口服供者脾细胞诱导成年大鼠皮肤移植物存活期延长

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1、口服供者脾细胞诱导成年大鼠皮肤移植物存活期延长：佟建秋，王禾，沈瑞雄，石炳毅，莫春柏，周文强【关键词】皮肤移植　　【Abstract】AIM:Toinvestigatethesurvivaltimeofskinallograftinrecipientratbyorallyfeedingdonorsspleencellsandtostudythemechanismoforaltolerance.METHODS：TheinbredSDratsed.The20recipientsly.IngroupA(controlgroup)heterotopicskintra

2、nsplantationsedandingroupB(feedinggroup)heterotopicskintransplantationsedfolloeansofgastricintubation.Themixedlymphocytecultureinvitroanddelayedtypehypersensitivity(DTH)responseinvivoinedandthesurvivaltimeofskinallograftphocytesfromLC)、体内的迟发型超敏反应（DTH），并行皮肤移植，观察移植皮肤的存活时间.结果：口服抗原后，体外

3、混合淋巴细胞培养及体内的DTH反应均出现明显的抗原反应性降低，口服抗原组的移植皮肤存活时间达到(158±13)d，而对照组为(49±01)d，两组差异显著（P<001，n=10）.结论：口服抗原可以引起受者对异基因抗原的特异性免疫反应降低，能使受者的皮肤移植物存活期延长.　　【关键词】口服抗原；皮肤移植；淋巴细胞培养试验；超敏反应，迟发型　　0引言　　器官移植是某些终末期疾病的唯一治疗手段，虽然免疫抑制剂的应用使急性排斥得到了比较满意的解决，但它有难以避免的副作用，长期大量使用将致肝肾功能损害、免疫功能受损，而且也不可能完全避免排斥，这已成为进一步提高

4、病人远期存活的巨大障碍，既能使移植物长期存活，又不损害宿主免疫功能的理想方法之一是诱导宿主对移植器官的特异免疫耐受.本实验采用供体SD大鼠脾细胞经过口服途径注入到受体LC)及体内迟发型超敏反应(delayedtypehypersensitivity,DTH)，并行供受体间的皮肤移植，观察皮肤存活时间,探讨口服途径对机体免疫耐受诱导的效果.　　1材料和方法　　1.1材料雄性纯系I1640培养液调整细胞浓度至5×107・mL-1，然后用球头注射器抽取1mL注入到I1640液洗3次，每次1000r・min-1，离心10min，计数，然后

5、用完全的RPMI1640培养液调整细胞浓度至1×106・mL-1.将调整好的LC）：将反应细胞和刺激细胞各100μL，加入96孔平底板中，每组7个复孔，共分四组，并设反应细胞、刺激细胞等作为对照组细胞.MLC1组：未口服供者脾细胞的LC2组：未口服供者脾细胞的LC3组：口服供者SD大鼠脾细胞的LC4组：口服供者SD大鼠脾细胞的TT10μL，继续培养6h，用酶标光度计以波长为570nm，参考波长为630nm，分别测量A值.　　1．2．3迟发型超敏反应（DTH）取LC3与MLC1相比，如Fig1所示（平均降低71%，P<001，n=7），而口

6、服抗原组对于无关第三者DA大鼠的外周单个核细胞的混合淋巴细胞增殖反应仅稍有降低，即MLC2与MLC4相比，降低无显著差异.　　bP<001vsMLC3.　　图1混合淋巴细胞培养（略）　　Fig1Mixedlymphocyteculture（略）　　2．2迟发型超敏反应口服抗原后7d，检查,与对照组DTH1（0183±0018）cm相比差异显著（平均降低45%，P<001，n=10），而对无关第三者DA大鼠的DTH反应，口服组DTH4（0118±0009）cm与对照组DTH2（0125±0008）cm相比差异无显著性（Fig2）.　　2．3皮肤移植

7、物存活时间A组皮肤移植后3~4d开始脱水干燥，增厚变硬，色深红，部分区域点状发黑，6d后完全干缩坏死，发生急性排斥的平均时间为（49±01）d；B组移植后第4日皮色红润，有弹性，薄而软，12~14d后部分区域脱水，色深红，皮稍厚变硬，16~18d以后坏死脱落.发生排斥反应的平均时间为（158±13）d.　　3讨论　　到目前为止，诱导和维持免疫耐受的方法很多，如特异性全血输注［1，2］、脾细胞输注［3］或骨髓细胞输注［4］、胸腺内抗原输注［5］等方法，胡军等［6］曾利用胸腺、骨髓细胞联合移植的方法有效延长异种皮肤移植存活.而口服途径诱导免疫耐受作为一种独特的方

8、法近年来也被人们重视和关注，应用口服抗原治疗自身免疫