通过开展10种药物对羔羊腹泻的疗效比较试验，结果表明，抗生素类药物中，氧氟沙星注射液和金氟康对羔羊腹泻的治疗效果较其他几种药物要佳，治愈率分别达到92.31%和90.91%；中药制剂类药物中氟苯尼考+金根注射液对羔羊腹泻的治疗效果较好，其治愈率为91.92%。5．进行了配种时间和产羔时间与羔羊腹泻的相关性研究，分析数据，集中在7～9月配种，12月至次年2月产冬羔，较传统7～9月和10～11月分散配种，产冬春两羔，羔羊腹泻要下降九个百分点。6．经临床试验并结合皋兰县肉羊饲养的实际情况，制定出以预防（以检促防、卫生防疫、疫苗注射、药物预防）为主，辅之加强饲养管理（优化母羊饲养管理、加强羔羊的饲养管理）、氧氟沙星注射液和金氟康等药物治疗等相结合的综合性防控模式。通过在黑石镇和石洞镇实施防控模式，使羔羊腹泻的发病率降低了23.81%。综上所述，羔羊腹泻在治疗过程中应分清腹泻种类，进行对症治疗。同时，加强对羔羊及羔羊饲养环境的管理，降低羔羊腹泻的发生，减少皋兰县养羊业发展的阻力。27 致谢本论文是在我的导师陈智华教授的精心指导和严格要求下完成的，陈老师渊博的学识、严谨的治学态度、敬业奉献的工作作风，给我以深刻的教诲和启迪，将使我终生受益。从我课题的选题、设计到论文撰写和修改，陈老师悉心指导，致使我顺利完成课题。在此对陈老师表示衷心的感谢和深深的祝福。衷心感谢感谢甘肃农业大学动物医学院领导老师三年来的培养指导，感谢皋兰县动物疫病预防控制中心领导及同事给予的大力支持指导和无私帮助。28 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附表表1皋兰县羔羊腹泻问卷调查表镇村时间：户主姓名：1、家中饲养肉羊只。2、肉羊饲养方式？（1）圈养头。（2）放牧头。3、近三年内羊羔出生多少只、存活多少只？（1）2013年出生只，存活只（2）2014年出生只，存活只（3）2015年出生只，存活只4、羊羔是否有以下症状？（1）、精神沉郁、虚弱、弓背、起卧困难A：有头；B、无（2）、轻度或重度腹泻A：有头；B、无（3）、体温升高A：有头；B、无（4）出现关节炎或神经症状A：有头；B、无（5）、以上症状有2-3种同时出现的请写明是哪几种，有多少头？5、死亡羊羔出现腹泻症状多还是少？A、多B、少C、差不多6、羊羔死亡多发生在什么季节？（可多选）A、春季B、夏季C、秋季D、冬季7、发病羔羊多是几日（周）龄？（多选）A、2-7日龄B、8-14日龄C、2-6周龄D、6周龄以上32 表2生产记录（按日或变动记录）生产变动情况（数量）总存时间调出备注栏数出生调入仔畜畜禽商品畜禽淘汰33 表3兽药使用记录动药畜禽首次末次物品用药休药期兽医标识病症规格批号生产企业用药用药种名方法（天）签名号日期日期类称34 表4饲料、饲料添加剂使用记录饲料及饲料添购入店或经销使用时生产厂执行标准/批饲喂方添加剂使用方备注加剂名称商名称间家准文号法法与用量35 表5消毒记录日期消毒场所消毒药名称用药剂量消毒方法操作员签字36 表6免疫记录存免批号栏疫疫苗名疫苗生免疫方免疫剂免疫人时间圈舍号（有效备注数数称产厂法量员期）量量37 表7诊疗记录圈舍诊疗用药时间畜禽标识编码日龄发病数病因诊疗结果号人员名称38 表8防疫监督监测记录日畜禽标识编采样名称及数监测项监测结处理情备监督（监测）单位期码量目果况注39 表9病死畜无害化处理记录处理方处理单位（或日期数量处理或死亡原因畜禽标识编码备注法责任人）40 作者简介魏文娇，女，汉族，出生于1986年8月，皋兰县动物疫病预防控制中心工作，主要从事动物疫病预防与防治，动物卫生监督及草原补奖工作。41 导师简介陈智华，男，汉族，1961年12月生。1983年7月甘肃农业大学兽医系本科毕业，获农学学士学位。1986年兽医系兽医外科学硕士研究生毕业，获农学硕士学位。同年留校任教，先后任助教、讲师，副教授，现为甘肃农业大学动物医学院教授，硕士研究生导师，兼任甘肃农业大学动物医院院长、中国畜牧兽医学会兽医外科学分会副理事长。主要从事兽医外科学、兽医外科手术学、小动物疾病学和临床兽医学等相关的教学和科研工作。承担动物医学专业本科生的《兽医外科手术学》、《兽医外科学》和《小动物疾病学》等课程的教学、实习、试验及毕业生产实习和毕业论文指导工作。承担硕士研究生的《高级兽医外科学》和《高级兽医外科手术学》等课程。参编全国统编教材和专著各两本。先后完成和参加国家自然科学基金项目四项；获甘肃省科技进步二等奖一项，三等奖两项，甘肃省教育厅高校科技进步二等奖和三等奖各一项，甘肃省农牧渔业丰收奖二等奖和畜牧业科技进步三等奖各一项，兰州市科学技术进步三等奖一项。发表论文二十余篇。42 43