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《纤维素酶制备水溶性壳聚糖的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、纤维素酶制备水溶性壳聚糖的研究2011NO.6?156?SerialNo.231ChinaBrewingResearchReport,纤维素酶制备水溶性壳聚糖的研究王拮,郑业灿,蔡广志,杨亚楠(长春工业大学化学工程学院,吉林长春130012)摘要:通过对溶液还原糖浓度以及黏度的测定研究了纤维素酶对壳聚糖的降解作用,探讨了酶解过程中温度,pH值以及反应时间对纤维素酶降解壳聚糖的影响,对降解前后壳聚糖的结构进行了表征并对其水溶性进行了测试.结果表明,纤维素酶降解壳聚糖的最佳pH值为4.5,温度为50%,随着反应时间的延长,壳聚糖溶液的黏度逐
2、渐降低;随着壳聚糖分子量的降低,水溶性增强,但是化学结构没有发生改变.关键词:壳聚糖;纤维素酶;降解;水溶性中图分类号:TS202.3文献标识码:A文章编号:0254—5071(2011)06—0156—03Preparationofwater-solublechitosanwithcellulaseWANGZhe,ZHENGYecan,CAIGuangzhi,YANGYanan(InstituteofChemicalEngineenng,ChangchunUniversityofTechnology,Changchun130012,C
3、hina)Abstract:Thedegradationofchitosanbycellulasewasmonitoredbyreducingsugarconcentrationandviscosity.Factorsthataffecttheenzymatichy-drolysisofchitosanwerestudied.Thestructuresofdegradedchitosanwerecharacterized.ThecellulaseshowedoptimumdeploymerisationatpHval—He4.5and5
4、0~C.DifferentreactiontimesgavechitosanwithdifferentmolecularweiI曲ts.Thedecreaseofmolecularweightledtotransformationofcrystalstructureandtheincreaseofwatersolubility,butthechemicalstructuresofresidueswerenotmodified.Keywords:chitosan;cellulase;degradation;solubility壳聚糖是甲壳
5、素脱乙酰基的产物,广泛应用于生物,医药与食品等领域.与大分子量壳聚糖相比,低分子量的壳聚糖不仅具有良好的水溶性,易吸收,而且具有很强的生物活性,特别是分子量低于lxl0~的低聚糖具有独特的生理活性和功能:良好的水溶性,保湿增湿性,抑菌抗菌作用,抗肿瘤及免疫促进作用等,使其在保健食品[1_,生物医药【2J,化妆品【3J,医疗诊断和生物生理翻等方面具有独特的应用价值.壳聚糖降解方法包括化学降解法,酶降解法,物理降解法以及复合降解法嘲.化学降解法需要用到大量的化学试剂,对环境污染较大,而且反应不容易控制.物理降解法成本相对较高,目前仅限于实验
6、室阶段.而酶法降解能够选择性的切断壳聚糖的B.1,4糖苷键,容易得到所需分子量范围的壳聚糖,反应专一性强,不会引起结构的破坏,反应条件温和而且不需要加入大量的反应试剂,对环境污染较少.目前,已发现有30多种专一性酶或非专一性酶可用于壳聚糖的降解反应m,从而生成各种分子量的低分子量壳聚糖.纤维素酶作为非专一性酶价格低廉,而且容易找到.因此,用纤维素酶代替成本昂贵的专一性酶降解壳聚糖成为时下研究的热点.1材料与方法1.1仪器与材料UV.1800紫外分光光度计(上海岛津),Bio—RadWin.型傅立叶红外光谱仪(上海岛津),PHS型数字酸度
7、计(杭州雷磁分析仪器厂),HZQ—F100恒温振荡培养箱(哈尔滨东联电子技术开发有限公司),DZG一6050真空干燥箱(杭州卓驰仪器有限公司),85.1磁力搅拌器(上海志威电器有限公司),PL303电子天平(梅特勒.托利多仪器有限公司).壳聚糖(分子量6.8xl0Su,青岛海生生物工程有限公司),纤维素酶(上海三杰生物技术有限公司,酶活力30U/mg),其他试剂均为分析纯.1.2实验方法1.2.1壳聚糖的酶解称取2g壳聚糖溶于0.2mol/L的HAc.NaAc缓冲溶液,配成1%的壳聚糖溶液,待完全溶解后置于恒温槽中,恒温后,向壳聚糖溶液
8、中加入20mL纤维素酶酶液进行降解反应.待反应结束后,将反应液置于沸水浴中煮沸5min,使酶失活,减压抽滤脱去酶,用2mol/L的氢氧化钠溶液调节其pH值至中性,用大量的乙醇对其沉淀,洗涤,抽滤,真空干燥,
