玻片凝集实验报告

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为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划玻片凝集实验报告　　姓名：邹雨星学号：XX班级：15检验3班第四组　　实验题目：凝集实验　　一、实验内容：直接凝集实验(玻片法)——血型鉴定　　1.实验原理：　　(一)血清学反应：体外进行的Ag-Ab反应，由于机体绝大部分抗体存在于血清中，故又叫血清学反应。　　特点：(1)高度特异性；　　(2)分子表面的可逆性结合；　　(3)Ag、Ab比例合适才会出现肉眼可见的反应。　　(二)凝集反应：颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应抗体在适当的电解质条件下凝集成肉眼可　　见的小块，称为凝集反应(agglutination)。　　颗粒性Ag——凝集原；相应Ab——凝集素。　　2.主要材料及实验步骤：　　材料：已知Ab:标准血清：抗A和抗B血清　　待测Ag:RBC血型抗原　　步骤：(1)取血(无名指尖或耳垂)——NS试管——2-5%RBC悬液；　　(2)准备一张载波片；　　(3)加血清各1滴；目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　(4)加RBC悬液各1滴；　　(5)牙签搅和并摇晃混匀；　　(6)结果判断(10-15min后)　　3.实验结果：　　4.实验结论：本人为A型血　　5.实验讨论：　　二：实验内容：间接凝集实验——类风湿因子检测　　1.实验原理：　　2.主要材料及实验步骤：　　材料：已知Ag:致敏乳胶(乳胶颗粒上有变性IgG)、待测Ab:待检血清中的类风湿因子　　步骤：A、取一乳胶凝集实验反应板　　B、加阳性和阴性对照血清、待测血清各一滴；　　C、各加一滴致敏乳胶；　　D、牙签搅拌；　　E、5分钟后观察结果；乳胶凝集如细沙状。以黑背景观察为佳　　3.实验结果：　　4.实验结论：　　5.实验讨论　　科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应　　细胞凝集反应目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　【实验目的】　　1.了解细胞膜的表面结构；　　2.掌握凝集素促使细胞凝集的原理；　　3.学习研究细胞凝集反应的方法。　　【实验原理】　　1.凝集素　　凝集素是一类含糖并能与糖转移结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，人体的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。常用的为植物凝集素，通常一起被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被。凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”，从而引起细胞凝集。凝集素引起的血细胞凝集，其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。　　人们利用凝集素与不同的糖蛋白特异性结合的原理，识别和研究不同类型膜结构的生物学特征，以及进行血型鉴定。ABO血型鉴定主要用于临床输血，在皮肤、肾等器官移植的时候选择ABO血型相符的供体；不孕症和新生儿溶血症病因的分析及亲子鉴定等。另外，凝集素在临床疾病防治、机体生理活动调控以及生物工程等方面展示出了十分广阔的应用前景。如：植物凝集素可抑制受精；芸豆凝集素可直接抑制HIV-1反转录酶的活性，减少HIV感染者的病毒载量；细胞膜表面糖复合物的糖链结构与肿瘤细胞增殖、侵染、转移等发展过程密切相关，凝集素芯片技术实现了对癌症的快速、高通量检测，有助于筛选出癌症相关的糖链标志物。　　2.细胞凝集　　细胞凝集是指细胞彼此聚集在一起，成为一簇不规则的细胞团。细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。目前认为，细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　凝集素是一类含糖的并能与糖专一结合的蛋白质，如植物血球凝集素，伴刀豆凝集素和土豆凝集素等，它具有凝集细胞核刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。　　3.细胞凝集的反应技术　　一、直接凝集反应技术　　颗粒性抗原(细菌、螺旋体、红细胞等)与相应的抗体血清混合后，在电解质的参与下，经过一定时间，抗原抗体凝聚成肉眼可见的凝集块，这种现象称为凝集反应。　　血清中的抗体称为凝集素。抗原称为凝集原。　　细菌或其他凝集原都带有相同的电荷，在悬液中相互排斥而呈均匀的分散状态。抗原与抗体相遇后，由于抗原和抗体分子表面存在着相互对应的化学基团，因而发生特异性结合，称为抗原抗体复合物。由于抗体与抗原结合，降低了抗原分子间的经典排斥力，抗原表面的亲水基团减少，由亲水状态变为疏水状态，此时已有凝集的趋向，在电解质参与下，由于例子的作用，中和　　科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应　　了抗原抗体复合物外面的大部分电荷，使之是去了彼此间的经典排斥力，分子间相互吸引，凝集成大的絮片或颗粒。出现了肉眼可见的凝集反应。　　但是，直接凝集反应技术也有缺点：特异性不高、抗原抗体无法获得或无法用于实验。　　二、间接凝集反应技术目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　可溶性抗原吸附于免疫学反应无关的颗粒表面上，当这些致敏的颗粒与相应的抗体相遇时，就会产生特异性的结合，在电解质参与下，这些颗粒就会发生凝集现象。这种借助于载体的抗原抗体凝集现象就叫做间接凝集反应。　　载体的存在使反应的敏感性得以大大提高。　　间接凝集反应的优点：　　敏感性强：间接凝集反应是最敏感型的血清学反应方法之一，可以检测到微量的抗体和抗原；　　快速：一般1h-2h即可判定结果，若在玻板上进行，则只需几分钟；　　特异性强；　　使用方便、简单　　三、载体　　具有吸附抗原的载体很多，如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物的红血球、某些细菌等。　　良好的载体有以下几点基本要求：　　在生理盐水或缓冲液无自凝倾向；　　大小均匀；　　比重与介质相似，短时间内不能沉淀；　　无化学或血清学活性　　吸附抗原后，不影响其活性。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　目前应用最广的是人的O型红血球和绵羊红血球。而后者应用更广，因为其来源方便。另外绵羊红血球的表面有大量的糖蛋白受体，极易吸附某些抗原物质，吸附性能好，且大小均匀一致。　　【实验用品】　　1.材料　　土豆块茎、家兔　　2.试剂　　抗凝血剂、PBS、土豆块茎、生理盐水和其他等渗液。　　3．器材　　5mL注射器、酒精棉球、双凹片、载玻片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管。　　【操作步骤】　　1.取土豆去皮块茎2克，切碎并加10mlPBS缓冲液，浸泡24小时，浸出的粗体液中即含有可溶性土豆凝集素；　　2.用针管抽取一定体积的抗凝剂，并使抗凝剂充分浸润针管各部以及针头。然后从兔子耳根处或心脏抽取兔子静脉血1ml，加生理盐水3ml，在1000r/min条件下，离心5分钟。重复三次离心，最后按沉淀的红细胞体积用生理盐水配成1%的红细胞悬液；　　3.在双凹片的左孔滴加一滴PBS缓冲液，同时在双凹片的右孔处滴加一滴土豆凝集素；目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　4.在双凹片的左右孔同时滴加一滴1%的红细胞悬液，然后使左右孔内的液体都充分混匀；　　5.左手捏住双凹片的一端，右手轻轻摇晃双凹片，使凹槽内的液体充分的混合，如此摇晃5～10分钟，观察结果。　　科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应　　6.先以白纸为衬托，直接观察双凹片凹槽内混合样品发生凝集的现象，注意左右凹槽内不同现象的对比，对于发生凝集的一边注意观察凝集与不发生凝集的区别。直接观察后在光学显微镜下观察两凹槽内现象的区别，并用照相机拍摄实验结果。　　【实验结果】　　1.肉眼观察，对照组中红细胞沉积在双凹片凹槽底部呈大红点；用凝集素处理的实验组。颜色越来越浅，透明度逐渐变高，经过1　　分30秒，背景颜色变为透明，红细胞呈颗粒状聚集　　2.低倍镜下可以看到对照组中红细胞分布较均一，无凝集；实验组中红细胞聚集在一起　　对照组实验组　　【实验结果分析与注意事项】　　分析：　　1.把液体滴加到双凹片上时，注意用量，防止悬液过多而溢出，使两个细胞悬液接触，导致实验结果不可靠。　　科目细胞生物学实验题目细胞凝集反应目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　2.滴加1%的红细胞悬液时，可适当的多加点儿，便于实验结果的观察。　　3.用手晃动双凹片时，注意摇晃的姿势：一只手用手掌处贴紧双凹片，另一只手抵住双凹片的另一侧上下晃动。　　4.摇晃的时间可适当延长，提高红细胞凝集程度。　　5.浸出土豆凝集素时选发芽的或发青色的土豆。由此可知发芽土豆不宜食用，因其所含土豆凝集素可让血细胞发生凝集。　　6.区分血清与血浆，血清指血液自然沉降后所得上清液，而血浆是血液加抗凝剂后离心所得上清液。　　7.凝血是指多个细胞聚集成不规则细胞簇，溶血是红细胞在低渗溶液作用下，肿胀破裂放出血红蛋白的过程。　　细胞生物学实验报告　　一．　　二．实验名称：细胞凝集反应实验原理：　　细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被。目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　凝集素是一类含糖的并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。　　凝集素是指一种从各种植物，无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球(含血型物质)，故名凝集素。常用的为植物凝集素(Phytoagglutin,PNA)，通常以其被提取的植物命名，如刀豆素A(Conconvalina,ConA)、麦胚素(Wheatgermagglutinin,WGA)、花生凝集素(Peanutagglutinin,PNA)和大豆凝集素(Soybeanagglutinin,SBA)等，凝集素是它们的总称。凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们具有的某些“亲合”特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。　　血型鉴别实验，也是凝集反应的一种。　　三．实验用品：　　土豆块茎　　显微镜，粗天平，载玻片，滴管2支，离心管2支　　PBS缓冲液：称取，,,加蒸馏水，定容至1000ml，调pH值到　　%的红细胞　　四．实验步骤：　　1.称取土豆去皮块茎2g，加10mlPBS缓冲液，浸泡2h，浸出的粗提液中含　　有可溶性土豆凝集素。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　2.以无菌方法抽取兔子静脉血液，加生理盐水3ml，在　　1000r/min，离心5min，重复3次离心，最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。　　3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴，置双凹片左孔内，充　　分混匀。　　4.同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴，置双凹片右　　孔内，充分混匀，做对照实验。　　5.摇晃5—10min后，观察有无发生细胞凝集并置显微镜下观察。　　图左为PBS缓冲液对照图右为土豆凝集素　　图一图二土豆凝集素图一中为在振荡了11min后，细胞凝集的现象，中间凝结成血块，周围叫澄清，边缘为干涸的红细胞凝结成的颗粒附着在玻片上。在低倍镜下观察，可以看到红细胞凝结成块状，周围液体近乎透明，说明红细胞发生了凝集。　　图三图四PBS缓冲液图三中为在振荡了之后，红细胞并没有聚集成颗粒状，只是由于向心力左右而聚拢在一起呈透明凝胶状。在低倍镜下观察可见到均匀的透明液体，没有红细胞凝结而成的颗粒。　　六．实验分析：目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。 为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　实验所得结果可见，红细胞并没有如预期那般在中央凝结成大血块，而周围近乎透明，分析其原因可能为：　　在滴加土豆凝集素时，没有加入半滴，而是加入了一滴，反而导致了　　细胞凝集效果下降。　　在晃动过程中，速度过慢，且晃晃停停，导致红细胞凝结成的颗粒状　　在玻片上凝固。　　血浆浓度的影响，血浆浓度不合适导致细胞凝集作用减弱。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。