维药鹰嘴豆化学成分及降糖活性研究

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1、分类号：R931.71单位代码：10193密级：公开学号：2012108硕士学位论文维药鹰嘴豆化学成分及降糖活性研究StudiesonthechemicalconstituentsandhypoglycemicactivityofCicerarietinum作者姓名：薛峰学位类别：医学硕士专业名称：生药学专业研究方向：植物药指导教师：包海鹰教授徐暾海教授所在学院：中药材学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发

2、表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫

3、描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日摘要本论文对鹰嘴豆种子的化学成分、紫外分光光度法校正测定鹰嘴豆总异黄酮含量、不同提取部位的降糖活性筛选及其作用机制、以及染料木素的结构修饰与其乙氧基化产物细胞降糖活性对比等方面进行了相关

4、研究。化学成分方面，通过硅胶柱色谱、凝胶柱色谱(SephadexLH-20)、高速逆流色谱(High-SpeedCountercurrentChromatography,HSCCC)、高效液相色谱（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）等色谱手段从鹰嘴豆种子的乙酸乙酯部位分离得到5个化合物，并利用1H-NMR、13C-NMR、DEPT和ESI等仪器分析手段对化合物的结构进行了鉴定。5个化合物分别为β-谷甾醇、阿魏酸、鹰嘴豆芽素A、染料木素和邻苯二甲酸二异丁酯。阿魏酸为首次从鹰嘴豆中分离得到。利用高速逆流色

5、谱分离乙酸乙酯部位和95%乙醇部位的基本参数设置为固定相流速：2ml/min；流动相流速0.5ml/min；主机转速：1800r/min，正转；温度25℃。摸索到分离乙酸乙酯部位的最佳溶剂系统为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水=6:4:4.2:1(v/v/v/v)，波长254nm，固定相保留率为65%。95%乙醇部位的最佳溶剂系统为氯仿：甲醇：水=4:2.5:2(v/v/v/v)，波长254nm，固定相保留率为65%。传统的紫外分光光度法测定异黄酮总含量，方法简单、快捷，但当使用一种标准品测定含有多种异黄酮成分的混合液时测定结果往往误差较大。本研究通过校

6、正提高了该方法的精确度，校正前平均回收率为93.74%，校正后平均回收率为97.95%，校正后比校正前平均回收率增加了4.25个百分点。随着混合标准液加入量的增加，回收率的增加幅度整体呈增加趋势，即测定精确度提高更加明显。采用不同极性的溶剂溶剂对鹰嘴豆种子进行渗漉提取，分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、95%乙醇部位、70%乙醇部位、30%乙醇部位五个不同提取部位。利用自发性糖尿病KKAy小鼠进行降糖活性部位筛选。测定五个不同部位对小鼠体重、进食量、饮水量、空腹血糖以及胰岛素耐量试验（InsulinToleranceTest，ITT）以及对血脂四项

7、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）和内脏指数肾体比、肝体比的不同影响结果，从而筛选出治疗效果最为明显的活性部位，即乙酸乙酯部位。通过试验研究乙酸乙酯提取部位对KKAy小鼠肌肉组织PPARα（过氧化物酶体增殖物激活受体-α）和PPARγ（过氧化物酶体增殖物激活受体-γ）2种基因表达量的影响。结果表明乙酸乙酯提取部位对各项指标的综合影响最大，是改善胰岛素抵抗，治疗2型糖尿病的相对较好活性部位。推测通过改变PPAR相关基因的表达量来直接或间接的改善胰I岛素抵抗，从而起到降低血糖，治疗糖尿病的作用。染料木素为

8、异黄酮类成分，具有雌性激素作用、抗氧化作用、降血脂作用、增加骨密度等作用。但是染料木素的脂溶性和水溶性都较差。通过对染料木