何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸间质细胞的影响

何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸间质细胞的影响

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1、中图分类号:R339.4编号:学号20090103承德医学院硕士研究生毕业论文何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸间质细胞的影响EffectofHeshouwuyininLeydigcellsofExercise-inducedFatigueRat研究生:孙一翀导师:高福禄教授学科专业:人体解剖与组织胚胎学所在系部:基础医学部研究起止日期:2010年9月~2012年3月论文提交日期:2012年3月何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸间质细胞的影响EffectofHeshouwuyininLeydigcellsofExercise-inducedFatigu

2、eRat研究生:孙一翀学号:20090103年级:2009级导师:高福禄教授学科专业:人体解剖与组织胚胎学所在系部:基础医学部研究方向:生殖生物学研究起止日期:2010年9月~2012年3月论文提交日期:2012年3月目录中文摘要………………………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………………………4英文缩写………………………………………………………………………9研究论文何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸间质细胞的影响前言……………………………………………………………………..10材料与方法…………

3、…………………………………………………..11结果………………………………………………………………..……25附图………………………………………………………………..……28附表………………………………………………………………..……52讨论………………………………………………………………..……61结论………………………………………………………………..……65参考文献……………………………………………………………..…66综述……………………………………………………………..………69致谢…………………………………………………………….

4、.………73个人简历……………………………………………………………..………74中文摘要何首乌饮对运动性疲劳大鼠睾丸间质细胞的影响摘要运动性疲劳是指高强度超负荷的连续运动,机体机能和运动负荷不能彼此适应,所导致的疲劳连续性积累,继而所引发的一系列的机体功能紊乱或是病理状态的产生。疲劳还将伴随有一定的健康损害,即由于运动引起的机体生理和生化的改变,致使机体运动能力的暂时性下降。传统中药在延缓和消除疲劳方面具有独特的优势,其中补肾方剂何首乌饮由《宣明论方》何首乌丸加味而成,在何首乌、肉苁蓉、怀牛膝的基础上增加淫羊藿、丹参、茯苓,具有补肝肾、益精

5、血、延年益寿,消除疲劳之功效。本研究对运动性疲劳大鼠进行中药干预,观察其对运动性疲劳大鼠的血生化指标和睾酮合成限速酶P450scc和StAR以及睾丸胞内胆固醇合成限速酶HMG-CoA和SR-BI的表达影响。为进一步研究中药抗运动性疲劳的作用及机理奠定理论和实验基础。目的:采用生物化学、免疫组织化学、RT-PCR和WesternBlotting方法,通过检测各组大鼠的血生化指标以及睾丸组织P450scc、StAR和HMG-CoA、SR-BI的表达。探讨何首乌饮缓解运动性疲劳的机制。方法:1.实验动物的选择及分组:选用8周龄清洁级SD(Spra

6、gue–Dawley,SD)雄性大鼠75只,(动物由河北医科大学实验动物中心提供,合格证编号1005050),每只体重为180~200g。自由进食,饮水,室温20℃-25℃,相对湿度45%-55%,每天光照12h,随机分为6组:安静对照组(A组)、安静何首乌饮组(B组)、模型组(C组)、自然恢复组(D组)、何首乌饮治疗组(E组)和何首乌饮预防组(F组),每组15只。2.建立大鼠运动性疲劳模型:游泳池内壁光滑呈圆形,直径约50cm,水深70cm,水温30℃±2℃。第一周进行适应性游泳训练,每天一次,共七次。第1天下水游泳30min,此后逐日按

7、照40%幅度增加至第7天游泳2h;从第二周开始适应性负重游泳训练,第一次负重自身体重的0.5%,此后逐日递增,负1%、2%、3%、4%每次游泳2h,每天一次。1中文摘要当第六天负重增加到5%时,游泳时间明显缩短,所以选择自身体重的4%作为最终的负重量;此后六周每天一次进行游泳力竭实验(游泳力竭标准为大鼠游泳出现明显不协调,经水面下沉10s后仍不能上浮,且放置平面无法完成翻正反射)。3.各组处理:A组大鼠不进行游泳训练,每天灌胃等量生理盐水。B组大鼠不进行游泳训练,每天灌胃何首乌饮20g/(kg.d)。在制作运动疲劳模型过程中,C组、D组、E

8、组和F组大鼠每天下午进行力竭游泳训练,其中F组在上午灌胃何首乌饮20g/(kg.d)进行预防,连续六周。在造模的第42d各组大鼠经内眦眶后静脉取血约1.5mL,离心取上清,检测血

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