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分类号密级学校代帖：１０２７７ＵＤＣ编号学号：１３２０３０２０３２主廢ｎｔ弯说硕±学位论文ＦＴＯ基因多态性与长期有氧运动老年人血巧异常的相关性研究－Ｃｏｒｒｅｉａ村ｏｎｂｅｔｗｅｅｎｆａｔｍａｓｓａｎｄｏｂｅｓｉｔａｓｓｏｃｉａ化ｄｅｎｅＦＴＯｙｇｒｓ９９３９６０９ｏｌｍｏｒｈｉｓｍａｎｄｌｕｃｏｓｅａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓａｍｏｎｔｈｅｐｙｐｇｇ－ｒｍｌｏｎｇｔｅａｅｒｏｂｉｃｅｘｅｒｃｉｓｅｅｌｄｅｒｌｙ院系：运动科学学院专业：运动人体科学姓名：汪阳指导教师：王茹副教授徐卫东教授递交日期２０１６年４．：月３日学位授予单位；上海体育学院 学位论文原削性声明本人呈交的学位论文是在导师指导下进行的研巧工作及取得的。经注明引用的内容外，本论文不包含研巧成果据我所知，除文中己其他个人己经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究工作做出重要。贡献的个人和集体，均己在文中做了明确说明并表示谢意、－－冷丈作者巧城、）■〇！６！１裏：扛］；护 关于论文出版授权的声明＂授权学校将本人的学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光＂盘版）电子杂志社进行电子和网络出版，并编入ＣＮＫＩ系列数据库，传擢本学位论，《±位文的全部或部分内容同意按中国优秀博硕学论－受。文全文数据库出版章程》相关权益享？？？—？－．—－—一？？，．．．■一．Ｔ．论：回□博±文级别硕±业：运体科学学科专动人：Ｏ运老年人血的ＦＴ因多期糖常论文题目基态性与长有氧动异相关性研究厶／专ｆｊｆ：：作者签名指导教师签名自＇）年日方＇居《月７ FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究中文摘要研究目的本研究以上海地区323例长期参加规律有氧运动锻炼的老年人为研究对象，通过观察肥胖量和肥胖相关基因（fatmassandobesity-associated,FTO）rs9939609多态性位点频率分布，探讨FTO基因多态性与血糖异常及相关代谢指标的相关性，进一步分析FTO基因多态性和体力活动的共同作用对改善血糖、降低异常风险的敏感性，旨在从基因多态角度，为长期有氧运动老年人寻求合理的体力活动推荐量提供理论依据。研究方法从上海市杨浦区、虹口区、徐汇区、浦东新区四个辖区的部分社区居委会招募有长期规律有氧运动习惯的老年人。纳入标准：⑴BMI≧18.5kg/m2，过去半年内体重保持相对稳定。⑵运动史：从事规律运动锻炼3年以上。⑶时间/频率：每周运动次数≧3次，每次锻炼≧30min。⑷未服用过降糖药及影响糖代谢的药物，未患有心脏病等严重的心血管疾病。通过初筛问卷和进一步的体格检测确定符合条件的受试者，最终通过筛选共招募长期有氧运动老年人323例，剔除部分信息缺失受试者2例后，实际有效受试者共321例。其中男性136例，女性185例，最小年龄为60岁，最大年龄为69岁，平均年龄63.42±3.14岁。根据2013年《中国Ⅱ型糖尿病防治指南》血糖异常（高血糖）界定标准，即空腹血糖6.1-7.0mmol/L、餐后2h血糖7.8-11.1mmol/L或者空腹血糖≧7.0mmol/L，结合问卷和血糖测试结果，把受试者分为血糖异常组（简称“异常组”，包括糖尿病和糖尿病前期，下同）和血糖正常组（简称“正常组”，下同）。对各组受试者分别进行基本体格测试（包括身高、体重、血压），IPAQ体力活动水平检测，血液生化指标检测（包括空腹血糖、胰岛素、瘦素等）。采用引物单碱基延伸与基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）技术检测FTOrs9939609位点基因多态性。研究结果1.本研究共对321例受试者成功进行FTOrs9939609位点SNP基因分型。质谱分析结果显示，所有样本中共有AA、TT、AT三种基因型被检测出，其中AA基因型受试者5例(1.56%)，AT基因型受试者77例(23.99%)，TT基因型受试者239例(74.45%)，A等位基因频率为13.55%，T等位基因频率为86.45%。经检验，符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(2=0.182，P=0.669>0.05)。2.按照BMI分组，超重+肥胖组FTOrs9939609位点AA+AT基因型频率高于正常体重组（30.49%vs20.38%），A风险等位基因频率也高于正常体重组（16.46%vs10.51%），二者差异均有显著性（P=0.038,0.028<0.05），说明FTO基因rs9939609位点多态性可能与超重和肥胖的发生有关。与未携带A风险等位基因个体相比，携带A风险等位基因个体发生超重和肥胖的风险高达1.678倍I （95%CI：1.055-2.669）。3.按照血糖分组，血糖异常组和正常组之间FTOrs9939609位点AA+AT基因型频率（24.22%vs27.56%）、A风险等位基因频率（12.63%vs14.96%）均无显著性差异（P=0.503,0.399>0.05）。进行性别分层后，依然无显著性差异。4.在血糖异常组，FTO基因rs9939609位点AA+AT基因型人群的BMI和瘦素水平均高于TT基因型人群，差异具有显著性（P=0.038,0.047<0.05）。这种差别经性别、年龄等相关因素校正后依然存在。在血糖正常组，FTO基因rs9939609位点不同基因型人群之间各项临床指标均无显著性差异（P>0.05）。5.随着体力活动水平的不断升高，AA+AT基因型受试者血糖水平逐渐降低，其中体力活动达到6153MET-min/w以上水平人群与体力活动低于4176MET-min/w人群相比，差异具有显著性（P<0.05），而TT基因型受试者血糖水平变化不大，只有轻微的降低趋势，未见显著性差异（P>0.05）。当体力活动达到6153MET-min/w及以上水平时，AA+AT基因型人群与TT基因型人群相比，血糖差异具有显著性（P<0.05）。研究结论不同FTOrs9939609基因型人群通过体力活动来改善血糖的敏感性不同。与TT基因型人群相比，AA+AT基因型人群更适合通过相对较高的体力活动量（PA>6153MET-min/w）来改善血糖。关键词：FTO；单核苷酸多态性；有氧运动；体力活动；血糖异常II Correlationbetweenfatmassandobesity-associatedgeneFTOrs9939609polymorphismandglucoseabnormalitiesamongthelong-termaerobicexerciseelderlyAbstractObjectiveThisstudyselected323long-termaerobicexerciseelderlyinShanghaiastheresearchobject,toexplorethecorrelationbetweenfatmassandobesity-associatedgeneFTOrs9939609polymorphismandglucoseabnormalitiesandglycometabolismrelatedindexesbycomparingtheallelicandgenotypicfrequency.Furthermore,weanalysisedthesensibilityofeffectswithFTOrs9939609polymorphismandphysicalactivityforreducingtheriskofglucoseabnormalities,whichcouldprovideatheoreticalbasisforthelong-termaerobicexerciseelderlytoseekreasonablephysicalactivityrecommendationsfromtheperspectiveofgenepolymorphism.MethodRecruitedthelong-termaerobicexerciseelderlyfromthecommunityofShanghai,China.Inclusivecriteria:(1)BMI≧18.5kg/m2,bodyweightkeptrelativelystableoverthepastsixmonths;(2)≧3years’aerobicexercise;(3)≧3timesperweek,≧30minutespertime;(4)Nohypoglycemicagentsdrugtaken,andnoseriouscardiovasculardisease,suchasheartdisease.Bytheinitialscreeningquestionnaireandfurtherphysicalexamination,wefinallyrecruited323subjects.Afterremoving2informationmissingcases,theactualeffectivesubjectswere321cases,136malesand185females,averageageof63.42±3.14years(60-69).AccordingtoChinaguidelinefortype2diabetes(2013),thesubjectswereallocatedintoGluabnormalgroupandGlunormalgroup.Anthropometric,biochemicalvariablesandphysicalactivitybyIPAQwereexaminedintotalsubjects.FTOrs9939609polymorphismwasgenotypedbyMALDI-TOF.Results1.Inthisstudy,atotalof321subjectsweresuccessfullyperformedFTOrs9939609SNPgenotyping.Massspectrometryanalysisshowedthattherewere5AAgenotype,77TAgenotypeand239TTgenotype.ThefrequencyofAalleledistributionwas13.55%,and86.45%ofTallele.AllgenotypegroupsobeyedHardy-Weinbergequilibrium(2=0.182,P=0.669>0.05).2.AftergroupingthesubjectsaccordingtoBMI,Aallele(16.46%vs10.51%)andtheAA+ATgenotype(30.49%vs20.38%)intheoverweightandobesitygroupweresignificantlyhigherthanthenomalweightgroup(P=0.038,0.028<0.05).ComparedwithcarriesofTallele,carriesofAallelehadahigherriskofoverweightandobesity(OR=1.678,95%CI:1.055-2.669).III 3.AftergroupingthesubjectsaccordingtoFBG,nosignificantdifferencewasdetectedinAallele(12.63%vs14.96%)ortheAA+ATgenotype(24.22%vs27.56%)betweentheGluabnormalgroupandthenomalweightgroup(P=0.503,0.399>0.05).Stratificationbygender,revealednegativeassociationbetweenFTOrs9939609andglucoseabnormalities.4.InGluabnormalgroup,theAA+ATgenotypesubjectshadhigherBMIandleptinthantheTTgenotypesubjects(P=0.038,0.047<0.05).Theassociationstillexistedafteradjustmentforgenderandage.5.Withtherisinglevelofphysicalactivity,FBGinAA+ATgenotypesubjectsweredecreasingandthedifferencewassignificantbetweensubjectswhosephysicalactivitylevel>6153MET-min/wand≤4176MET-min/w(P<0.05).However,FBGinTTgenotypesubjectswerejustslightlydecreasing,withnosignificantdifference(P>0.05).FBGhadasignificantdifferencebetweenAA+ATgenotypesubjectsandTTgenotypesubjectswhenphysicalactivitylevelreached6153MET-min/wandabove(P<0.05).ConclusionDifferentFTOrs9939609genotypesubjectshaddifferentsensibilitiesforreducingtheriskofglucoseabnormalitiesthroughphysicalactivity.ComparedwiththeTTgenotypesubjects,theAA+ATgenotypesubjectsweremoresuitabletoreducetheriskofglucoseabnormalitieswitharelativelyhighlevelofphysicalactivity(PA>6153MET-min/w).Keywords:FTO;SNP;Aerobicexercise;Physicalactivity;GlucoseabnormalitiesIV 目录1前言..................................................................................................................................12研究对象与方法.............................................................................................................22.1研究对象.................................................................................................................22.2研究方法.................................................................................................................32.2.1主要实验试剂..............................................................................................32.2.2主要实验仪器与设备.................................................................................32.2.3基本体格测试............................................................................................42.2.4体力活动水平检测....................................................................................42.2.5血液生化指标检测....................................................................................52.2.6基因组DNA提取.....................................................................................52.2.7FTOrs9939609基因型检测....................................................................52.3统计学分析...........................................................................................................62.4技术路线...............................................................................................................73研究结果..........................................................................................................................73.1FTOrs9939609位点基因分型结果...................................................................73.2FTOrs9939609基因多态性与血糖异常的相关性.........................................93.2.1按照BMI分组，不同组间FTOrs9939609基因型及等位基因频率比较........................................................................................................................93.2.2按照血糖分组，不同组间FTOrs9939609基因型及等位基因频率比较........................................................................................................................93.2.3异常组、正常组FTOrs9939609不同基因型与临床代谢参数关系分析......................................................................................................................103.3FTOrs9939609基因多态性和体力活动对血糖的共同作用......................133.3.1同一基因型，不同体力活动水平与血糖的相关性比较..................133.3.2同一体力活动水平，不同基因型与血糖的相关性比较..................134分析与讨论....................................................................................................................144.1FTO基因特征与功能........................................................................................144.2长期有氧运动老年人FTOrs9939609基因型和等位基因频率分布........144.3FTOrs9939609基因多态性与血糖异常的相关性及可能机制..................154.4FTOrs9939609基因多态性和体力活动对血糖的共同作用......................175研究结论........................................................................................................................186中英文缩写对照表.......................................................................................................197参考文献........................................................................................................................20文献综述............................................................................................................................23附件1：伦理委员会审批表...........................................................................................31附件2：知情同意书........................................................................................................32致谢.....................................................................................................................................33 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究1前言我国已步入老龄化社会，当前我国人口老龄化问题已越来越严重。根据《中国老龄事业发展报告（2013）》[1]，截至2012年底，我国老年人口数量已达到1.94亿，占总人口的14.3%，估计到2025年我国老年人口比例将占全国人口的20%左右。关注和改善老年人健康是涉及社会和谐、文明进步的一个重大民生课题。老年人健康状况随年龄的增长而逐步衰退是客观发展的规律。近年来，生活水平相对提高，体力劳动强度减少，增龄性系统机能退化，让肥胖在我国老年人群中发病率急剧上升，与之并发的Ⅱ型糖尿病也成为困扰老年人的一大顽疾。中国慢病监测及糖尿病专题调查报告数据显示，中国18岁及以上居民糖尿病患病率为11.6%，60岁以上老年人患病率却高达19.6%[2]。以空腹血糖或餐后2小时血糖升高为特征的血糖异常（高血糖）主要包括空腹血糖受损（ImpairedFastingGlucose，IFG）、葡萄糖耐量减退（ImpairedGlucoseTolerance，IGT）和糖尿病。IFG和IGT被认为是机体糖代谢过程由正常状态向糖尿病的中间过渡阶段，与糖尿病的发生关系十分密切[3]。糖尿病治疗主要是针对高血糖症状治疗，控制血糖贯穿于疾病治疗的始终。当前，老年人群预期寿命得到了延长，但健康状况却由于糖尿病等慢性疾病的“侵袭”受到不同程度的限制。对此，老年人在承担昂贵的医疗费用成本之余，可以更多的尝试通过非药物途径来预防和改善疾病。体力活动低水平是糖尿病发生的独立危险因素[4]。2010年美国健康与大众服务部(HHS)制订的人类健康计划共列举了促进健康的10大措施，其中增加体力活动位列第一[5]。随着全民健身热潮的兴起和“不治已病治未病”观念的普及，老年人开始把以运动锻炼为主的体力活动视为一剂良药，积极投身到通过运动，增加体力活动以预防各类慢性疾病的队伍当中。有学者指出，不管是日常生活工作的体力活动还是定量的体育运动锻炼都能有效减少慢性疾病的发病率及其全因死亡率[6]。因此，增加日常体力活动水平至高水平对于改善肥胖和糖代谢异常等慢性疾病具有重要作用[7]。体力活动增加可以明显改善血糖，这是因为运动使肌肉收缩强度和肌肉血流量增多，提高胰岛素的敏感性从而加速组织对葡萄糖的吸收和利用，使血糖水平降低。通过增加体力活动控制血糖在正常水平，对预防糖尿病至关重要[8]。随着分子生物学，特别是基因组学（包括表观遗传学）等尖端科学技术的迅猛发展，从基因遗传水平探讨体力活动与相关疾病的关系研究逐渐开展。人类在长期进化过程中，基因组DNA序列在保持稳定的同时也在不断发生变异。当基因变异频率超过1%时，就出现了基因多态性。作为人类目前可遗传变异中最常见的一种，单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP），是由于单个核苷酸碱基的转换或颠换而导致的DNA序列多态性，从而表现出不同基因型。SNP通常是二等位基因的变异，这种多态性使得不同人对于同一疾病的易感性不同，对药物的敏感性也有差异[9-10]。全基因组关联研究技术（Genome-wideAssociationStudy,GWAS）是研究SNP与疾病是否易感的常用手段，其原理是通过比较SNP位点上的最小等位基因频率在病例组和对照组间有无显著性差异，进而得出该位点是否与疾病存在着统计学关联的结论。通过该技1 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究术的运用，Frayling等[11]首次发现，位于FTO基因第一内含子序列中的rs9939609位点SNP与体重增加和糖尿病的发病风险具有很强的相关性，其显著性P值达到5×10-8，由此将该基因命名为肥胖量和肥胖相关基因（fatmassandobesity-associated,FTO）。随后，作为糖尿病相关研究热点，FTO基因在后续不同的人群中先后得到验证，但是，总结这方面的研究可以发现：在欧美人群中[12-15]，FTO基因与糖尿病的关系比较明确，普遍支持FTO基因rs9939609多态性能通过BMI作用影响糖尿病的发生；但是在中国乃至亚洲人群中的研究尚未得到相对一致的结论，有认为FTO基因与糖尿病相关的[16-21]，也有认为不相关的[22-26]。总结出现不一致的原因，一方面是因为研究选取受试者遗传背景不同，另一方面是由于受试者纳入时混杂因素较多，如年龄构成复杂（不同年龄段）、运动背景不一（有运动史与无运动史掺杂）等。研究发现，虽然增加体力活动对改善糖尿病相关表型有积极作用，但是受基因因素影响，不同个体之间改善作用差别较大[27]。国内学者李效凯等[28]研究证实FTO基因rs9939609多态性和体力活动可以对血糖变化产生共同效应，并发现体力活动对FTO不同基因型个体改善血糖具有一致的健康效应，携带A风险等位基因者更受益。Sonestedt等[29]研究也发现，在FTO基因rs9939609位点A风险等位基因携带者中，体力活动水平较低者其心血管疾病的风险明显增加。这提醒我们，在研究体力活动对血糖的改善作用时，要结合遗传因素基因多态，考虑不同基因型个体对体力活动效果的敏感性。目前这方面的研究还非常少。基于上述背景，本研究以上海地区323例60-69岁长期参加规律有氧运动锻炼的老年人为研究对象，探讨FTO基因rs9939609位点SNP与该人群血糖异常及相关代谢指标的相关性，并进一步分析FTO基因多态性和体力活动的共同作用对改善血糖、降低异常风险的敏感性，旨在为长期有氧运动老年人寻求合理的体力活动推荐量提供理论依据和参考。2研究对象与方法2.1研究对象从上海市杨浦区、虹口区、徐汇区、浦东新区四个辖区的部分社区居委会招募60-69岁有长期规律有氧运动习惯的老年人。纳入标准如下：⑴BMI≧18.5kg/m2，过去半年内体重保持相对稳定。⑵运动史：从事规律运动锻炼3年以上。⑶时间/频率：每周运动次数≧3次，每次锻炼≧30min。⑷未服用过降糖药及影响糖代谢的药物，未患有心脏病等严重的心血管疾病。表1受试者基本信息一览表（x±s）异常组正常组P（N=194）（N=127）性别（男/女）81/11352/750.886年龄(y)63.67±3.2463.03±2.960.075身高(cm)162.66±7.98161.57±7.620.225体重(kg)64.38±9.7062.77±11.100.170BMI(kg/m2)24.54±3.0724.25±3.990.4652 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究受试者筛选通过两次筛查完成，第一次筛查向所有潜在受试者仔细解释本次研究意义以及参与过程中的注意问题等，通过健康生活方式问卷、体力活动问卷调查了解他们的健康状况和疾病史、服药情况、饮食以及参加体育锻炼的情况等。第二次筛查根据问卷反馈结果，筛选出基线水平（健康状况、运动史等）基本相仿的潜在受试者并对他们进行身高、体重、血压测量及血液样本采集。通过体格检查及相关测试结果，进一步剔除不符合要求的潜在受试者。最终，通过筛选共招募长期有氧运动老年人323例，剔除部分信息缺失受试者2例后，实际有效受试者共321例。其中男性136例，女性185例，最小年龄为60岁，最大年龄为69岁，平均年龄63.42±3.14岁。根据2013年《中国Ⅱ型糖尿病防治指南》[30]血糖异常（高血糖）界定标准，即空腹血糖6.1-7.0mmol/L、餐后2h血糖7.8-11.1mmol/L或者空腹血糖≧7.0mmol/L，结合问卷和血糖测试结果，把受试者分为血糖异常组（简称“异常组”，包括糖尿病和糖尿病前期，下同）和血糖正常组（简称“正常组”，下同）。两组受试者基本信息如表1。经检验，两组受试者在性别、年龄、身高、体重、BMI等方面均无显著性差异（P>0.05），具有可比性。本研究通过上海体育学院伦理委员会批准（附件1）。所有受试者均为没有血缘关系的汉族人，在全面了解本研究的基础上签署了知情同意书（附件2）。2.2研究方法2.2.1主要实验试剂试剂名称产地基因组DNA提取试剂盒荷兰QIAGEN公司PCR扩增和单碱基延伸试剂盒美国Sequenom公司HumanMagneticLuminexScreening美国R&DSystems公司AssayBiosenC-line样品破坏液德国EKFBiosenC-line公司BiosenC-line标准液德国EKFBiosenC-line公司BiosenC-line质控液德国EKFBiosenC-line公司其他试剂：EDTA、超纯水国产分析纯试剂2.2.2主要实验仪器与设备仪器名称产地身长体重计TKK4643a日本TKK公司UDEX-Twin-Ⅱ型全自动电子血压计日本elk株式会社冷冻高速离心机德国Eppendorf公司数字显示式恒温水温箱上海浦东荣丰科学仪器有限公司微孔板分光光度计美国Biotek公司3 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究低温冰箱中国海尔集团股份有限公司系列加样器德国Eppendorf公司ABIPrism®7300型荧光定量PCR仪美国ABI公司时间飞行质谱生物芯片系统（MassARRAY®美国Sequenom公司MALDI-TOFSystem）MassARRAYTyper软件系统（版本号4.0）美国Sequenom公司EKFBiosenC-line血糖分析仪德国EKFBiosenC-line公司液态悬浮芯片系统Luminex200美国Bio-Rad公司雅培i2000化学发光免疫分析仪美国雅培公司全自动化学发光免疫分析仪IMMULITE2000德国西门子公司数显酶标震荡器德国Janke&Kunkel公司高压灭菌锅日本Tomy公司2.2.3基本体格测试受试者着轻装，赤脚，背向立柱立正姿势站于TKK4643a身长体重测试仪的底板上，要求头部正直，躯干自然挺直，上肢自然下垂，足跟并拢，足尖分开60°。待受试者完成上述动作要领后，按下开始键，身高测试头自动下滑，轻触受试者头部时自动停止。身高精确到0.1cm，体重精确到0.1kg。测量严格按照国民体质测定标准进行，由专业测试人员操作完成。通过体重（kg）除以身高的平方（m2）计算出每个受试者对应的身体质量指数BMI。血压的测量严格按照世界卫生组织制定的标准进行，由专业测试人员采用UDEX-Twin型全自动电子血压计完成。受试者接受测定前保持安静情绪，以端坐体位将手臂放入可270°旋转的血压测量部位（肱动脉），将手腕伸直放在手腕放置部位，然后按下开始键即可。2.2.4体力活动水平检测体力活动水平通过《国际体力活动量表（InternationalPhysicalActivityQuestionnaire，IPAQ）中文版长卷》来进行测量。近年来，该问卷已广泛用于中国人群研究，经检验信度和效度良好[31-33]。IPAQ主要通过回顾受试者测试前一周内参加各种不同强度（包括日常工作、交通、生活、运动锻炼等）体力活动持续时间、频率等，并根据不同强度体力活动属性及代谢当量（MET）赋值，来简便、快速地计算受试者体力活动水平。MET是反映机体代谢水平和能量消耗的重要指标，可用于各种活动定量以及运动强度判断。按照IPAQ制定的标准，大强度体力活动能量消耗约为8.0MET，中等强度体力活动约为4.0MET，步行约为3.3MET，计算每周体力活动能量消耗MET值：MET-min/W=MET水平×活动时间(min)×每周活动次数。本研究受试对象为上海地区长期规律有氧运动老年人，受城市发展观念影响，更热衷于通过运动促进健康，体力活动水平普遍较高。如果按照IPAQ推荐体力活动分组标准（即低体力活动水平：PA<600MET-min/w；中体力活动水平：600MET-min/w≤PA<3000MET-min/w；4 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究高体力活动水平：PA≧3000MET-min/w）来分组，所有受试者基本上都处于高体力活动水平。为更好地区分不同受试者体力活动水平，达到研究目的，本研究采取四分位数法，将所有受试者体力活动水平按照由小到大的顺序分成P1-25，P26-50，P51-75，P76-100四个等级。各等级对应的体力活动能量消耗MET值见表2。表2各等级体力活动能量消耗范围MET值P1-25P26-50P51-75P76-100PA≤4176ME41769006MET-min/wT-min/wT-min/wT-min/w2.2.5血液生化指标检测采血前一天告知受试者停止任何运动，不服用任何药物。采血时由专业护士采集受试者清晨空腹状态下同侧肘静脉血，室温下静置30min后以3000r/min高速离心10min，取血清待检。空腹血糖采用葡萄糖氧化酶法检测，胰岛素采用化学发光法测定，瘦素采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定。采用稳态模型评估法对胰岛素抵抗指数(insulinresistanceindex，HOMA-IR)进行计算，公式为：HOMA-IR=空腹血糖（mmol/L）×空腹胰岛素（mU/L）/22.5。2.2.6基因组DNA提取取空腹静脉全血2ml置于EDTA抗凝管，采用QIAampBloodDNAMiniKit提取试剂盒（Qiagen，Venlo，theNetherlands）提取基因组DNA。提取得到的DNA采用紫外分光光度计检测其浓度和纯度。本研究中，检测提取基因组DNA样本纯度OD(260)/OD(280)均在1.7-2.0范围内，浓度均在10ng/ul以上。符合后续基因型检测对样本DNA的质量要求。2.2.7FTOrs9939609基因型检测FTOrs9939609SNP基因型采用引物单碱基延伸与基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术（MALDI-TOF）检测，交由上海邃志生物科技有限公司完成。该技术主要特点是先通过PCR扩增目标序列，然后加入SNP序列特异延伸引物，在SNP位点上，延伸1个碱基。其工作原理是：将待测标本与基质分子混合，待测标本分子在基质分子的作用下被分散开。受激光的作用，基质分子不断吸收能量，使待测标本与基质的混合物表面升温至基质发生升华的温度，导致基质-标本之间电荷转移从而使得标本分子转变为单电荷离子，在电场的作用下电离的标本加速经过飞行管道并获取相同的动能，离子质量越小，就越快到达检测器。根据到达检测器的飞行时间不同，即测定离子的质荷比(M/Z)与标本离子的飞行时间成正比来分析所测标本离子，并可以测得标本分子的分子量。其反应体系为非杂交依赖性，不存在潜在的杂交错配干扰，亦无需引入各种标记物，是通过分子量大小而非颜色来检测SNP，准确度超过99.7%。SNP基因型检测实验基本步骤如下：（1）PCR扩增位点所在的DNA片段所有需要分型的DNA样本都稀释到5-10ng/ul，取1ulDNA样本，将其与0.95ul水、0.625ulPCR缓冲液（含15mmol/LMgCl2）、1ul2.5mmol/L的dNTP、0.325ul25mmol/L的MgCl2、1ulPCR引物以及0.1ulHotStarTaq酶(德国Qiagen5 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究公司)混合在一起。PCR反应条件：94°C15分钟；94°C20秒，56°C30秒，72°C1分钟，共45个循环；最终72°C3分钟。（2）PCR产物纯化PCR扩增后，剩余的dNTP和残留引物将通过虾碱性磷酸酶反应消化掉，反应体系包括1.53ul水、0.17ul人血清淀粉样蛋白（SAP）缓冲液、0.3单位虾碱性磷酸酶(美国Sequenom公司)。该反应在37°C进行40分钟，然后85°C5分钟使酶失活。（3）单碱基延伸反应碱性磷酸酶处理后，针对SNP的单碱基延伸引物在下列反应体系中进行：0.755ul超纯水、0.2ul10×iPLEX缓冲液、0.2ul终止混合物、0.041uliPLEX酶(美国Sequenom公司)，0.804ul10umol/L的延伸引物。单碱基延伸反应在下列条件下进行：94°C30秒；94°C5秒，52°C5秒，80°C5秒5个循环，共40个循环；最后72°C3分钟。（4）树脂脱盐纯化在终止反应物中加入6mg阳离子交换树脂(美国Sequenom公司)脱盐，混合后加入25ul水悬浮。使用MassARRAYNanodispenser(美国Sequenom公司)将最终的分型产物点样到一块384孔的SpectroCHIP(美国Sequenom公司)反应板上待检。（5）上机检测，数据收集采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术进行基因型检测。最终结果由MassARRAYRT软件系统（版本号3.0.0.4）实时读取，并由MassARRAYTyper软件系统（版本号4.0）完成基因分型分析。（6）质量控制实验过程中所有试剂和器具均严格消毒，以防止DNA提取和扩增中受到污染。对未检测出的样本和无法判断结果的样本进行重复实验。为保证基因分型结果准确性，随机抽取5%样本进行重复检测，二次检测结果与初次检测结果一致。本研究FTOrs9939609SNP基因型检测实验过程中，PCR反应引物和单碱基延伸引物都是用美国Sequenom公司的AssayDesignSuiteV2.0在线软件设计。序列查询是通过Sequenom官方网站AssayDesignSuiteV2.0（Sequenom）在线软件自动完成查询（共享NCBI数据库）。具体FTO基因rs9939609位点引物序列信息见表3。表3FTO基因rs9939609位点引物序列信息基因位点PCR引物序列（5'-3'）单碱基延伸引物序列上游引物：ACGTTGGATGGTAACAGAGACTATCCAAGTGTGCGACTGCTGTGAATrs9939609下游引物：TTACGTTGGATGGTTATGCATTTAGAATGTCTG2.3统计学分析所有问卷数据和测试数据通过EpiData软件进行平行双录入计算机建立数6 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究据库，对录入数据的一致性进行比较分析，核查并修改不一致的数据，校对无误后导入SPSS20.0软件对数据进行统计分析。连续性数据以均数±标准差（x±s）表示，计数资料采用例数（百分比）表示。对基因型和等位基因频率分布进行Hardy-Weinberg平衡检验，若P>0.05，则符合H-W平衡，说明本实验样本群体代表性良好，无选择偏倚。采用四格表2检验分析不同组别之间基因型和等位基因频率的差异，计算相对危险度比值比OR及95%可信区间。组间连续性代谢参数均值的比较采用t检验或者单因素方差分析，多重线性回归调整混杂因素影响。统计显著水平为P<0.05。2.4技术路线3研究结果3.1FTOrs9939609位点基因分型结果查询Genbank基因序列数据库，发现FTOrs9939609位点SNP是由T→A的突变造成的。理论上，该位点基因多态性存在3种可能的基因型，即AA和TT型纯合子以及AT型杂合子。剔除部分信息缺失受试者2例后，本研究共对321例受试者成功进行FTOrs9939609位点SNP基因分型。质谱分析结果显示，所有样本中共有AA、TT、AT三种基因型被检测出，其中AA基因型在分子量近7020Da处有峰图，TT基因型在分子量为6960Da处有峰图，AT基因型在分子量近7015Da和6960Da处有两处峰图，见图1。7 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究图1FTO基因rs9939609位点SNP质谱图本研究中共检测出AA基因型受试者5例(1.56%)，AT基因型受试者77例(23.99%)，TT基因型受试者239例(74.45%)，A等位基因频率为13.55%，T等位基因频率为86.45%。经遗传平衡检验，各基因型实际值与预期值比较，符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(2=0.182,P=0.669>0.05)，见表4。说明本研究人群选取具有较好的群体代表性。由于AA基因型受试者人数较少，在后续数据分析过程中将其合并AT基因型（AA+AT）共同与TT基因型进行不同基因型之间比较分析。表4基因型分布的Hardy-Weinberg平衡检验基因型实际频数期望频数突变纯合子（AA型）55.89杂合子（AT型）7775.21野生纯合子（TT型）239239.8920.182P值0.6698 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究3.2FTOrs9939609基因多态性与血糖异常的相关性由于FTO基因是肥胖相关基因，本部分按照BMI分组和血糖分组分别对FTOrs9939609位点基因型和等位基因频率进行了统计分析。3.2.1按照BMI分组，不同组间FTOrs9939609基因型及等位基因频率比较按照2002年中国肥胖问题工作组对超重和肥胖的分类标准[34]，即BMI：18.5-23.9kg/m2为正常，24-27.9kg/m2为超重，BMI≧28kg/m2为肥胖，对所有受试者进行BMI分组，并探讨FTO基因rs9939609位点多态性与肥胖的相关性。比较正常体重组和超重+肥胖组FTOrs9939609等位基因及基因频率：正常体重组（157例）中FTOrs993906位点AA+AT基因型32例，占20.38%(其中AA基因型1例，AT基因型31例)；TT基因型125例，占79.62%；A等位基因频率为10.51%，T等位基因频率为89.49%。超重+肥胖组（164例）中FTOrs993906位点AA+AT基因型50例，占30.49%（其中AA基因型4例，AT基因型46例）；TT基因型114例，占69.51%；A等位基因频率为16.46%，T等位基因频率为83.54%。2检验结果显示，FTOrs9939609位点AA+AT基因型和A等位基因频率在超重+肥胖组均高于正常体重组，且差异具有显著性（P=0.038,0.028<0.05），提示FTO基因rs9939609位点多态性可能与超重和肥胖的发生有关。以TT基因型为参照进行风险度评价，计算其OR值和95%可信区间，结果发现，AA+AT基因型发生超重和肥胖的风险高达1.713倍（95%CI：1.028-2.8560）；与未携带A风险等位基因个体相比，携带A风险等位基因个体发生超重和肥胖的风险高达1.678倍（95%CI：1.055-2.669），见表5。表5按BMI分组后各组FTOrs9939609基因型和等位基因分布情况例数基因型（%）等位基因频率(%)（N）AA+ATTTAT正常体1571+31（20.38）125（79.62）33（10.51）281（89.49）重组超重+肥1644+46（30.49）114（69.51）54（16.46）274（83.54）胖组4.3074.8542OR=1.713（1.028-2.856）OR=1.678（1.055-2.669）P值0.0380.0283.2.2按照血糖分组，不同组间FTOrs9939609基因型及等位基因频率比较按照前文所述标准对所有受试者进行血糖分组，并探讨FTOrs9939609基因多态性与血糖异常的相关性。比较异常组和正常组FTOrs9939609位点基因型及等位基因频率，结果显示：异常组（194例）中FTOrs993906位点AA+AT基因型47例，占24.22%(其9 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究中AA基因型2例，AT基因型45例)；TT基因型147例，占75.78%；A等位基因频率为12.63%，T等位基因频率为87.37%。正常组（127例）中FTOrs993906位点AA+AT基因型35例，占27.56%（其中AA基因型3例，AT基因型32例）；TT基因型92例，占72.44%；A等位基因频率为14.96%，T等位基因频率为85.04%。2检验结果显示，血糖异常组和正常组之间FTOrs9939609位点AA+AT、TT基因型及A等位基因频率分布均无显著性差异(2=0.448,0.712；P=0.503,0.399>0.05)，见表6。表6两组FTOrs9939609基因型和等位基因分布情况例数基因型（%）等位基因频率(%)（N）AA+ATTTAT异常组1942+45（24.22）147(75.78)49（12.63）339（87.37）正常组1273+32（27.56）92(72.44)38（14.96）216（85.04）合计3215+77（25.55）239(74.45)87（13.55）555（86.45）20.4480.712P值0.5030.399进行性别分层后，不论是男性还是女性，血糖异常组和正常组之间FTOrs9939609位点AA+AT、TT基因型仍无显著性差异（2=0.443，1.969；P=0.506，0.161>0.05），A等位基因频率分布亦无显著性差异（2=0.079，1.764；P=0.778，0.184>0.05），见表7。表7按性别分层后，两组FTOrs9939609基因型和等位基因分布情况男性女性基因型等位基因基因型等位基因AA+ATTTATAA+ATTTAT异常组1+2162231451+248526194正常组2+94113911+23512512520.4430.0791.9691.764P值0.5060.7780.1610.1843.2.3异常组、正常组FTOrs9939609不同基因型与临床代谢参数关系分析分别比较血糖异常组和正常组FTOrs9939609不同基因型与一些临床代谢参数之间的关系，结果见表8。10 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究在血糖异常组，FTO基因rs9939609位点AA+AT基因型人群的BMI和瘦素水平均高于TT基因型人群，差异具有显著性（P=0.038，0.047<0.05），如图2和图3。校正性别、年龄相关因素后，显著性依然存在（P值分别为0.022和0.032）。除BMI和瘦素之外，其余指标（性别，年龄，血压，胰岛素等）差异均无统计学意义（P>0.05）。在血糖正常组，FTO基因rs9939609位点AA+AT基因型与TT基因型人群相比，各项临床指标均无显著性差异（P>0.05）。图2异常组FTOrs9939609不同基因型BMI比较图3异常组FTOrs9939609不同基因型瘦素比较11 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究表8两组FTOrs9939609不同基因型和临床代谢参数的关系（x±s）异常组正常组AA+ATTTPAdjustPAA+ATTTP性别（男/女）47（22/25）147（62/85）0.61435（11/24）92（41/51）0.227年龄（y）63.22±2.5963.78±3.420.31262.80±2.7163.12±3.060.589BMI(kg/m2)24.93±3.0524.03±2.570.038*0.022*a24.41±3.1123.75±3.060.281体脂率（%）30.11±6.8329.00±7.960.40230.35±6.0528.01±7.590.105收缩压(mmHg)130.67±15.35128.17±16.570.368130.91±13.39128.42±19.610.490舒张压(mmHg)74.61±9.5774.19±9.820.80174.83±8.9675.47±10.430.748血糖(mmol/L)7.08±1.217.19±1.100.5665.13±0.525.29±0.630.178胰岛素(pmol/L)39.26±15.2936.59±15.960.33738.12±16.7538.03±16.550.979HOMA-IR1.78±0.771.69±0.810.5541.25±0.551.27±0.540.854瘦素（ng/ml）9.21±7.096.75±6.720.047*0.032*a6.65±5477.01±7.020.788*与TT基因型相比，P<0.05。a：经年龄、性别校正。12 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究3.3FTOrs9939609基因多态性和体力活动对血糖的共同作用3.3.1同一基因型，不同体力活动水平与血糖的相关性比较分别对FTOrs9939609位点AA+AT基因型和TT基因型的不同体力活动水平受试者进行血糖值的比较。结果显示，在AA+AT基因型人群中，各组体力活动水平对应的血糖数值分别为：6.84±1.50，6.22±1.10，6.04±1.58，5.81±1.04。随着体力活动水平的不断升高，受试者血糖水平逐渐降低，其中体力活动P51-75级和P76-100级与体力活动水平最低的P1-25级相比，差异具有显著性（P<0.05）。但是，在TT基因型人群中，各级体力活动水平对应的血糖数值分别为：6.45±1.61，6.44±1.29，6.47±1.12，6.39±1.28。随着体力活动水平的不断升高，受试者血糖水平变化不大，只有轻微的降低趋势，未见显著性差异（P>0.05），见图4。图4同一基因型，不同体力活动水平血糖比较3.3.2同一体力活动水平，不同基因型与血糖的相关性比较分别对同一体力活动水平，FTOrs9939609位点AA+AT基因型和TT基因型的受试者进行血糖值的比较。结果显示，在体力活动为P1-25和P26-50两个等级对应水平时，AA+AT基因型人群与TT基因型人群相比，血糖无显著性差异（P>0.05），但是当体力活动达到P51-75和P76-100等级对应的水平时，AA+AT基因型人群与TT基因型人群相比，血糖具有显著性差异（P<0.05），见图5。13 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究图5同一体力活动水平，不同基因型血糖比较4分析与讨论4.1FTO基因特征与功能FTO基因是唯一得到广泛验证的肥胖相关基因，在并趾突变鼠的缺失基因中首次被克隆出来[35]。Frayling等[11]利用全基因组关联研究（GenomeWideAssociationStudies，GWAS）技术，对来自英国的38759名成人和儿童受试者进行基因突变与Ⅱ型糖尿病相关研究时发现，位于FTO基因第一内含子序列中的rs9939609位点单核苷酸突变与体重增加和Ⅱ型糖尿病的发病风险具有很强的相关性，其显著性P值达到5×10-8，由此将该基因命名为肥胖量和肥胖相关基因（fatmassandobesity-associated,FTO）。FTO基因位于人体第16号常染色体（16q12.2）长臂上，全长410.50kb，包含9个外显子和8个内含子，其内含子序列中含有多个SNP位点[11,14,36]。通常情况下，该基因遗传较为稳定，能使DNA发生去甲基化反应[37]，这对于机体维持一些重要的生理功能至关重要。FTO基因在机体不同发育阶段各组织中均广泛表达，尤其是脑组织中具有较高的表达水平，且在下丘脑一些具有控制能量平衡作用的关键部位表达含量最高[38]。研究发现，FTO基因既可以通过提高食物摄取和能量摄入，又可以通过抑制新陈代谢，间接降低能量消耗效率导致肥胖[39]。肥胖与糖尿病的发生发展密切相关，由于体脂的堆积，造成胰岛素抵抗和高胰岛素血症，使得机体相关组织对葡萄糖的吸收和利用减弱，糖耐量减退，最后发展为糖尿病。因此，FTO基因遗传变异在引起肥胖的同时，也会在一定程度上增加机体罹患Ⅱ型糖尿病的风险，这一点已经被许多研究证实。4.2长期有氧运动老年人FTOrs9939609基因型和等位基因频率分布近些年来，随着分子生物学实验技术不断完善和遗传基因流行病学方法的迅速发展，关于基因SNP的研究逐渐成为热点，国内外对FTOrs9939609基因型和等位基因频率分布均有广泛研究。FTO基因rs9939609位点有A和T两个等位基因，其中T等位基因是常见基因。由A和T等位基因编码可以产生3个表14 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究型：AA(突变型纯合子)、AT(杂合子)和TT（正常型纯合子）。从Hapmap数据库中查找的关于FTO基因rs9939609数据显示，等位基因A的基因频率在不同种族人群中存在显著差异，汉族/亚洲人群约为0.122，日本/亚洲人群约为0.167，欧洲人群约为0.450，非洲人群约为0.517。Andreasen等[13]对丹麦人群进行FTOrs9939609基因型检测时发现，在总共8717例大样本量受试者中，共有TT型2886例(33.11%)，AT型4298例（49.31%），AA型1533例（17.58%），A等位基因频率为42.37%，T等位基因频率为57.63%。万茜茜等[17]对我国重庆地区平均年龄60岁以上的老年人进行FTOrs9939609位点基因型检测，在患有Ⅱ型糖尿病(167人)和正常对照(263人)人群中共检测出TT型331例(76.98%)，AT型92例(21.40%)，AA型7例(1.62%)，A等位基因频率为12.33%，T等位基因频率为87.67%。Chang等[22]对我国台湾地区成人进行肥胖与FTOrs9939609位点关系研究中，对638位肥胖患者和1610位正常对照者进行基因型检测，结果显示，TT型1696例(75.44%)，AT型514例(22.86%)，AA型38例(1.62%)，A等位基因频率为13.12%，T等位基因频率为86.88%。本研究采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）技术，对上海地区323例长期有氧运动老年人进行FTOrs9939609位点成功分型，剔除部分信息缺失受试者2例后，检测到正常纯合子TT型239例(74.45%)，突变杂合子AT型77例(23.99%)，突变纯合子AA型5例(1.56%)，A等位基因频率为13.55%，T等位基因频率为86.45%。该结果与Hapmap数据库中中国汉族人群和国内等人的相关研究基本一致，表明长期有氧运动老年人FTOrs9939609位点基因型分布特点和普通汉族人群相仿，在同一种族内，无地区差异。但和欧洲等人群差异较大，也再次说明FTOrs9939609位点基因分布具有一定的种族特异性。4.3FTOrs9939609基因多态性与血糖异常的相关性及可能机制肥胖是血糖异常发生的重要风险因素。前文已述，肥胖相关基因FTO基因遗传变异在引起肥胖的同时，也会在一定程度上增加机体罹患糖尿病的风险。但是，由于环境因素、遗传背景和种族人群等不同，FTO基因多态性对糖尿病的影响也有差异。Frayling等[11]首次发现FTO基因rs9939609位点多态性与肥胖和糖尿病的发病风险具有很强的相关性，但是在调整BMI以后，关联性消失，提示FTO基因可以通过BMI作用影响肥胖，进而导致糖尿病的发生。在随后的研究中，HertelJK等[12]在挪威人群中，Andreasen等[13]在丹麦人群中，均发现FTOrs9939609多态性通过BMI作用影响糖尿病。还有研究发现，FTO基因多态性与糖尿病相关代谢指标相关，如体重、皮下脂肪、瘦素、胰岛素敏感性等[13-15]。纵观国外这些研究，可以发现在欧美等人群，FTOrs9939609多态性与肥胖和糖尿病的关联研究结果已经明确，普遍支持FTOrs9939609多态性通过BMI作用影响肥胖和糖尿病的发生。但在国内乃至亚洲地区不同人群的研究结果却有所出入。一些研究报道支持欧美等人群研究结论，认为FTOrs9939609多态性与糖尿病具有相关性。Li等[18]对武汉地区305名糖调节受损（糖尿病前期）和877名糖尿病病人做的研究发现含有A等位基因个体糖调节受损和糖尿病风险值分别提高1.28和1.305倍，且不受年龄、性别和BMI的影响。LiH等人[20]在一项样本量为96551个东南亚人群的Meta分析中也指出，与未携带FTOrs9939609A风险等位基因个体相比，携带A风险等位基因者超重和肥胖风险分别增加1.13倍（P=1×10-11）和1.25倍（P=9×10-19），糖尿病风险增加1.15倍（P=5.5×10-8），15 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究并分析得出FTOrs9939609突变增加糖尿病患病风险并不是通过BMI间接作用引起，而是该位点本身直接与糖尿病的发生相关。许玉洋等[40]研究发现FTO基因rs9939609多态性通过调节BMI参与汉族人群糖尿病的发病。此外，糖尿病患者中携带A风险等位基因个体BMI和舒张压增高，并认为对舒张压的影响作用是通过BMI介导所致。相反，也有一些研究持否定观点，认为FTOrs9939609多态性与糖尿病无相关性。Chang等[22]对中国台湾地区759名糖尿病病人（60.03±11.85岁）和784名正常人群（63.37±14.0）进行了FTOrs9939609基因多态性的研究后发现FTOrs9939609SNP与我国台湾地区人群肥胖和BMI有很强的相关性，但与糖尿病无相关性。Omori等[24]对日本成年人，Li等[25]对北京和上海地区的汉族中老年女性人群（50-70岁）以及Al-SinaniS等[26]对西亚阿曼的阿拉伯人的研究中，均未发现FTO基因突变与糖尿病有相关性。在与rs9939609完全连锁的其他位点，也有研究发现FTO基因与糖尿病无相关性。刘洪军等[41]对鲁南地区汉族人群的研究发现，FTOrs9940128不是鲁南地区汉族人群糖尿病的易感基因，但其基因型变异可能与糖尿病患者的肥胖和低密度脂蛋白升高有关。之所以在亚洲人群的研究中出现不一致的结论，可能与受试者遗传背景以及纳入时混杂因素较多有关。本研究中，我们选取研遗传背景一致、年龄构成单一且运动锻炼水平相当的60-69岁老年人为研究对象。由于FTO基因是肥胖易感基因，我们首先按照BMI对所有受试者进行分组，结果表明FTOrs9939609位点AA+AT基因型（30.49%vs20.38%）和A等位基因频率（16.46%vs10.51%）在超重+肥胖组均高于正常体重组，且差异具有显著性（P=0.038，0.028<0.05）。以TT基因型为参照对比发现，与未携带A风险等位基因个体相比，携带A风险等位基因个体发生超重和肥胖的风险高达1.678倍（95%CI：1.055-2.669），提示FTO基因rs9939609位点多态性可能与长期有氧运动老年人超重和肥胖的发生有关。。紧接着，我们以受试者血糖状况对其进行分组，分析了FTO基因rs9939609与血糖异常的相关性。结果显示FTOrs9939609位点AA+AT基因型（24.22%vs27.56%）和A等位基因频率（12.63%vs14.96%）在血糖异常组和血糖正常组之间差异不具有显著性（P=0.503，0.399>0.05）。即便经过性别分层后，依旧无显著性差异，这与前文Chang、Omori、Li、Al-SinaniS等人研究结果一致，但并不能就此说明FTOrs9939609多态性与血糖异常无关。糖代谢异常不仅受到遗传因素影响，更受到不良生活习惯和环境因素影响。我们认为出现本研究结果的原因一方面是由于本研究的样本量相对较小，对于本身数量就比较少的突变基因型携带者更加难以纳入，另一方面也和入选受试者自身特点有关，由于长期从事有氧运动锻炼，本研究异常组受试者平均BMI为24.54±3.07kg/m2，非常接近于正常组（24.25±3.99kg/m2），且胰岛素抵抗水平不明显（平均HOMA-IR为1.72±0.80），相对较低的BMI减弱了FTO基因多态性对血糖异常的影响。但是，进一步研究FTOrs9939609位点多态性与临床代谢参数的关系后发现，在血糖异常组，携带A风险等位基因个体比未携带者有更高的BMI和瘦素水平，且差异达到显著水准（P<0.05），但未发现与空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR之间的相关性，与其他亚洲人群[22,42]的研究结果一致，说明FTOrs9939609基因多态性可能与长期有氧运动的血糖异常老年人BMI和瘦素升高有关。研究发现，FTO多态性除了通过升高BMI使Ⅱ型糖尿病风险增加，还可以通过影响TNF-α以及核因子kB的表达量导致空腹血糖的升高，最终导致Ⅱ型糖尿病的发生[43]。但是在本研究中，空腹血糖并没有表现出基因型间的差异，推测原因，可能是因16 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究为运动对血糖具有一定改善，这种积极作用在某种程度上补偿了FTOrs9939609位点A等位基因突变对血糖的潜在危害作用，从而使得本研究中不同基因型人群血糖水平无显著性差异。换言之，长期有氧运动锻炼可以削弱FTO基因rs9939609位点风险等位基因对老年人血糖异常的影响，肯定了运动对老年人血糖控制具有积极作用。FTO基因影响BMI的机制目前还不清楚。有研究发现[44]，携带FTOrs9939609位点A等位基因个体FTO蛋白表达明显高于未携带者。而FTO蛋白是一类脱氧核糖核苷酸去甲基化酶，能使DNA发生去甲基化反应[37]，去甲基化的结果就是诱导FTO基因重新活化和表达，可作为蛋白质转录辅助因子参与肥胖和胰岛素敏感性的调节[45-46]。此外，还有研究发现FTO基因可以通过抑制新陈代谢，提高食物摄取，间接降低能量消耗效率导致机体BMI增加[47]。作为一种神经内分泌激素，瘦素可以提供信号传导，通过抑制下丘脑内的促食欲肽，促进抗食欲肽来减少食欲和摄食量[48]，降低能量摄取，并增加能量代谢来减少体脂积累从而减轻体重，降低因肥胖引起的糖代谢异常风险。研究表明，瘦素水平与BMI和肥胖程度呈正相关[49]。Andreasen等[11]和Labayen等[50]研究均发现，FTOrs9939609位点A风险等位基因携带者血浆瘦素明显高于未携带者，与本研究结果一致。虽然从基因型频率比较上，我们的研究还不能证实FTO基因rs9939609多态性与长期有氧运动老年人血糖异常有直接关系，但是我们认为FTO基因rs9939609多态性可以通过增加BMI、瘦素等肥胖的表型，导致糖代谢紊乱，从而间接地影响血糖异常。4.4FTOrs9939609基因多态性和体力活动对血糖的共同作用人类基因组都是在原始自然环境中经大量的身体活动和能量消耗这种自然选择手段而不断筛选保留下来的。从自然户外活动陡然地转变成久坐不动常在室内的现代生活方式，正是许多慢性疾病的起源。换言之，现代社会中大部分的健康危机是因为当下人们的日常身体活动模式极大地不同于我们基因能适应的以前的活动模式。早有国外学者指出，不管是日常生活工作的体力活动还是定量的体育运动锻炼都能有效减少慢性疾病的发病率及其全因死亡率[6]。因此，增加日常体力活动水平至高水平对于改善肥胖和糖代谢异常等慢性疾病具有重要作用[7]，可以降低血糖，并缓解胰岛素抵抗。然而，研究表明，虽然增加体力活动对改善糖尿病相关表型有积极作用，但是受基因因素影响，不同个体之间改善作用差别较大[27]。目前关于体力活动和基因多态对疾病影响的研究还很少，为此，我们进行了FTO基因rs9939609多态性和体力活动对血糖的共同作用探究。本研究受试对象为上海地区长期规律有氧运动老年人，受城市发展观念影响，更热衷于通过运动促进健康，体力活动水平普遍较高。如果按照IPAQ推荐体力活动分组标准（即低体力活动水平：PA<600MET-min/w；中体力活动水平：600MET-min/w≤PA<3000MET-min/w；高体力活动水平：PA≧3000MET-min/w）来分组，所有受试者基本上都处于高体力活动水平。为更好地区分不同受试者体力活动水平，达到研究目的，本研究采取四分位数法，将所有受试者体力活动水平进行了分级：P1-25：PA≤4176MET-min/w；P26-50：41769006MET-min/w。研究结果显示，不同基因型个体之间血糖改善情况随着体力活动水平升高出现差异：AA+AT基因型人群血糖水平逐渐降低，当体力活动达到6153MET-min/w以上水平时，与17 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究体力活动低于4176MET-min/w人群相比，差异具有显著性（P<0.05）；而TT基因型人群血糖水平变化不大，只有轻微的降低趋势。这说明，不同FTOrs9939609位点基因型人群通过体力活动来改善血糖的敏感性不同，与TT基因型人群相比，AA+AT基因型人群对通过体力活动改善血糖作用更敏感，更适合通过增强体力活动来降低血糖异常风险等疾病的发生。进一步的比较发现，只有当体力活动达到6153MET-min/w及以上水平时，AA+AT基因型人群与TT基因型人群相比，血糖差异才具有显著性（P<0.05），说明与TT基因型人群相比，AA+AT基因型人群更适合通过相对较高的体力活动量（PA>6153MET-min/w）来改善血糖。目前关于FTO基因rs9939609多态性和体力活动对血糖共同作用的研究还非常少。FTO基因多态性和体力活动对肥胖和糖尿病指标可能产生共同作用，即体力活动对FTO不同基因型个体会产生不同的改善效果[51]。与本研究结果一致，国内学者李效凯[28]研究也证实了FTO基因rs9939609多态性和体力活动可以对血糖变化产生共同效应，并发现体力活动对FTO不同基因型个体改善血糖具有一致的健康效应，携带A风险等位基因者更受益。Sonestedt等[29]研究也发现，在FTO基因rs9939609位点A风险等位基因携带者中，体力活动水平较低者其心血管疾病的风险明显增加。遗憾的是，这两项研究也只是发现了FTO基因rs9939609多态性和体力活动对血糖共同作用的现象，并未对其中的机制做出解释。本研究为横断面调查研究，且不排除受试者在体力活动调查问卷中所报告的主观偏差。因此，从纵向干预研究着手，通过更科学的研究设计，更大样本量的受试参与，更精确的体力活动测定，对FTO基因rs9939609多态性和体力活动对血糖共同作用机制做出合理的解释将是后续研究的一个重要方向。5研究结论不同FTOrs9939609基因型人群通过体力活动来改善血糖的敏感性不同。与TT基因型人群相比，AA+AT基因型人群更适合通过相对较高的体力活动量（PA>6153MET-min/w）来改善血糖。18 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究6中英文缩写对照表缩略语英文名称中文名称FTOfatmassandobesity-associated肥胖量和肥胖相关基因GWASGenome-wideAssociationStudy全基因组关联研究技术SNPsinglenucleotidepolymorphism单核苷酸多态性DNAdeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸BMIBodyMassIndex体重指数FPGFastingPlasmaGlucose空腹血糖INSInsulins空腹胰岛素T2DMType2diabetesesmellitus2型糖尿病HOMA-IRinsulinresistanceindex胰岛素抵抗指数LPLeptin瘦素METmetablicequivalent代谢当量PAphysicalactivity体力活动InternationalPhysicalActivityIPAQ国际体力活动问卷QuestionnairePCRPolymeraseChainReaction聚合酶链式反应Enzyme-LinkedImmunoSorbentELISA酶联免疫吸附测定法Assay19 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究7参考文献[1]吴玉韶.中国老龄事业发展报告(2013)[M].北京:社会科学文献出版社,2013.[2]王天歌.中国成人糖尿病流行与控制现状及危险因素研究[D].上海交通大学,2014.[3]娄培安,陈培培,余加席,等.徐州市居民空腹血糖异常危险因素分析[J].中华疾病控制杂志,2011,03:192-195.[4]胡世红,邹劲涛.我国糖尿病流行病学研究概括[J].医学综述,2000,6(4):147-148.[5]DepartmentofHealthandHumanServices.Healthpeople2010:UnderstandingandImprovingHealth[M].U.S:GovernmentPrintingOffice,2000:24-45.[6]AndersenLB,SchnohrP,SchrollM,etal.All-causemortalityassociatedwithphysicalactivityduringleisuretime,work,sports,andcyclingtowork[J].ArchInternMed,2000,160(11):1621-1628.[7]SuiX,HookerSP,LeeIM,etal.Aprospectivestudyofcardiorespiratoryfitnessandriskoftype2diabetesinwomen[J].DiabetesCare,2008,31(3):550-555.[8]谢慧妍,张永慧,马文军,等.广东省男性居民健康相关行为的城乡不公平性研究[J].中华流行病学杂志,2010,31(12):1363-1367.[9]ShastryBS.SNPallelesinhumandiseaseandevolution[J].JHumGenet,2002,47(11):561-566.[10]BrookesAJ.TheessenceofSNPs[J].Gene,1999,234(2):177-186.[11]FraylingTM,TimpsonNJ,WeedonMN,etal.AcommonvariantintheFTOgeneisassociatedwithbodymassindexandpredisposestochildhoodandadultobesity[J].Science,2007,316(5826):889-894.[12]HertelJK,JohanssonS,RaederH,etal.Geneticanalysisofrecentlyidentifiedtype2diabeteslociin1638unselectedpatientswithtype2diabetesand1858controlparticipantsfromaNorwegianpopulation-basedcohort(theHUNTstudy)[J].Diabetologia,2008,51:971-977.[13]AndreasenCH,Stender-PetersonKL,MogensenMS,etal.LowphysicalactivityaccentuatestheeffectoftheFTOrs9939609polymorphismonbodyfataccumulation[J].Diabetes,2008,57:95-101.[14]TewsD,Fischer-PosovszkyP,WabitschM.FTO---Friendorfoe?[J].HormMetabRes,2010,42(2):75-80.[15]TanS,ScheragA,JanssenOE,etal.Largeeffectsonbodymassindexandinsulinresistanceoffatmassandobesityassociatedgene(FTO)variantsinpatientswithpolycysticovarysyndrome(PCOS)[J].BMCMedGenet,2010,11:12.[16]TanJT,DorajooR,SeielstadM,etal.FTOvariantsareassociatedwithobesityintheChineseandMalaypopulationsinSingapore[J].Diabetes,2008,57:2851-2857.[17]万茜茜,周波,范晶,等.脂肪量和肥胖相关因子基因rs9939609多态性与Ⅱ型糖尿病的关系研究[J].第三军医大学学报,2010(10):1091-1094.[18]LiX,SongF,JiangH,etal.Ageneticvariationinthefatmass-andobesity-associatedgeneisassociatedwithobesityandnewlydiagnosedtype2diabetesinaChinesepopulation[J].DiabetesMetabResRev,2010,26(2):128-132.[19]XiaoS,ZengX,QuanL,etal.CorrelationbetweenpolymorphismofFTOgeneandtype2diabetesmellitusinUygurpeoplefromnorthwestChina[J].InternationalJournalofClinicalandExperimentalMedicine,2015,8(6):9744-9750.[20]LiH,KilpelainenTO,LiuC,etal.AssociationofgeneticvariationinFTOwithriskof20 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究obesityandtype2diabeteswithdatafrom96551EastandSouthAsians[J].Diabetologia,2012,55(4):981-995.[21]YajnikCS,JanipalliCS,BhaskarS,etal.FTOgenevariantsarestronglyassociatedwithtype2diabetesinSouthAsianIndians[J].Diabetologia,2009,52(2):247-252.[22]ChangYC,LiuPH,LeeWJ,etal.Commonvariationinthefatmassandobesity-associated(FTO)geneconfersriskofobesityandmodulatesBMIinChinesepopulation[J].Diabetes,2008,57(8):2245-2252.[23]曹凌峰,罗飞宏,支涤静,等.FTO基因SNPrs9939609,rs1421085多态性与儿童青少年肥胖及其代谢指标的相关性研究[J].中国循证儿科杂志,2010(01):46-50.[24]OmoriS,TanakaY,TakahashiA,etal.AssociationofCDKAL1,IGF2BP2,CDKN2A/B,HHEX,SLC30A8,andKCNJ11withsusceptibilitytotype2diabetesinaJapanesepopulation[J].Diabetes,2008,57(3):791-795.[25]LiH,WuY,LoosRJ,etal.Variantsinthefatmassandobesity-associated(FTO)genearenotassociatedwithobesityinaChineseHanpopulation[J].Diabetes,2008,57(1):264-268.[26]Al-SinaniS,WoodhouseN,Al-MamariA,etal.Associationofgenevariantswithsusceptibilitytotype2diabetesamongOmanis[J].WorldJDiabetes,2015,6(2):358-66.[27]BouchardC,RankinenT.Individualdifferencesinresponsetoregularphysicalactivity[J].MedSciSportsExerc,2001(33):446-451.[28]李效凯,李世昌,黄涛,等.有氧运动、饮食干预对FTOrs9939609不同基因型超重和肥胖男大学生体成分、血糖等指标的影响[J].上海体育学院学报,2014,06:94-99.[29]SonestedtE,GullbergB,EricsonU,etal.Associationbetweenfatintake,physicalactivityandmortalitydependingongeneticvariationinFTO[J].IntJObes(Lond),2011,35(8):1041-1049.[30]中华医学会糖尿病学分会.中国Ⅱ型糖尿病防治指南（2013年版）[M].北京:北京大学医学出版社,2014:10.[31]贾玉俭,许良智,康德英,等.国际体力活动问卷（自填式长卷）中文版在成都市女性人群中信度与效度的研究[J].中华流行病学杂志,2008,29(11):1078-1082.[32]MacfarlaneD,ChanA,CerinE.ExaminingthevalidityandreliabilityoftheChineseversionoftheInternationalPhysicalActivityQuestionnaire,longform(IPAQ-LC)[J].PublicHealthNutr,2011,14(3):443-450.[33]梁崎,王于领,林凤巧,等.七天体力活动回顾问卷中文版信度与效度研究[J].中国康复医学杂志,2010,25(11):1078-1081.[34]中华人民共和国卫生部疾病控制司.中国成人超重和肥胖症预防控制指南(2003年版)[M].人民卫生出版社,2006:4.[35]PetersT,AusmeierK,RutherU.CloningofFatso(Fto),anovelgenedeletedbytheFusedtoes(Ft)mousemutation[J].MammGenome,1999,10(10):983-986.[36]LoosRJ,BouchardC.FTO:thefirstgenecontributingtocommonformsofhumanobesity[J].ObesRev,2008,9(3):246-250.[37]LarderR,CheungMK,TungYC,etal.WheretogowithFTO?[J].TrendsEndocrinolMetab,2011,22(2):53-59.[38]GerkenT,GirardCA,TungYC,etal.Theobesity-associatedFTOgeneencodesa2-oxoglutarate-dependentnucleicaciddemethylase[J].Science,2007,318(5855):1469-1472.[39]卢坤,文秀英,占明.肥胖相关基因FTO的作用及其分子机制[J].中华高血压杂志,2010,18(6):518-521.[40]许玉洋.FTO基因单核苷酸多态性与中国汉族儿童/青少年肥胖的关联性研究[D].浙江21 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究大学,2012.[41]刘洪军.鲁南地区汉族人群FTO基因多态性与2型糖尿病的相关性研究[D].山东大学,2013.[42]HorikoshiM,HaraK,ItoC,etal.VariationsintheHHEXgeneareassociatedwithincreasedriskoftype2diabetesintheJapanesepopulation[J].Diabetologia,2007,50(12):2461-2466.[43]SamarasK,BotelhoNK,ChisholmDJ,etal.SubcutaneousandvisceraladiposetissueFTOgeneexpressionandadiposity,insulinaction,glucosemetabolism,andinflammatoryadipokinesintype2diabetesmellitusandinhealth[J].ObesSurg,2010,20(1):108-13.[44]BerulavaT,HorsthemkeB.Theobesity-associatedSNPsinintron1oftheFTOgeneaffectprimarytranscriptlevels[J].EurJHumGenet,2010,18(9):1054-1056.[45]Sanchez-PulidoL,Andrade-NavarroMA.TheFTO(fatmassandobesityassociated)genecodesforanovelmemberofthenon-hemedioxygenasesuperfamily[J].BMCBiochem,2007,8:23.[46]WuQ,SaundersRA,Szkudlarek-MikhoM,etal.Theobesity-associatedFTOgeneisatranscriptionalcoactivator[J].BiochemBiophysResCommun,2010,401(3):390-395.[47]ScottLJ,MohlkeKL,BonnycastleLL,etal.Agenome-wideassociationstudyoftype2diabetesinFinnsdetectsmultiplesusceptibilityvariants[J].Science2007,316(5829):134-1345.[48]张云波,那晓琳.食欲调节机制的研究进展[J].国外医学:卫生学分册,2008,35(2):97-100.[49]ConsidineRV,SinhaMK,HeimanML,etal.Surumimmunoreative-leptinconcentrationsinnormalweightandobesehumans[J].NewEnglJMed,1996,334(5):292-295.[50]LabayenI,RuizJR,OmegaFB,etal.AssociationbetweentheFTOrs9939609polymorphismandleptininEuropeanadolescents:apossiblelinkwithenergybalancecontrol.TheHELENAstudy[J].IntJObes(Lond),2011,35:66-71.[51]KilpelainenTO,QiL,BrageS,etal.PhysicalactivityattenuatestheinfluenceofFTOvariantsonobesityrisk:ameta-analysisof218166adultsand19268children[J].PLoSMed,2011,8(11):e1001116.22 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究文献综述FTO基因单核苷酸多态性与糖尿病及其与运动的关系近年来，伴随着经济快速发展和生活水平不断改善，现代人们的饮食和生活都发生了巨大变化。“管不住嘴”的“三高”饮食，“迈不开腿”的以车代步，使得肥胖和糖尿病等发病率急剧飙升且呈现年龄依赖性，这其中以Ⅱ型糖尿病为主的慢性病及其并发症已经成为严重危害人类健康特别是中老年人健康的全球性公共卫生问题，越来越多的受到人们的重视。生活方式和环境因素的改变固然促进了糖尿病的发生和发展，而遗传因素在决定个体对糖尿病的易感性方面同样起到十分关键的作用。随着GWAS技术和SNP筛查技术在疾病与易感基因领域的广泛运用，与糖尿病相关的遗传基因也逐步被发现，其中FTO基因序列第一内含子区域上多个位点出现的单核苷酸突变被证实与肥胖和糖尿病风险相关[1-7]。而运动作为防治糖尿病的非药物疗法之一，因其经济有效、简单易实施等优势而逐步被人认可[8]。研究表明，有氧运动可以影响个体胰岛素敏感性，降低胰岛素抵抗，对控制血糖和降低糖尿病风险、减轻肥胖和防治糖尿病并发症有积极的影响[9-11]。本文综述FTO基因突变与肥胖和糖尿病的研究进展，并分析FTO基因单核苷酸多态性与运动对糖尿病的共同影响，为运动人群从基因遗传学角度选取适合自身的预防糖尿病运动方案提供理论指导。1糖尿病概述糖尿病(DM，DiabetesMellitus)是一种由遗传和环境等多种因素共同作用引起的内分泌代谢紊乱性疾病。胰岛细胞合成受限，或者胰岛素利用率降低，抑或胰岛素分泌功能减退，均可造成糖代谢紊乱，葡萄糖耐量受损，同时引发高血糖。糖尿病患者的主要症状为“三多一少”，有时还伴有酮症酸中毒或者肥胖等。现实生活中，Ⅱ型糖尿病发病率最高，约占糖尿病发病人数的90%左右，由于发病人群多为成年人，故Ⅱ型糖尿病又常被称为成年发病型糖尿病或非胰岛素依赖型糖尿病。有研究预测，到2030年全世界Ⅱ型糖尿病患病率将从6.4%增加至8%左右[12]。这主要是因为超重、肥胖、缺乏体力活动率的增长，及日益严峻的人口老龄化所致[13]。在我国，糖尿病形势更是不容乐观。当前我国约有1.139亿成人患有糖尿病，患病人数位居世界首位[14]。目前，继心脑血管疾病、肿瘤之后，糖尿病已经成为威胁人类健康第三位的慢性非传染性疾病[15]。目前，关于糖尿病的发病机制尚未明确，其中肥胖作为一种危险因素，与糖尿病的发病密切相关，是糖尿病未来风险的主要预测因子。肥胖者体内脂肪的过度堆积（尤其是腹部脂肪），游离脂肪酸升高会使得葡萄糖转运机制发生功能障碍，继而发生胰岛素抵抗和高胰岛素血症。胰岛素抵抗作为糖尿病的重要发病基础，肥胖患者胰岛B细胞一旦不能代偿胰岛素抵抗时，即出现高血糖，并发展成为糖尿病。因此，通过控制饮食和运动等减脂手段维持机体正常体重对降低糖尿病患病风险和维持机体健康至关重要[16]。2糖尿病前期糖尿病前期又称为糖调节受损（ImpairedGlucoseRegulation，IGR），为正常人和糖尿病的中间状态，此时血糖水平介于正常和糖尿病血糖之间，被认为是糖尿病的必经阶段，是糖尿病的预警信号，一般无明显症状，不容易被发现，故23 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究高危人群需要注意时常监测血糖。处于此阶段的人群血糖值虽然未达到糖尿病诊断标准，但已经明显高于正常值，故将其定义为糖尿病前期(pre-diabetes)。糖尿病前期时，糖调节已受损，根据空腹和负荷后血糖值，又可分为两种血糖状态——空腹血糖受损（ImpairedFastingGlucose，IFG）和葡萄糖耐量减退（ImpairedGlucoseTolerance，IGT）。前者是指空腹血糖在6.1-7.0mmol/L之间，虽不足以诊断为糖尿病，但其糖代谢已经出现问题，反映了基础状态下的血糖调节功能受损。后者是指空腹血糖正常，但餐后血糖水平介于正常人与糖尿病患者之间的特殊代谢状态，反映了糖负荷后的血糖调节功能受损，其诊断标准为在口服75克葡萄糖的糖耐量试验(OGTT)中，服糖2小时后血糖在7.8-11.0mmol/L之间。目前一般认为IGT是糖尿病的前期表现，在Ⅱ型糖尿病的发展过程中表现得更为明显。据2014年发表在《JAMA》上的一篇关于我国成人糖尿病流行病学调查研究显示，糖尿病的患病率为11.6%，糖尿病前期患病率高达50.1%[14]。糖尿病前期是糖代谢紊乱的早期阶段，也是由糖耐量正常向糖尿病发展的中间过渡阶段。糖尿病是一种终身性疾病，一旦发病只能控制病情，很难逆转。但是，糖尿病前期却是一个可逆的过程，适当的干预措施，可以延缓或阻止其转化为糖尿病。研究显示，对该人群进行早期干预可使糖尿病发病危险降低58%[17]，因此针对糖尿病前期的研究对预防糖尿病的发生和进展具有及其重要的意义。研究显示，糖尿病前期患者通过及时、合理的饮食、运动等干预治疗，大部分人可以避免糖尿病的发生，甚至可以使其血糖水平恢复正常。3FTO基因特征与SNP肥胖可以导致代谢障碍、糖尿病、高血压等多种慢性疾病，近几次的国民体质监测数据也提示，我国从儿童少年到老年人，各年龄层肥胖和超重的发生率正在快速上升。因此，从基因水平上讲，与肥胖和糖尿病等相关的FTO基因正在受到越来越多的关注和研究。3.1FTO基因结构与分布特征肥胖量与肥胖相关基因(fatmassandobesityassociated,FTO)是迄今为止研究证实最强最确定的肥胖易感基因。FTO基因位于人体第16号常染色体（16q12.2）长臂上，全长410.50kb（53737875bp-54155853bp），包含9个外显子和8个内含子，其内含子序列中含有多个SNP位点[18-20]。该基因遗传高度保守，相对稳定。经鉴定，FTO基因编码α-酮戊二酸依赖的核酸脱甲基化酶[21]，与大肠杆菌AlKB酶具有高度同源性，两者隶属于同一家族[22]，能使DNA发生去甲基化反应[23]，可作为蛋白质转录辅助因子参与肥胖和胰岛素敏感性的调节[24-25]。FTO基因在机体不同发育阶段各组织中均广泛表达，尤其是脑组织中具有较高的表达水平，且在下丘脑一些具有控制能量平衡作用的关键部位表达含量最高[21]。Fischer等[26]和Church等[27]分别利用FTO基因敲除和过表达两种突变动物模型观察FTO基因表达对摄食和能量代谢的影响，从正反两个方向验证了FTO基因在能量代谢和体重控制中具有重要作用，抑制该基因表达可以预防肥胖发生。研究发现，FTO基因可以通过抑制新陈代谢，提高食物摄取，间接降低能量消耗效率导致机体发生肥胖[28]。24 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究3.2单核苷酸多态性（SNP）和Hardy-Weinberg平衡简介人类在长期进化过程中，基因组DNA序列在保持稳定的同时也在不断发生变异。当基因变异频率超过1%时，就出现了基因多态性。所谓单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP），就是基因多态性里较为普遍的一种。它是指在染色体基因组水平上，由于单个核苷酸变异而到导致的DNA序列多态性。这种变异更多是由于单个碱基的转换或颠换导致，而非单个碱基的插入或缺失。SNP通常是二等位基因的变异，是人类目前可遗传的变异中最常见的一种，这种多态性使得不同人对于同一疾病的易感性不同，对药物的敏感性也有差异[29-30]。随着科技进步和医学发展，SNP与疾病关系研究迅猛开展。Hardy-Weinberg平衡，即在一个随机交配的无限大群体中，如果某一位点上基因型无性别差异，而且基因没有发生突变、种群之间不存在个体的迁移或基因交流、没有自然选择，那么该位点上的基因型频率和基因频率将代代保持不变，处于遗传平衡状态。以FTO基因rs9939609位点为例，该位点有等位基因A和等位基因T，假设他们的基因频率分别为a和（1-a），那么在群体中AA、AT、TT基因型频率应分别为a2，2a（1-a）和（1-a）2。它主要用于阐释繁殖对群体基因及基因型频率的影响。实际上，在做基因和疾病的相关性研究时，很多因素都可以影响上述平衡，如基因分型结果与真实基因型之间存在误差、研究样本量较小以及研究对象的选择偏倚（年龄、性别等过于集中）。Hardy-Wenberg平衡与否可间接反映研究的质量问题，因此，在本研究中，通过Hardy-Weinberg平衡可以检验所选的研究对象是否具有代表性。4FTO基因SNP与糖尿病相关性及机制遗传因素在糖尿病的发生和发展过程中扮演了重要角色。最早证实FTO基因多态性与糖尿病相关联的一项研究来自于2007年。Frayling等[5]利用全基因组关联研究（GenomeWideAssociationStudies，GWAS）技术，对来自英国的38759名成人和儿童受试者进行基因突变与肥胖和糖尿病相关研究时发现，位于FTO基因第一内含子序列中的rs9939609位点单核苷酸突变与体重增加和Ⅱ型糖尿病的发病风险具有很强的相关性，其显著性P值达到5×10-8。但是经过BMI调整以后，FTO基因多态性与肥胖或糖尿病不再具有相关性，提示FTO基因突变是通过BMI作用影响肥胖，进而导致糖尿病的发生。自此，FTO基因与糖尿病的关系作为研究热点，在后续不同的人群中先后得到展开，而rs9939609位点也成为了研究最为深入的FTO基因多态性位点。与Frayling研究结果相同，Andreasen等[7]在丹麦人群中，HertelJK等[4]在挪威人群中，均发现FTOrs9939609多态性通过BMI作用影响糖尿病。还有研究发现，FTO基因多态性与糖尿病相关代谢指标相关，如体重、皮下脂肪、瘦素、胰岛素敏感性等[7,20,31]。纵观国外这些研究，可以发现在欧美等人群，FTOrs9939609多态性与肥胖和糖尿病的关联研究结果已经明确，普遍支持FTOrs9939609多态性通过BMI作用影响肥胖和糖尿病的发生。但在国内乃至亚洲地区不同人群的研究结果却不尽一致。一些研究报道支持欧美等人群研究结论，认为FTOrs9939609多态性与糖尿病具有相关性，但该位点多态性与糖尿病的代谢紊乱是通过BMI和肥胖的间接作用还是直接相关目前尚无定论。万茜茜等[32]随机选取我国重庆地区167例糖尿病人和263例正常人进行了FTOrs9939609与糖尿病的相关性横断面研究。结果发现A等位基因携带者糖尿病患病风险是非携带者的2.012倍，BMI、腰围、餐后2h血糖等指标也均有显著性提高，说明FTOrs9939609多态性通过影响BMI25 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究而参与糖尿病的发病。Li等[33]对武汉地区305名糖调节受损（糖尿病前期）和877名糖尿病病人做的研究发现含有A等位基因个体糖调节受损和糖尿病风险值分别提高1.28和1.305倍，且不受年龄、性别和BMI的影响。XiaoS等进行的横断面调查，研究了FTO基因多态性与中国西北地区维吾尔族人群糖尿病的相关性。他们选取了849名糖尿病患者（51.30±9.84岁）和873名健康成人（50.44±9.94岁）作为研究对象，结果发现FTOrs9939609与该地区人群糖尿病具有很强的独立相关性，并不依赖于BMI[34]。LiH等人[35]在一项样本量为96551个东南亚人群的Meta分析中也指出，与未携带FTOrs9939609A风险等位基因个体相比，携带A风险等位基因者超重和肥胖风险分别增加1.13倍（p=1×10-11）和1.25倍（p=9×10-19），糖尿病风险增加1.15倍（p=5.5×10-8），并分析得出FTOrs9939609突变增加糖尿病患病风险并不是通过BMI间接作用引起，而是该位点本身直接与糖尿病的发生相关。在亚洲其他国家，相同的研究结论在Yajnik等[36]对印度人群和Tan等[6]对新加坡人群的研究中都得到重复验证。相反，也有一些研究持否定观点，认为FTOrs9939609多态性与糖尿病无相关性。Chang等[37]对中国台湾地区759名糖尿病病人（60.03±11.85岁）和784名正常人群（63.37±14.0）进行了FTOrs9939609基因多态性的研究后发现FTOrs9939609SNP与我国台湾地区人群肥胖和BMI有很强的相关性，但与糖尿病无相关性。此外，他们还发现，该地区人群风险等位基因A的基因频率（12.6%）显著低于欧洲人群（45%），但是对BMI带来的影响是相当的，携带A等位基因个体肥胖发生风险显著性增加。他们认为FTO基因突变与糖尿病无相关性的原因一方面与中国人群中A风险等位基因突变率较低有关，另一方面也和入选受试者自身特点有关（在他们的研究中，受试者平均BMI为24.66kg/m2）。国内学者曹凌峰等[38]对上海地区肥胖青少年进行研究，发现FTO基因rs9939609多态性与BMI显著相关，但与肥胖相关的其他代谢指标，如血糖、胰岛素、甘油三酯，总胆固醇、胰岛素抵抗指数等无显著相关性。Omori等[39]对日本成年人，Li等[40]对北京和上海地区的汉族中老年女性人群（50-70岁）以及Al-SinaniS等[41]对西亚阿曼的阿拉伯人的研究中，均未发现FTO基因突变与糖尿病有相关性。上述研究表明，在亚洲人群，FTO基因突变与肥胖和糖尿病之间的关系并不如欧美人群那么明确，究其原因，既可能是由于不同遗传背景人群中存在种群的遗传学差异所致（如亚洲人群BMI和FTOrs9939609A风险等位基因频率普遍低于欧美人群等），也可能与部分关于亚洲人群的研究所涉及的受试者纳入混杂因素较多（年龄构成复杂、运动水平不一等）有关，故需要更多研究背景相对均一的研究来进一步验证FTO基因在中国人群中的影响。关于FTO基因与糖尿病相关性的机制研究，目前也是说法不一。肥胖是糖尿病发生的重要诱因，FTO基因作为肥胖易感基因，与糖尿病有着或多或少的联系。总结已有的一些研究，可以发现FTO基因既可通过作用于BMI影响肥胖，进而参与糖尿病的发生和发展，又可通过多种其他机制对糖尿病产生影响。研究发现，脂肪组织中FTO表达水平可以通过影响TNF-α以及核因子kB的表达量导致空腹血糖的升高，最终导致Ⅱ型糖尿病的发生[42]。动物实验也表明，FTO表达增加可影响细胞脂代谢，通过促进细胞内的脂肪酸合成、抑制细胞内甘油三酯的水解，从而增加细胞内甘油三酯的含量导致脂质堆积；还可通过促进线粒体的融合、抑制线粒体的分裂减少细胞线粒体数量，影响线粒体氧化的能力，同时还增加氧化应激[43]。由此推断FTO基因表达量的差异可通过改变机体的脂质含量，调节线粒体氧化能力及增加氧化应激等作用与Ⅱ型糖尿病相关联。26 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究5运动与FTO基因SNP对糖尿病影响结合前文所述，FTO基因突变可能会增加糖尿病患病可能性，而运动作为糖尿病治疗的“三驾马车”之一，对降低糖尿病风险效果突出。那么运动与FTO基因SNP对糖尿病是否存在共同影响呢？目前，关于运动与FTO基因SNP对糖尿病影响的研究较少报道，仅有的部分研究结果尚存争议。多数研究表明，运动和FTOSNP对肥胖和糖尿病相关指标能产生共同影响。ZlatohlavekL等[44]对357名捷克超重和肥胖儿童的研究发现，规律性的身体活动和FTO基因rs17817449多态性会对BMI产生显著性影响。Zou等[45]对138名来自上海市某夏令营的10-18岁肥胖青少年进行了四周的运动联合饮食干预，结果发现干预后FTOrs9939609携带A风险等位基因个体TC、LDL-C、HB等下降程度显著高于未携带者。李效凯等人以在校男大学生为研究对象，延长了干预周期，结果发现13周的运动和饮食干预对FTO不同基因型个体肥胖和糖尿病相关指标的影响存在差异[46]。MucM等[47]就550位葡萄牙成人体力活动水平和FTOrs9939609多态性对肥胖的影响展开横断面研究，发现随着体力活动水平的升高，AA型个体体脂率显著性降低，TT型个体BMI显著性升高，说明体力活动和基因型对体成分改变有共同影响。国外学者Kilpelainen等[48]对体力活动是否能降低FTO基因肥胖易感性进行了一项Meta分析，结果表明运动对不同基因型个体产生的效果不同，高体力活动携带A风险等位基因成年人肥胖发生风险降低27%，肯定了体力活动对控制FTO基因突变造成的肥胖和糖尿病风险有积极作用。有研究认为，缺少运动的生活方式会引起机体DNA甲基化修饰改变，DNA甲基化修饰的改变会引起表观遗传修饰的改变，进而引起代谢相关基因表达改变，导致机体代谢紊乱[49-50]。Lewis等[51]研究发现，长期规律有氧运动会降低人体对多种疾病的易感性，原因在于它可以使机体产生一种代谢适应印记。但是也有研究表明，运动和FTOSNP对肥胖和糖尿病相关指标不存在共同作用，即运动可以降低肥胖和糖尿病发生风险，但与基因型无关。Schum[52]和MüllerTD等[53]分别对FTO不同基因型肥胖儿童进行了6个月和一年的运动饮食干预后发现BMI、空腹血糖、HOMA-IR、体脂率等指标显著下降，但是不同基因型之间无显著性差异，说明运动联合饮食干预带来的健康效应与基因SNP无关，不管是否携带风险等位基因，均能够通过运动和控制饮食来降低自身罹患糖尿病的风险。6参考文献[1]HerderC,RatlmlannW,StrassburgerK,etal.VariantsofthePPARG,IGF2BP2,CDKAL1,HHEX,andTCF7L2genesconferriskoftype2diabetesindependentlyofBMIintheGermanKORAstudies[J].HormMetab,2008,40:722-726.[2]LyssenkoV,JonssonA,AlmgrenP,etal.Clinicalriskfactors,DNAvariants,andthedevelopmentoftype2diabetes[J].NEngJMed,2008,359:2220-2232.[3]VanHoekM,DehghanA,WittemanJC,etal.Predictingtype2diabetesbasedonpolymorphismsfromgenome-wideassociationstudies:apopulation-basedstudy[J].Diabetes2008,57:3122-3128.[4]HertelJK,JohanssonS,RaederH,etal.Geneticanalysisofrecentlyidentifiedtype2diabeteslociin1638unselectedpatientswithtype2diabetesand1858control27 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究participantsfromaNorwegianpopulation-basedcohort(theHUNTstudy)[J].Diabetologia,2008,51:971-977.[5]FraylingTM,TimpsonNJ,WeedonMN,etal.AcommonvariantintheFTOgeneisassociatedwithbodymassindexandpredisposestochildhoodandadultobesity[J].Science,2007,316(5826):889-894.[6]TanJT,DorajooR,SeielstadM,etal.FTOvariantsareassociatedwithobesityintheChineseandMalaypopulationsinSingapore[J].Diabetes,2008,57:2851-2857.[7]AndreasenCH,Stender-PetersonKL,MogensenMS,etal.LowphysicalactivityaccentuatestheeffectoftheFTOrs9939609polymorphismonbodyfataccumulation[J].Diabetes2008,57:95-101.[8]PraetS,VanL.ExercisetherapyinType2diabetes[J].ActaDiabetologica,2009,46(4):263-278.[9]O'DonovanG,KearneyEM,NevillAM,etal.Theeffectsof24weeksofmoderate-orhigh-intensityexerciseonsurrogatemeasuresofinsulinsensitivity[J].EurJofApplPhysiol,2005,95:522-528.[10]HordernMD,CoombesJS,CooneyLM,etal.Effectsofexerciseinterventiononmyocardialfunctionintype2diabetes[J].Heart,2009,95(16):1343-1349.[11]邱丽颖,周轩生,李英.有氧运动对中老年Ⅱ型糖尿病患者心功能的影响[J].中国医学理论与实践,2007,17(3):288-289.[12]ShawJE,SicreeRA,ZimmetPZ.Globalestimatesoftheprevalenceofdiabetesfor2010and2030[J].DiabetesResClinPract,2010,87(1):4-14.[13]SturmR.Stemmingtheglobalobesityepidemic:whatcanwelearnfromdataaboutsocialandeconomictrends?[J].PublicHealth,2008,122(8):739-746.[14]LuC,SunW.PrevalenceofdiabetesinChineseadults[J].JAMA,2014,311(2):199-200．[15]YangWY,LuJM,WengJP,etal.PrevalenceofdiabetesamongmenandwomeninChina[J].NEnglJMed,2010,362:1090-1101.[16]HammanRF,WingRR,EdelsteinSL,etal.Effectofweightlosswithlifestyleinterventiononriskofdiabetes[J].DiabetesCare,2006,29(9):2102-7.[17]赵守香，董鹏，顾媛.糖尿病与运动[J].中国慢性病预防与控制,2004,01:46-48.[18]FraylingTM,TimpsonNJ,WeedonMN,etal.AcommonvariantintheFTOgeneisassociatedwithbodymassindexandpredisposestochildhoodandadultobesity[J].Science,2007,316(5826):889-894.[19]LoosRJ,BouchardC.FTO:thefirstgenecontributingtocommonformsofhumanobesity[J].ObesRev,2008,9(3):246-250.[20]TewsD,Fischer-PosovszkyP,WabitschM.FTO---Friendorfoe[J]?HormMetabRes,2010,42(2):75-80.[21]GerkenT,GirardCA,TungYC,etal.Theobesity-associatedFTOgeneencodesa2-oxoglutarate-dependentnucleicaciddemethylase[J].Science,2007,318(5855):1469-1472.[22]OzerA,BruickRK.Non-hemedioxygenases:cellularsensorsandregulatorsjellyrolledintoone?[J]NatChemBiol,2007,3(3):144-153.[23]LarderR,CheungMK,TungYC,etal.WheretogowithFTO[J]?TrendsEndocrinolMetab,2011,22(2):53-59.28 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究[24]Sanchez-PulidoL,Andrade-NavarroMA.TheFTO(fatmassandobesityassociated)genecodesforanovelmemberofthenon-hemedioxygenasesuperfamily[J].BMCBiochem,2007,8:23.[25]WuQ,SaundersRA,Szkudlarek-MikhoM,etal.Theobesity-associatedFTOgeneisatranscriptionalcoactivator[J].BiochemBiophysResCommun,2010,401(3):390-395.[26]FischerJ,KochL,EmmerlingC,etal.InactivationoftheFTOgeneprotectsfromobesity[J].Nature,2009,458(7240):894-898.[27]ChurchC,MoirL,McMurrayF,etal.OverexpressionofFTOleadstoincreasedfoodintakeandresultsinobesity[J].NatGenet,2010,42(12):1086-1092.[28]ScottLJ,MohlkeKL,BonnycastleLL,etal.Agenome-wideassociationstudyoftype2diabetesinFinnsdetectsmultiplesusceptibilityvariants[J].Science2007,316(5829):134-1345.[29]ShastryBS.SNPallelesinhumandiseaseandevolution[J].JHumGenet,2002,47(11):561-566.[30]BrookesAJ.TheessenceofSNPs[J].Gene,1999,234(2):177-186.[31]TanS,ScheragA,JanssenOE,etal.Largeeffectsonbodymassindexandinsulinresistanceoffatmassandobesityassociatedgene(FTO)variantsinpatientswithpolycysticovarysyndrome(PCOS)[J].BMCMedGenet,2010,11:12.[32]万茜茜,周波,范晶,等.脂肪量和肥胖相关因子基因rs9939609多态性与Ⅱ型糖尿病的关系研究[J].第三军医大学学报,2010(10):1091-1094.[33]LiX,SongF,JiangH,etal.Ageneticvariationinthefatmass-andobesity-associatedgeneisassociatedwithobesityandnewlydiagnosedtype2diabetesinaChinesepopulation[J].DiabetesMetabResRev,2010,26(2):128-132.[34]XiaoS,ZengX,QuanL,etal.CorrelationbetweenpolymorphismofFTOgeneandtype2diabetesmellitusinUygurpeoplefromnorthwestChina[J].InternationalJournalofClinicalandExperimentalMedicine,2015,8(6):9744-9750.[35]LiH,KilpelainenTO,LiuC,etal.AssociationofgeneticvariationinFTOwithriskofobesityandtype2diabeteswithdatafrom96551EastandSouthAsians[J].Diabetologia,2012,55(4):981-995.[36]YajnikCS,JanipalliCS,BhaskarS,etal.FTOgenevariantsarestronglyassociatedwithtype2diabetesinSouthAsianIndians[J].Diabetologia,2009,52(2):247-252.[37]ChangYC,LiuPH,LeeWJ,etal.Commonvariationinthefatmassandobesity-associated(FTO)geneconfersriskofobesityandmodulatesBMIinChinesepopulation[J].Diabetes,2008,57(8):2245-2252.[38]曹凌峰,罗飞宏,支涤静,等.FTO基因SNPrs9939609,rs1421085多态性与儿童青少年肥胖及其代谢指标的相关性研究[J].中国循证儿科杂志,2010(01):46-50.[39]OmoriS,TanakaY,TakahashiA,etal.AssociationofCDKAL1,IGF2BP2,CDKN2A/B,HHEX,SLC30A8,andKCNJ11withsusceptibilitytotype2diabetesinaJapanesepopulation[J].Diabetes,2008,57(3):791-795.[40]LiH,WuY,LoosRJ,etal.Variantsinthefatmassandobesity-associated(FTO)genearenotassociatedwithobesityinaChineseHanpopulation[J].Diabetes,2008,57(1):264-268.29 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究[41]Al-SinaniS,WoodhouseN,Al-MamariA,etal.Associationofgenevariantswithsusceptibilitytotype2diabetesamongOmanis[J].WorldJDiabetes,2015,6(2):358-66.[42]SamarasK,BotelhoNK,ChisholmDJ,etal.SubcutaneousandvisceraladiposetissueFTOgeneexpressionandadiposity,insulinaction,glucosemetabolism,andinflammatoryadipokinesintype2diabetesmellitusandinhealth[J].ObesSurg,2010,20(1):108-13.[43]牛丛丛.脂肪和肥胖相关基因（FTO）的转录调控及其功能研究[D].华中农业大学,2012.[44]ZlatohlavekL,VrablikM,MotykovaE,etal.FTOandMC4RgenevariantsdetermineBMIchangesinchildrenafterintensivelifestyleintervention[J].ClinBiochem,2013,46(4-5):313-316.[45]ZouZC,-JMaoL,CaiW,etal.EffectofexercisecombinedwithdietaryinterventiononobesechildrenandadolescentsassociatedwiththeFTOrs9939609polymorphism[J].EurRevMedPharmacolSci,2015,19(23):4569-4575.[46]李效凯,李世昌,黄涛,等.有氧运动、饮食干预对FTOrs9939609不同基因型超重和肥胖男大学生体成分、血糖等指标的影响[J].上海体育学院学报,2014,06:94-99.[47]MucM,PadezC,MancoL.InfluenceofphysicalactivityontheassociationbetweentheFTOvariantrs9939609andadiposityinyoungadults[J].AmJHumBiol,2015,27(5):734-738.[48]KilpelainenTO,QiL,BrageS,etal.PhysicalactivityattenuatestheinfluenceofFTOvariantsonobesityrisk:ameta-analysisof218166adultsand19268children[J].PLoSMed,2011,8(11):e1001116.[49]NielsenR,PedersenTA,HagenbeekD,etal.Genome-wideprofilingofPPARgamma:RXRandRNApolymeraseIIoccupancyrevealstemporalactivationofdistinctmetabolicpathwaysandchangesinRXRdimercompositionduringadipogenesis[J].GenesDev,2008,22(21):2953-2967.[50]LefterovaMI,ZhangY,StegerDJ,etal.PPARgammaandC/EBPfactorsorchestrateadipocytebiologyviaadjacentbindingonagenome-widescale[J].GenesDev,2008,22(21):2941-2952.[51]LewisGD,FarrellL,WoodMJ,etal.Metabolicsignaturesofexerciseinhumanplasma[J].SciTranslMed,2010,2(33):33r-37r.[52]SchumJ,BlumenstockG,WeberK,etal.VariantsoftheFTOGeneinObeseChildrenandTheirImpactonBodyCompositionandMetabolismbeforeandafterLifestyleIntervention[J].ExpClinEndocrinolDiabetes,2012,120(3):128-131.[53]MüllerTD,HinneyA,ScheragA,etal.'Fatmassandobesityassociated'gene(FTO):nosignificantassociationofvariantrs9939609withweightlossinalifestyleinterventionandlipidmetabolismmarkersinGermanobesechildrenandadolescents[J].BMCMedGenet,2008,9:85.30 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究附件1：伦理委员会审批表31 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究附件2：知情同意书知情同意书请您认真阅读以下内容，如果您同意参加本次研究，则在知情同意书的声明中签字。1.本研究单位是：上海体育学院运动科学学院2.本研究的目的：通过比较长时间进行太极、广场舞、快走、易筋经等常见运动项目锻炼人群的健身效果，从而建立运动健身改善老年人体质的生物信息共同评估系统。3.本研究采用志愿者制度，符合纳入标准的自愿参加测试。4.在研究中将免费为志愿者进行常规体格检查（包括血常规、体适能、肠道菌群测试等），并需要志愿者配合填写膳食问卷、体力活动问卷、认知问卷、睡眠质量问卷及健康生活方式问卷。5.在研究过程中我们将遵循志愿者意愿，志愿者有权利在任何时间选择退出测试。但无论何种情况下退出，请务必告诉研究人员。6.在研究期间的所有资料归申办者和研究者所有，申办者和研究者会保护您的隐私，但在有关部门需要时，有使用这些材料的权力。志愿受试者声明：我已详细阅读以上内容，了解了研究中的要求，自愿参加本次研究，并将严格按照该方案的要求，配合研究人员完成本次研究。受试者签名：日期：年月日研究人员签名：日期：年月日32 FTO基因多态性与长期有氧运动老年人血糖异常的相关性研究致谢光阴荏苒，日月如梭，转瞬已是毕业离别之时。三年的研究生生活，有过喜悦激动，也有过失望迷茫，个中滋味谁人解，如人饮水惟自知。在此论文完成之际，我谨向所有关心、帮助我的人们表示最诚挚的感谢与最美好的祝愿。感谢我的导师徐卫东教授。感激徐老师在我研究生期间对于我学习和生活上的关怀和支持，使我能够顺利完成学业！徐老师德高望重，为人谦逊随和，工作认真细致，在做人做事方面给了我很多教诲，您的优秀品质永远值得我学习。感谢我的另一位导师王茹副教授。感谢王老师在课题的设计、实施和论文撰写过程中对我的悉心指导和帮助，能加入您的科研团队，是我莫大的荣幸。您严谨踏实的科研态度、奋斗不息的工作热情，深刻的感染着我，在未来的工作生活中，我一定向您看齐！感谢刘向云副教授对我的悉心教育和指导，并给予我学习相关知识和技能的机会。每一次组会，每一次面谈，我都受益匪浅。没有您的帮助，我不可能走到今天！感谢刘冬梅老师在论文写作过程中给予的指导。感谢运动科学学院全体老师对我的教导和培养。感谢辅导员王慧敏老师和彭海峰老师三年来对我的关怀与照顾。感谢课题组成员牛战斌、魏玉琴、梁小娟。你们的陪伴和鼓励是支持我一路走来的动力和源泉！感谢参与到本课题实验中的博士师兄杨钦，师弟杨亚兵、孙顺利、陈廷，师妹向玖琳、周傥、田倩倩，同学李弯弯、李翠翠和所有帮助过我的人！没有你们的帮助，我不可能顺利完成实验。感谢我的室友薄成志和金佳然，感谢从河师大一直陪伴我走到上体的同学们，谢谢你们对我的关心和支持！感谢我的女朋友和家人，感谢你们在我漫长求学生涯中做出的无私奉献和牺牲。你们是这个世界上最爱我的人，也是我最爱的人，我对你们有道不尽的感谢！路漫漫其修远，吾将上下而求索。最后，请允许我再一次向所有帮助过我的人表达我最真诚的谢意——谢谢！33
