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1、结核感染T细胞斑点试验在菌阴肺结核患者中应用价值(江苏省淮安市第四人民医院江苏淮安223002)【摘要】目的：探讨γ干扰素释放结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在菌阴肺结核诊断中的应用价值。方法：选取2012年1月~2014年12月期间我院住院收治的49例菌阴结核病患者，非结核病患者35例，分别给予结核抗体检测、结核菌素试验及T细胞斑点试验，统计分析各种检测方法在菌阴肺结核病中的诊断价值。结果:菌阴肺结核49例，PPD阳性38例(77.55%);结核抗体阳性37例(75.51%),T细胞斑点试验阳性47例(95.91%),与PPD、结核抗体阳性率
2、差异比较明显(P<0.05);在35例非结核病中，PPD阳性12例(34.29%),结核抗体阳性为15例(42.86%),T细胞斑点试验阳性为3例(8.57%),差异明显(P<0.05)；T细胞斑点试验组间阳性率差异明显(P<0.05),具有统计学意义。结论：在菌阴肺结核的临床诊断中，T细胞斑点试验为新型检测分枝杆菌感染免疫学方法，检测阳性率高，值得在临床治疗中推广应用。【关键词】T细胞斑点试验；菌阴肺结核；PPD；诊断；应用价值【中图分类号】R521【文献标识码】A【文章编号】1004-6194(2015)02-0156-01在我国重大传染病中，结核为重大传染病类型
3、之一，同时也是威胁人类健康的重大呼吸道传染病类型之一。近年来，随着环境的恶化，尤其是大气环境的恶化，结核病的发病率呈逐年上升趋势［1］。对于活动性结核患者来说，快速准确诊断为防控与治疗的关键。而传统抗酸杆菌涂片敏感度50%~60%，分枝杆菌培养时间较长，且阳性率偏低［2］。木研究纳入我院收治的菌阴肺结核患者49例，探讨T细胞斑点试验在临床诊断中的价值，现报道如下。1资料与方法1.1一般资料随机选取2012年1月到2014年12月期间我院收治的菌阴结核患者49例，均符合中华结核病诊治指南的诊断标准，年龄32〜76岁，平均年龄为（51.4±12.4）岁；49
4、例患者中，男性28例，女性21例。选择同期非结核患者35例，均经临床检查与治疗后，排除结核感染患者，男性21例，女性14例，年龄34〜68岁，平均年龄（47.5±11.5）岁，包括肺炎22例、陈旧性结核3例，以及慢性支气管炎1例、腹腔积液2例、恶性肿瘤3例、胸腔积液2例，以及慢性咳嗽1例、发热1例。两组患者在年龄、性别等方面无明显差异（P〉0.05）,存在可比性。1.2方法1.2.1T细胞斑点试验T细胞斑点试验试剂盒（OxfordImmunotec公司）由上海复星科技有限公司生产提供，肝素抗凝管用8ml-10ml外周静脉血，加入Ficoll淋巴细胞分离液
5、后离心分离外周单个核细胞，计数后，每个培养孔接种2.5×105个细胞，37°C,5%C02孵育18〜20hrs,经洗板，酶促反应及底物显色后，干燥培养板，最后座用酶联斑点分析仪进行斑点计数，实验结果以每250000PBMCs中斑点形成细胞（Spot-formingcells,SFCs）数0来表示，结果判断标准以试剂盒说明书为准。1.2.2结核抗体结核抗体用酶联免疫（EUSA）方法，按照试剂说明书规范操作。结核抗体检测试剂盒（北京W尔生物工程有限公司生产）。1.2.3结核菌素试验结核菌素纯蛋白衍生物（Purifiedproteinderivatives,PP
6、D）试剂由北京祥瑞生物制品有限公司生产。规格为50U/ml，于左前臂内侧上中1/3交界皮内，以5U注入体内，从而形成皮丘，观察48〜72h内的反应，根据局部硬结直径为主要依据，阴性判断标准为小于5mm,阳性判断标准为5mm〜9mm,中度阳性反应为10〜19mm，水疱或坏死视为强阳性反位［3】。1.3统计学方法所有数据均用SPSS13.0软件包进行处理，计数资料用百分率（％）形式进行表示，用卡方检验，以P<0.05差异显著，具有统汁学意义。2结果菌阴肺结核49例患者中，PPD阳性38例，占比为77.55%;结核抗体阳性37例，占比为75.51%,T细胞斑点试验阳性47例
7、，占比为95.91%，与PPD、结核抗体阳性率差异比较明显(P<0.05),具有统计学意义。在35例非结核病中，PPD阳性12例(34.29%)，结核抗体阳性为15例(42.86%),T细胞斑点试验阳性为3例(8.57%),差异明显(P<0.05);T细胞斑点试验组间阳性率差异明显(P<0.05),具有统计学意义。T细胞斑点试验在组间的检测阳性差异明显(P<0.05),具有统计学意义。详见表1。3讨论根据我国卫生部门全国第五次结核病流行病学抽样调査结果，2010年我国超过500万结核病或定性患者，且感染结核病菌人数首次超过5亿人次，约占全国总人U的4
