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时间:2019-03-04
《何首乌饮调节衰老大鼠睾丸leydig细胞分泌睾酮的机制》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、密级:学校代码:10075分类号:学号:20101641医学硕士学位论文何首乌饮调节衰老大鼠睾丸Leydig细胞分泌睾酮的机制学位申请人:宋庆亮指导教师:牛嗣云学位类别:医学硕士学科专业:药理学授予单位:河北大学答辩日期:二0一三年五月ClassifiedIndex:CODE:1010075U.D.C.:NO:20101641ADissertationfortheDegreeofM.SThemechanismofHeshouwuyinregulatingthesecretionoftestoste
2、roneinLeydigcellofagingrattestisCandidate:SongQingliangSupervisor:Prof.NiuSiyunSupervisor:Prof.DuanFeiAcademicDegreeAppliedfor:MasterofMedicalSpecialty:PharmacologyUniversity:HebeiUniversityDateofOralExamination:May,2013摘要摘要目的:观察何首乌饮方调节衰老大鼠睾丸Leydig细胞(
3、LC)分泌睾酮的机制方法:根据差速离心贴壁法选用出生10~20d的幼年雄性SD大鼠,无菌取双侧睾丸,用胶原酶Ⅰ消化睾丸组织提取睾丸LC后,采用3β-HSD细胞化学染色进行细胞鉴定;采用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基培养睾丸LC,并进行如下处理:对培养的LC不做任何处理为正常对照组;用50μmol/LH2O2和100μmol/LFeSO4损伤LC为衰老损伤组;何首乌饮+50μmol/LH2O2和100μmol/LFeSO4处理LC为何首乌饮预防组;50μmol/L的H2O2和100μmol
4、/LFeSO4+何首乌饮处理为何首乌饮治疗组,何首乌培养LC为何首乌饮对照组。应用β-半乳糖苷酶试剂盒检测β-半乳糖苷酶;放免法测睾酮的含量;采用RT-PCR、Westernblotting和免疫荧光法检测Star和P450scc的表达。观察各实验组睾丸LC分泌睾酮的可能机制。结果:1、用3β-HSD细胞化学染色进行鉴定,结果显示细胞纯度为98%以上。2、β-半乳糖苷酶定位在细胞质,阳性细胞呈蓝色。衰老组睾丸LCβ-半乳糖苷酶的阳性率明显高于正常组(P<0.01);何首乌饮用药组睾丸LCβ-半乳糖
5、苷酶的表达比衰老组明显减少(P<0.05);而何首乌饮治疗组与预防组之间睾丸LCβ-半乳糖苷酶的表达无明显差别(P>0.05);正常组与何首乌对照组之间无明显差异(P>0.05)。3、衰老组睾酮含量明显低于正常组和何首乌饮对照组(P<0.01);何首乌饮治疗组和预防组睾酮含量高于衰老组(P<0.05);而何首乌饮治疗组与预防组之间睾酮含量无明显差别(P>0.05);正常组与何首乌对照组之间无明显差异(P>0.05)。4、衰老组Star和P450scc的表达明显低于正常对照组和何首乌饮对照组(P<0
6、.01);正常对照组和何首乌饮对照组之间没有明显的差别(P>0.05);何首乌饮治疗组、何首乌饮预防组均能明显提高睾丸LCStar和P450scc的表达,与衰老组相比有显著性差异(P<0.05),而何首乌饮治疗组与预防组之间无明显差别(P>0.05)。结论:I摘要1.成功的建立了大鼠Leydig细胞衰老模型。2.首乌饮能够显著降低衰老Leydig细胞β-半乳糖苷酶的含量。3.何首乌饮能够提高衰老Leydig细胞分泌睾酮的能力4.何首乌饮能够提高衰老大鼠Leydig细胞P450scc、Star表达。
7、关键词:睾丸LCβ-半乳糖苷酶何首乌饮StarP450scc睾酮IIAbstractAbstractObjective:ToobservethemechanismofHeshouwuyinregulatingthesecretionofLeydigcellinagingrattestis.Method:Basedondifferentialcentrifugationadherent,wetook10-20daysmaleSDratsbothtestissterily,thendigestived
8、bycollagenasefortestisLeydigcell.Leydigcellweretestifiedby3β-HSDCytochemicalstaining.TestisLeydigcellwereculturedin10%Fetalbovineserumculturemediumandinterferedasfollowings:noneinterferedLeydigcellwasnormalgroup;Leydigcelldamagedby50μmol/LH2O2
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