百子莲组织培养及植株再生研究

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1、万方数据·生物技术·北方园艺2011(10)：118～120百子莲组织培养及植株再生研究胡仲义，何月秋(宁渡城市职业技术学院环境学院，浙江奉化315502)摘要：以百子莲花蕾为外植体，成功建立了其离体再生体系。结果表明：百子莲花蕾在诱导培养基MS+6-BA4mg／L+NAA0．1mg／L可分化出不定芽；在MS+6一BA2mg／L+NAAo．2H堰／L+GA30．1mg／L培养基上，百子莲不定芽增殖倍数可达到5．07；百子莲不定芽适宜的生根培养基为1／2MS+NAA0．1mg／L+AC0．1∥L，生根率可达100％，且百子莲组培苗移栽1个月后

2、成活率可达到95％以上。关键词：百子莲；花蕾；不定芽；植株再生中图分类号：S682．1+9文献标识码：B文章编号：1001--0009(2011)lo—0118一03百子莲(Agapanthuspraecoxssp．)是原产于南非的多年生根茎类花卉，又名非洲百合、百子兰、蓝花君子兰、紫穗兰等，素有“爱情之花”的美誉，目前研究者对其分类地位还不统一，曾被归为百合科(Liliaceae)、葱科(Alliaceae)或石蒜科(Amaryllidaceae)的亚科(Agapan-thoideae)，近期还有学者将其单独归为一科一非洲百合科(Agap

3、anthceae)[1]。百子莲植株秀丽，叶色浓绿，花茎挺立，花型优雅，花色淡雅，不但是非常理想的地被和花境植物材料，而且也是很好的鲜切花材料，同时也可用作药用成分的提取，目前已成功应用在上海世博绿化景观[2]，这必将在上海及周边城市绿化景观上起到示范效应，市场对百子莲需求将逐步加大，开发前景广阔。我国于2000年对百子莲进行引种栽培，栽培研究发现，百子莲多数不结果或种子不能萌芽或分化严重，生产上多采用分株方法进行种苗繁殖，但繁殖速度缓慢、繁殖系数低，且小苗生长不快，需栽培4～5a才能开花；而组织培养的方法则可大大加快百子莲的繁殖速度，缩短

4、繁殖的周期。同时，百子莲高效稳定的离体再生体系，可为百子莲的新品种选育提供良好的操作平台。百子莲属植物引人我国时间不长，对其组培技术的报道比较少见，仅见康玲[33以百子莲的根茎部和叶片为外植体进行组培研究，但未获得生根；中国绿色时报报道上海光兆植物速生技术有限公司获得了百子莲的组培苗[4]。现以百子莲的花蕾为外植体，获得了百子莲的第一作者简介：胡仲义(1967一)，男，本科，副教授，研究方向为植物基础。收稿日期：201l—03—18118组培再生体系，为进一步深入研究百子莲的分类地位和育种技术提供了良好的操作平台。1材料与方法1．1百子莲初

5、代培养物的建立以宁波鄞州绿城园艺花卉培育基地种植的百子莲花蕾为外植体。6月份从田间将百子莲刚形成的花蕾(长度为1cm左右)连同花梗采回实验室。先用洗洁精进行表面清洗，后用流水冲洗4～5次。分装好后移至超净工作台用75％乙醇浸泡30S后用0．1％升汞处理振荡灭菌10min，然后用无菌水冲洗5～6遍，再用消毒滤纸吸干表面水分，然后用解剖刀将花蕾苞片剥除，并对半剖开接种至MS+6-BA4．0n影L+NAA0．1n影L和MS+6-BA4．0rag／L+NAA1．0m∥L2种诱导培养基。1．2百子莲不定芽的增殖培养将已经分化的百子莲不定芽切割下来，以

6、每3个或以上的不定芽为1芽丛转接至以MS为基本培养基，以不同6一BA、NAA、GA3等作为植物生长调节物质进行调配。其中6-BA设1．o、2．0、3．0mg／L，NAA设0．1、0．2、0．3mg／L，GA3设0．05、0．1、0．2mg／L3个水平，采用b(34)正交实验设计，共9个增殖培养基，每种增殖培养基接种30个不定芽，3次重复。定期观察并记录不定芽增殖情况，30d后统计各组试验的新芽个数、新芽生长情况。1．3百子莲不定芽的生根培养待不定芽长至2～3cm左右，将其转入以1／2MS为基本培养基添加NAA为o、0．05、0．1mg／L和

7、1．0g／I．AC的生根培养基中，每5d观察并记录不定芽生根情况，20d后统计根长及苗生长状况。以上培养基中除生万方数据北方园艺2011(10)：118～120·生物技术·根阶段白糖的浓度为1．5％而外，其他阶段白糖均为3％，琼脂为0．7％，pH调至6．0。培养室内控制恒温(25±1)℃，光照为40“mol·rIr2·S-1，光照时间为每天14h，3次重复，每个试验包括30个外植体。2结果与分析2．1百子莲花蕾诱导分化结果百子莲花蕾在诱导培养基中lOd后开始膨大，15d后花蕾开始展开，20d后花瓣开始枯萎，部分子房膨大转绿并形成少量芽点，3

8、0d后芽点逐渐长大叶子伸长(图l—a)。观察发现，培养基MS+6-BA4．0mg／L+NAA0．1mg／L可诱导百子莲形成较多愈伤组织，并分化形成多而且细弱的不定芽，芽可增殖；而