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《发酵液中替考拉宁含量hplc法测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、发酵液中替考拉宁含量HPLC法测定【摘要】目的建立用HPLC法测定替考拉宁含量的方法。方法采用C��18�柱(250mm×4.6mm,5μm)，流动相为0.02mol/L的磷酸缓冲液(pH6.0)�乙腈(75�∶�25)，流速1.0ml/min，检测波长为254nm，进样量10μl。结果替考拉宁在500.0~5000.0μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9988),平均回收率为100.2%(RSD=0.14%,n=6)。结论方法简便，结果准确，适用于该产品的质量控制。�【关键词】替考拉宁；HPLC法；含量测定��HPLCdeterminationontheconte
2、ntofTeicoplanininfermentedbrothZHANGBo.AcademyofBasicandForensicMedicine,JiningMedicalUniversity,Jining272067,China�【Abstract】ObjectiveToestablishthedeterminationonthecontentofTeicoplanininfermentedbroth.MethodsAnHPLCmethodwasdeveloped,C��18�column(250mm×4.66mm,5μm)wasused,andthemobileph
3、aseconsistedofphosphatebuffer(pH6.0)andacetonitrile(75：25)attheflowrateof1.0ml/min.Thedetectionwavelengthwas254nm,andtheinjectionvolumewas10μl.ResultsThelinearrangeofTeicoplaninwas500.0~5000.0μg/ml(r=0.9988),andtheaveragerecoverywas100.2%(RSD=0.14%,n=6).ConclusionThismethodisconvenientan
4、daccurate,whichissuitableforthequalitycontrolofthispreparation.�【Keywords】Teicoplanin;HPLC;Contentdetermination�6替考拉宁(Teicoplanin)为新型糖肽类抗生素，抗菌谱及抗菌活性与万古霉素相似，对金黄色葡萄球菌的作用比万古霉素更强，不良反应更少。本品对革兰阳性菌如葡萄球菌、链球菌、肠球菌和大多厌氧性革兰阳性菌敏感，具有较强的杀菌活性。由于替考拉宁独特的作用机制，很少出现耐替考拉宁的菌株，所以对青霉素类及头孢菌素类，大环内酯类、四环素类和氯霉素类，氨基糖苷
5、类和利福平耐药的革兰阳性菌，仍对替考拉宁敏感1,2］。本文采用高效液相色谱法，乙腈�磷酸盐体系作为流动相，对发酵液中的替考拉宁含量测定方法进行研究，结果满意。�1仪器与试剂�Waters1525型液相色谱仪(美国Waters公司)，UV100型紫外检测器，替考拉宁对照品(中国药品生物制品检定所提供)，替考拉宁样品(山东鲁抗医药股份有限公司)；乙腈(色谱纯，天津四友公司)。�2方法与结果�2.1色谱条件C��18�色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)，流动相为磷酸盐缓冲液(pH=6.0)�乙腈(75�∶�25)，流速1.0ml/min，检测波长为254nm,进样量10
6、μl。�2.2检测波长的选择对替考拉宁对照品的流动相溶液进行紫外扫描，结果在254nm附近有较大吸收，在此波长处发酵液无明显干扰，故选择254nm作为检测波长。�2.3标准溶液的配制精密称取替考拉宁对照品约20mg，置10ml容量瓶中，振摇，用流动相溶解至刻度，作为供试品溶液，另取替考拉宁样品适量，同法操作。�2.4系统适用性试验取106μl对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。在该色谱条件下，替考拉宁峰与其他杂质峰分离度大于1.2。�2.5破坏性试验称取替考拉宁对照品各约200mg，分别��作者单位：272067济宁医学院基础医学与法医学院�置于3个100ml容量瓶中
7、，分别加入1mol/L盐酸、1mol/L氢氧化钠，3%的过氧化氢溶液各10ml，于室温放置1h，用流动相定容，作为破坏后的供试品溶液，分别取10μl注入液相色谱仪，结果替考拉宁与杂质分离良好。�2.6线性关系精密称取替考拉宁对照品适量，分别制成每1ml中含替考拉宁500.0,1000.0,2000.0,3000.0,4000.0,5000.0μg的溶液，注入液相色谱仪，以替考拉宁峰面积A为纵坐标，浓度C为横坐标，计算得回归方程为：�A=487939C，r=0.9988��2.7最低检测限采用逐级稀释法，以S/N≥3为最低检出限，测得最低检
