高碘对frtl细胞及mt-ⅰⅱko小鼠脾细胞氧化损伤的影响

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1、分类号：R363学校代码：10062密级：学号：2012602062硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：高碘对FRTL细胞及MT-I/IIKO小鼠脾细胞氧化损伤的影响TITLEEffectofHighConcentrationsofIodideInducedOxidativeStressinFRTLCellsandtheSpleenofMT-I/IIKOmice一级学科：基础医学二级学科：病理学与病理生理学论文作者：王凌燕指导教师：姚小梅教授天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号：R363学校代码：10062密级：学号：2012602062学位类别：

2、科学学位□√专业学位学科门类：医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：高碘对FRTL细胞及MT-I/IIKO小鼠脾细胞氧化损伤的影响TITLEEffectofHighConcentrationsofIodideInducedOxidativeStressinFRTLCellsandtheSpleenofMT-I/IIKOmice一级学科：基础医学二级学科：病理学与病理生理学论文作者：王凌燕指导教师：姚小梅教授天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加

3、以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密√。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日期：年月日导师签名：日

4、期：年月日天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的研究高浓度碘化钾(potassiumiodide，KI)对Fisher大鼠甲状腺细胞(Fisherratthyroidcellline，FRTL)相对细胞活力、LDH漏出率、线粒体超氧化物生成、细胞Prx3(peroxiredoxins3)蛋白表达、活化型半胱天冬酶3（cleavedcaspase3）和活化型半胱天冬酶9（cleavedcaspase9）及细胞凋亡的影响，探讨100μMKI对FRTL细胞氧化损伤的发生、发展过程和机制，并用二乙基二硫氨基甲酸(diethyldithiocarbamicacid，DETC)、超氧化物歧化

5、酶(superoxidedismutase，SOD)及线粒体呼吸链复合体I或III(mitochondrialETCcomplexIorcomplexIII)抑制剂鱼藤酮(Rotenone)或抗霉素A(AntimycinA)进行干预，研究其对100μMKI导致的FRTL细胞氧化损伤的影响。利用金属硫蛋白I/II敲除小鼠(methallothioneinI/IIknockoutmice,MT-I/IIKOmice)建立短期碘过量的动物模型，探讨在有和没有MT-I/II的情况下，短期碘过量对小鼠脾细胞的影响，并探讨高碘对MT-I/IIKO小鼠脾细胞活力、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率和

6、脾细胞线粒体超氧化物生成、Prx3蛋白表达及脏体比的影响并探讨其机制。方法一、高浓度碘对FRTL细胞氧化损伤的影响1．FRTL细胞分别用100μMKI、2mMDETC、100μMKI+2mMDETC、1000unit/mlSOD、100μMKI+1000unit/mlSOD、0.5μMRotenone、100μMKI+0.5μMRotenone、10μMAntimycinA、100μMKI+10μMAntimycinA处理2h，应用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyltetrazolium,MTT)法检测各处理因素对FRTL细胞活力的影响。2．利用乳酸脱氢酶(lact

7、atedehydrogenase,LDH)测定试剂盒检测细胞培养液上清的LDH漏出率。3．利用线粒体荧光探针[3,8-phenanthridinediamine,5-(6-triphenylphosphoniumhexyl)-5,6dihydro-6-phenyl,MitoSOX]通过流式细胞术和荧光显微镜检测FRTL细胞线粒体超氧化物生成。4．利用细胞免疫荧光染色，通过荧光显微镜检测FRTL细胞Prx3蛋白表达量的变化。I天津医科大学硕士学位论文5．利用Westernblot技术，检测FR