尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用

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1、尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用【关键词】尿核基质蛋白22;癌,移行细胞;膀胱肿瘤;诊断;复发监测0引言    膀胱移行细胞癌是我国泌尿系统最常见的恶性肿瘤,其中70%为浅表肿瘤,且有易复发的特征,5a内复发的可能性为50%~70%,大多数肿瘤在1a复发[1].早期发现,定期术后随访,检测复发是膀胱肿瘤成功治疗的关键.目前临床上常用的诊断及复查方法为膀胱镜检查、尿脱落细胞检查及B超检查.膀胱镜检查具有侵袭性,许多患者难以接受;尿脱落细胞检查及B超检查虽非侵入性,但灵敏度不高[2].近年来随着分子生物学的发展,尿核基质蛋白22(NMP22)成为临床研究较多的

2、指标之一[3].我们对自膀胱移行细胞癌患者进行了尿NMP22的检查,并进行手术后的复发与未复发的动态观察.  1对象和方法  1.1对象200401/200512收治膀胱癌组患者45例,男35例,女10例;年龄29~81(平均55.7)岁.其中行膀胱部分切除术12例,TURBT32例.膀胱癌术后随诊3mo~2a.术后20例复发,25例未复发,复发率44.4%.均有血尿,行膀胱镜检+活检诊断为膀胱移行细胞癌,所有复发病例均经病理证实.非膀胱癌泌尿系疾病30例,男16例,女14例.年龄30~85(平均47.8)岁.其中尿石症10例,泌尿系感染(单纯)6例,前列腺增生伴出血8例,前列

3、腺癌1例,肾癌4例,尿道狭窄1例.健康志愿者20例,男13例,女7例,年龄35~69(平均53.5)岁.  1.2方法所有尿样均在行膀胱镜检、导尿等腔内操作前于08:00~12:00一次性收集.标本分2份:1份查NMP22,1份行尿脱落细胞学检查.查NMP22的尿样标本收集后避光保存,立即转入含有防腐剂的尿样收集瓶500r/min离心15min后取上清夜转入塑料试管中3~20℃保存.实验NMP22试剂盒由美国Matritech公司生产,严格按试剂盒说明书操作,采用双抗体夹层免疫酶标法用酶标仪测得吸光度,建立标准曲线,取得样品NMP22的测定值(单位U/L).  统计学处理:参照文献

4、以10.0×103U/L为NMP22检测临界值,所有数据采用SPSS统计软件包处理.尿NMP22各组之间比较采用非参数秩和检验.P<0.05为有统计学差异.  2结果  2.1NMP22含量45例膀胱癌NMP22为7.9×103~158.0×103U/L,非膀胱癌泌尿系疾病MP22为2.1×103~17.1×103U/L,健康志愿者NMP22为1.4×103~10.3×103U/L,膀胱癌患者尿中NMP22浓度高于非膀胱癌泌尿系疾病和健康志愿者(P<0.05).  2.2NMP22与尿脱落细胞学以10.0×103U/L为NMP22检测阳性临界值,NMP22与尿脱落细胞学

5、诊断膀胱癌的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值有一定差异(表1),NMP22敏感性高于尿脱落细胞学检查(P<0.01),但特异性稍低.  表1NMP22和尿脱落细胞学敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值(略)  2.3NMP22在膀胱癌术后复发中的检测45例膀胱癌术后复发20例患者尿NMP22中位数为30.7×103U/L,25例未复发患者尿NMP22中位数为6.1×103U/L(P<0.01).以10.0×103U/L为最适临界值,复发病例NMP22≥10.0×103U/L者15例,NMP22<10.0×103U/L者5例;未复发病例NMP22≥10.0×

6、103U/L者5例,NMP22<10.0×103U/L者20例,敏感性75%,特异性80.0%.  3讨论    核基质蛋白(nuclearmatrixprotein,NMP)是核基质的重要组成部分,有多种结构和功能,并且有较强的组织器官特异性[4],最早于由Berezney等[5]报道.NMP22属于核基质蛋白的一种,又称为有丝分裂器蛋白.是构成细胞核网状结构的一个组成部分,与DNA的复制、转录、RNA合成及基因表达的调控有关.NMP22为核有丝分裂装置蛋白(NuMAP)的一个亚单位.NuMAP与有丝分裂期间纺锤体的形成有关,其主要供能为在细胞有丝分裂末期使染色体正确、均匀

7、地分配到子代细胞[6].因此,NMP22与细胞增殖活跃的组织关系密切.据报道,体外培养的膀胱癌细胞内NMP22浓度较正常膀胱移行上皮细胞至少增加25倍[7].由于膀胱癌中NMP22在细胞凋亡中以可溶性复合物片断形式随尿排出,而这个被释放的片断可通过双单抗酶联免疫法予以测定,检测限达到pg级,这使得尿的NMP22成为膀胱肿瘤的特有标记物.    Carpinito等[8]报道移行细胞癌患者组尿中NMP22浓度明显高于良性泌尿外科组和健康人群,初步认为NMP22作为一种筛

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