凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题

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  凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间测定的问题【摘要】就目前玻片法凝血时间和Duke氏出血时间测定已淘汰,迄今凝血试验中的凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)测定已有公认的标准化方案,简要介绍此两种时间测定的方法、标本采集、注意事项、临床意义等。【关键词】凝血酶;时间测定;凝血活酶  血栓与止血实验室检查的临床重要性与日俱增,检验内容不断扩大,工作量也日益增多,不断出现方法更新和试剂商品化、操作自动化,改变了以往靠手工操作、自配试剂、工作效率低的局面。过去的玻片法凝血时间和Duke氏出血时间测定已淘汰,迄今凝血试验中的凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)测定已有公认的标准化方案[1],并成为实验室检查的常规项目。  1玻片法凝血时间和Duke氏出血时间测定已淘汰  1.1凝血时间凝血时间是检测“内源”凝血系统相关因子缺陷的简易过筛试验。目前国内广泛使用的玻片法很不敏感,国外早在60年代即已淘汰。即使是被认为是较好的试管法,对第Ⅷ、第Ⅸ因子缺乏病例的阳性率也不高,而且操作繁琐。某些出血性疾病需要查凝血时间时,现已改用APTT代替[1]。  1.2出血时间出血时间是一种检测血小板数量、功能和毛细血管功能的过筛试验。目前我国临床常规实验室普遍采用的Duke氏法,甚不敏感。少数出血性疾病,例如血小板减少及功能异常及血管性血友病(vWK以及纤维蛋白原等。同时也用于上述因子的抑制物测定和肝素治疗的监控。  3.2测定步骤  3.2.1样品采集样品的采取、贮存、运送与PT测定相同。注意:应用清洁的塑料或硅化玻璃采血器采血及贮血,防止凝血因子接触活化。  3.2.2标本制备标本(乏血小板的血浆)的制备与PT相同。注意:必须用PPP测定。  3.2.3温度水浴箱或电热块的温度为(37±1)℃,要经常检查温度是否准确。  3.2.4接触活化时间加激活剂活化Ⅻ因子的时间要保持一致。各仪器和试剂生产厂家的规定可能不一样,应严格按说明书要求进行。  3.2.5操作已预温(不超过30min)的APTT试剂一份, 与预温(不超过10min)的待测血浆一份混合,立即开动秒表计时。至规定的接触活化时间(各商品要求不同)终了时,加入预温37℃的CaC12液一份,混匀,同时开动秒表。至出现血浆凝固时,停表记录血浆凝固时间(以秒计)。  4PT和APTT的临床意义[7]  4.1血浆PT测定正常参考范围:正常PT为11s~14s,超过正常对照3s为异常。临床意义:PT延长见于先天性因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏症和低或无纤维蛋白原血症;获得性见于DIC、肝病、阻塞性黄疸、维生素K缺乏症、血循环中有抗凝物质或口服避孕药等。PT缩短见于高凝状态和血栓性疾病。  4.2活化APTT测定正常参考范围:35s~45s,临床意义:APTT较正常对照延长10s以上有意义。本试验较CT敏感,凡参与血浆凝血活酶生成的各种因子缺乏时,均可引起APTT延长,尤其Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ因子含量减少所致的各种血友病时多见延长,能检出因子Ⅷ:C<25%的轻型血友病。凝血酶原、纤维蛋白原严重减少以及有抗凝物质存在时亦可延长。也可作为血友病治疗和抗凝药物治疗过程中的观察指标之一。APTT缩短见于DIC高凝期、血小板增多症等。  5活化的APTT和血浆PT可见下列4种情况[6]  5.1APTT和PT都正常除正常人外,仅见于遗传性和继发性因子Ⅹ、Ⅲ缺乏症。获得性者常由于严重肝脏疾病、肝脏肿瘤、恶性淋巴瘤、包括白血病、抗因子Ⅹ、Ⅲ抗体、自身免疫性溶血性贫血和恶性贫血等引起。  5.2APTT延长伴PT正常多数是由于内源凝血途径缺陷所引起的出血性疾病,如血友病A、血友病B、因子Ⅺ缺陷症;血循环中有抗因子Ⅷ、抗因子Ⅸ或抗因子Ⅺ抗体存在;DIC时可见因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ减低,肝脏疾病时可见因子Ⅸ、Ⅺ减少,口服抗凝剂时可见因子Ⅸ减低、v].天津科学技术出版社,1998,(1):3943.

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