从系统生物学角度探讨细胞因子表达谱研究在v型狼疮性肾炎患者中的作用

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1、从系统生物学角度探讨细胞因子表达谱研究在V型狼疮性肾炎患者中的作用：孙吉平，尹爱萍，杨世峰，严俊飞【摘要】　　目的探讨Th1和Th2细胞因子表达谱研究在V型疮性肾炎(VLN)患者中的作用。方法分离血清，通过抗体芯片技术同时检测4种Th1和5种Th2细胞因子表达谱，并探讨其与临床指标之间的相关性。结果①细胞因子表达谱：在同时检测的9种细胞因子中，VLN患者有4种表达上调，除了IL2属于Th1细胞因子外，其他三种(IL4、IL10和IL13)均属于Th2细胞因子，其中IL10较健康对照升高了10倍以上。②相关性研究：Pearson相关分析显示IL10与

2、SLIEDAI呈正相关、与血红蛋白浓度呈负相关；此外，IL4和IL13均与尿蛋白浓度呈负相关，IL1与血肌苷之间呈正相关。结论VLN患者体内细胞因子表达异常以Th2细胞因子为主，提示抗Th2细胞因子可能在V型狼疮患者中具有一定的治疗作用。【关键词】狼疮性肾炎；细胞因子；免疫　　ABSTRACT:ObjectiveTostudytheeffectsofcytokinesTh1andTh2inClassVlupusnephritis(VLN).MethodsSerumconcentrationofTh1cytokines(IFNγ,IL1,IL2and

3、TNFα)andTh2cytokines(IL4,IL5,IL6,IL10andIL13)ultaneouslyanalyzedusingfastquanthumanTh1/Th2proteinarray,andPearsonanalysiseters.Results①Cytokineprofiling:Amongthe9cytokinesdetectedsimultaneouslybyfastquanthumanTh1/Th2proteinarray,theexpressionoffourcytokinesely,Th1cytokines(IL2)

4、andTh2cytokines(IL4,IL10andIL13);thatofIL10esabovethenormalcontrol.②Pearsoncorrelationanalysis:Thereoglobinconcentration(r=-0.856,P<0.01).TherealTh2cytokinesinVLNpatients,suggestingthatantiTh2therapymayproduceamarkedeffectonVLN.　　KEYMF)或环磷酰胺(CTX)等强免疫抑制剂治疗。同时选择年龄和性别匹配的健康志愿者20

5、例作为正常对照。　　1.2血清细胞因子检测　　清晨抽取空腹静脉血5mL，离心后留取血清，-70℃保存待测。血清细胞因子的检测采用德国an公司提供的抗体芯片，同时定量检测9种细胞因子的表达，其中包括4种Th1细胞因子IL1(白细胞介素1)、IL2(白细胞介素2)、IFNγ(γ干扰素)、TNFα(肿瘤坏死因子α)和5种Th2细胞因子IL4(白细胞介素4)、IL5(白细胞介素5)、IL6(白细胞介素6)、IL10(白细胞介素10)、IL13(白细胞介素13)的表达。每个因子检测设立3个复孔，取平均值。具体操作简述如下：玻片装上孵育室并将玻

6、片/孵育室一起装入玻片夹；70μL封闭液室温封闭15min；常温孵育样品过夜(轻微振荡)；洗涤5次；生物素标记的抗体室温孵育60min(轻微振荡)；洗涤5次；StreptavidinCy5室温孵育45min(轻微振荡)；洗涤5次；DiH2O冲洗玻片并干燥；扫描玻片，进行资料分析。　　1.3其他实验室检查　　所有患者同时进行以下检查：①24h尿蛋白定量：采用双缩脲比色法，正常值＜0.4g/24h；②自身抗体：抗核抗体(ANA)采用间接免疫荧光法，抗双链DNA(dsDNA)采用短膜虫法；③补体C3、C4：采用散射比浊法。　　1.4统计学方法　　结果以均数±标准差表示

7、。组间差异采用Studentst检验，并通过Pearson相关性分析研究细胞因子表达及淋巴细胞亚群与临床指标之间的相关性。以P<0.05为具有统计学差异。　　2结果　　2.1患者的临床实验室的相关检查　　V型LN患者一般临床资料见表1。V型LN患者白细胞、血红蛋白、补体C3和C4均明显低于健康对照组。与健康对照相比，白细胞计数分别为(5.015±1.426)×109/L和(6.271±2.730)×109/L(P<0.05)；血红蛋白分别为(118.3±21.1)g/L和(124.3±6.1)g/L(P<0.05)；补体C3分别为(0.432±

8、0.023