缺血后处理对再灌注损伤大鼠胃黏膜细胞erk表达的

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1、缺血后处理对再灌注损伤大鼠胃黏膜细胞ERK表达的【摘要】目的探讨缺血后处理(ischemicpost-conditioning,I-postC)对大鼠胃黏膜再灌注(GI-R)损伤的影响及细胞机制。方法制备胃缺血后处理模型。实验分为3组(n=6):假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I-R组)、缺血后处理组(I-postC组)。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测胃黏膜细胞的凋亡，用免疫组化方法检测胃黏膜细胞增殖及凋亡相关基因p-ERK的表达。结果与Sham组相比，I-R组胃黏膜细胞凋亡增加及增殖减少，p-ERK表达下调；与I-R组相

2、比，缺血后处理显著降低胃黏膜细胞凋亡率，同时可以增加胃黏膜增殖率及p-ERK的表达。结论缺血后处理可抑制胃黏膜细胞凋亡，促进细胞增殖。其机制可能与p-ERK的表达上调有关。【关键词】胃缺血-再灌注；缺血后处理；细胞外信号调节激酶Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsandcellularmechanismofischemicpost-conditioning(I-postC)onI/R-inducedgastricmucosalinjuryinrats.MethodsAnimalmodelofgastricI-Rinjury

3、lydividedinto3groups:shamgroup,I-Rgroupandischemicpost-conditioninggroup(I-postCgroup).TdT-mediateddUTP-biotinnickendlabeling(TUNEL)ployedtodetectthegastricmucosalcellsapoptosis,andemployedtodetecttheimmunohistochemistryemployedtodetecttheexpressionofp-ERK.Resultsparedgroup,thegastricmu

4、cosalcellularapoptosisinI-Rgroupincreased,theproliferationdecreased,andtheexpressionofp-ERKicpost-conditioningcouldmarkedlyreducegastricmucosalcellularapoptosis,andmeanucosaandpromotetheproteinexpressionofp-ERK.ConclusionTheI-postCinhibitescellularapoptosisandpromotescellularproliferati

5、onanditsprotectivemechanismisassociatedia-reperfusion;ischemicpost-conditioning;extracellularsignal-regulatedkinase近年来，探索器官缺血-再灌注(I-R)损伤的特点、规律和发生机制已成为当今医学研究的热点。2003年，Zhao等［1］利用犬心肌梗死模型证实，1h缺血后再灌注开始前给予3轮再灌注30s/缺血30s(R-30s/I-30s)处理，明显缩小心肌梗死面积，提出了缺血后处理(ischemicpost-conditioning,I-postC)的概念。

6、现在已经在不同动物的心肌、脑组织、肾脏得到证实［2-3］，但胃缺血后处理鲜见报道。胃黏膜是人和动物体内较易受损的组织，各种严重的应激刺激常可引起不同程度的胃组织缺血而造成胃黏膜细胞的损伤。此前我们的研究已经初步证实缺血后处理对胃黏膜损伤能够起到保护作用［4］，在此基础上我们进一步观察了缺血后处理对胃黏膜组织损伤的影响，试图揭示缺血后处理对胃黏膜损伤的细胞保护机制。　　1材料和方法　　1.1试剂　　抗p-ERK单克隆抗体、小鼠抗大鼠增殖细胞核抗原(PA)单克隆抗体(SantaCruz公司)；TUNEL原位凋亡检测试剂盒（CHEMICON公司）；Po组)，开腹后仅分离腹腔

7、动脉而不夹闭；②缺血-再灌注组(I-R组)；③缺血后处理组(I-postC组)。　　1.3动物模型制备　　1.3.1大鼠胃缺血再灌注模型的制备　　按本实验室方法［5］，大鼠经10％水合氯醛（0.3ml/100g，ip）麻醉后，仰卧固定于操作板上，消毒后采取腹正中切口，开腹长约3cm，分离并用无创伤血管夹夹闭腹腔动脉30min后，去除动脉夹恢复血流，于再灌注后1h处死动物，快速取胃。　　1.3.2缺血后处理（I-postC）模型制备　　参照文献［1］，夹闭腹腔动脉进行胃缺血30min后，即刻松开血管夹灌注20s，然后再夹闭缺血20s，如此反复3次（灌注