grim-19抑制人子宫颈癌移植瘤细胞生长机制的研究

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1、安徽医科大学硕士学位论文药物有：Trastuzumab和Lapatinib用于Her-2阳性乳腺癌；Imatinibmystate用于胃肠道间质瘤；Sunitinibmatate及Sorafenib治疗晚期肾癌；Cetuximab、Panitumumab及Bevacizumab用于晚期大肠癌；Bortezomib治疗多发性骨髓瘤，套细胞淋巴瘤；Gefitinib及Erlotinib治疗非小细胞肺癌（NSCLCnon-smallcell[6-11]lungcancer）；GendicinerAd-P53治疗头颈肿瘤、胃癌等

2、。因此，基因治疗已成为子宫颈癌治疗的新趋势，然而有效的基因治疗依赖于外源基因高效而稳定的表达，因此，选择合适、有效的靶基因成为目前针对子宫颈癌基因治疗的首要任务。子宫颈癌与HPV感染有高度相关性，许多学者试图通过抗病毒联合化学药物治疗以追求更好的治疗效果。干扰素是临床常用的抗病毒感染的药物，但是研究发现临床上单独应用干扰素（inferon,IFN）治疗子宫颈癌的效果并不理想；全反式维甲酸（retinoicacid，RA）具有很强的诱导分化肿瘤细胞作用，若将IFN[12-13]与维甲酸联合应用，则诱导肿瘤细胞凋亡的作用增强

3、，部分学者还发现子宫颈[14-15]癌患者放疗或手术治疗后辅以RA/IFN联合治疗具有改善患者生存率的作用。探讨RA/IFN联合治疗的具体机制发现，其诱导了GRIMs(genesassociatedwithretinoid-IFN-inducedmortality)家族成员表达的上调，通过激活各自的靶基[16]因诱导了细胞的凋亡。GRIM-19是GRIMs家族的成员，定位于19p13.2，在人多种正常组织中表达，在部分肿瘤组织（如肾癌、前列腺癌）中表达降低，GRIM-19还是线粒体中NADH脱氢酶复合物Ⅰ的基本组成成分，

4、在线粒体Ⅰ型呼吸过程中至关重要，GRIM-19的[17-18]功能主要是参与细胞的供能、诱导细胞的凋亡。GRIM-19调控Src酪氨酸激酶家族的转录信号转导子与激活子3（Signaltransducersandactivatorsof[19]transcription3,STAT3）的表达和转录激活活性，STAT3在许多肿瘤中处于持续激活状态，在肿瘤的抗凋亡机制中起着重要作用，被认为是肿瘤治疗的新靶点[20-22]。GRIM-19与宫颈癌的发病密切相关，在临床子宫颈癌组织中表达下调，同时伴随STAT3表达水平升高；对稳定

5、转染GRIM-19的HeLa细胞株研究进一步发现，其细胞内STAT3的表达水平及转录激活活性显著受抑。前期的研究发现，HeLa/8安徽医科大学硕士学位论文Grim-19细胞株有效地抑制了子宫颈癌细胞株STAT3基因的表达，逆转了宫颈癌细[23]胞的恶性生物学行为。恶性肿瘤发生的分子机制涉及原癌基因的激活（点突变，基因扩增，染色体易位），肿瘤抑制基因功能丧失，凋亡调节基因表达异常，肿瘤细胞具有端粒酶活性促使瘤细胞永生化等方面。而恶性肿瘤的侵袭性生长、远处器官转移依赖于肿瘤新生血管生成及瘤细胞本身异质性等。瘤细胞有诱导血管生

6、成（angiogenesis)的能力，肿瘤细胞本身及炎细胞（主要是巨噬细胞）能产生血管生成因子（angiogenesisfactor）,如血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）,诱导新生血管的生成。血管内皮细胞和成纤维细胞表面有血管生成因子受体,血管生成因子与其受体结合后，可促进血管内皮细胞分裂和毛细血管[24-25]出芽生长。因此，抑制肿瘤血管生成可望成为一个治疗肿瘤的重要途径。抗血管生成是不同于常规抗肿瘤治疗的新策略，并以成为肿瘤研究的热点之一。前期的研究证明，G

7、RIM-19具有抑制移植瘤生长的功能，但其机制尚不清楚，本研究重点探讨，稳定转染GRIM-19的HeLa细胞株接种裸鼠成瘤生长受抑的具体机制：包括肿瘤侵袭、血管生成、细胞增殖、细胞凋亡等因素。9安徽医科大学硕士学位论文2材料与方法2.1材料2.1.1主要仪器设备超净工作台北京昌平百剑空气净化工程公司恒温水浴箱北京市长风仪器仪表公司数显恒温水浴箱金坛市金城国胜实验仪器厂水浴恒温振荡器太仓市科教器材厂电热鼓风干燥箱上海博迅实业有限公司PCR仪TECHNE公司紫外分光光度计GeneQuant公司超纯水器EASYpureLF公司

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