春和丹治疗肝纤维化大鼠的实验研究

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1、春和丹治疗肝纤维化大鼠的实验研究作者:张素杰刘金里白建乐赵磊张心怡【摘要】  目的探讨春和丹对肝纤维化大鼠的治疗作用。方法将SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、春和丹低剂量组(20g/kg)、春和丹高剂量组(40g/kg)及护肝片组(1.5g/kg),每组8只。除正常组外,其余各组以四氯化碳(CCl4)皮下注射制备大鼠肝纤维化模型。除正常组和模型组外,于实验第5周开始分别给予春和丹和护肝片灌胃给药,连续5周。观察各组肝纤维化指标、肝功能指标及肝组织病理的变化。结果春和丹可明显降低肝纤维化大鼠血清

2、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及肝组织羟脯氨酸定量(Hyp);明显升高血清白蛋白(Alb);光镜观察肝组织病理明显改善(P<0.05);春和丹低剂量组和春和丹高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论春和丹抗肝纤维化作用确切,同时够修复肝脏炎症损伤,纠正蛋白质代谢,且不同剂量春和丹与护肝片比较差异无统计学意义(P>0.05)。【关键词】春和丹;肝纤维化;实验研究  ExperimentalstudyofChunh

3、edanonanti-hepaticfibrosisinrats   【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectsofChunhedan(CHD)onhepaticfibrosis.Methods40ratslydividedintofivegroups.TherathepaticfibrosismodelHA、PCⅢ、PCⅣ、LN,ALTandHypinlivertissue,increasedserumALBobviously.Theimprovementofp

4、roliferationdegreeofcollagenousfibericroscope(P<0.05).ConclusionCHDshoentalhepaticfibrosisinmodelrat.  【Keyentalstudy  肝纤维化是可逆性的病变,若进一步发展成肝硬化则难以逆转[1]。因此,抗肝纤维化是治疗肝病、防治肝硬化的重要环节。郭光业导师根据中西医理论,结合现代研究进展,经过长期的临床实践总结出经验中药复方——春和丹。本研究旨在通过动物实验,探讨春和丹抗肝纤维化的作用机理

5、,为临床治疗提供准确的科学依据。  1材料与方法  1.1动物健康SD大鼠(二级),雄性,体质量120~150g,由河北省实验动物中心提供,许可证号:SCXK(冀)2003-1-003。  1.2药物春和丹(由柴胡10g、黄芩10g、制半夏10g、甘草10g、黄芪15g、女贞子10g、旱莲草10g、丹参15g、鳖甲30g、穿山甲6g、冬虫夏草3g组成,河北省石家庄市中医院提供);护肝片(阳性药,黑龙江葵花药业股份有限公司提供,批号:200412089)。  1.3仪器722分光光度计,上海第三分析

6、仪器厂。  1.4试剂四氯化碳(CCl4),天津市河东区红岩试剂厂,批号:20040222;丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血浆总蛋白(TP)、血清白蛋白(Alb)检测试剂盒,均为南京建成生物工程研究所生产;血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)试剂盒,由上海海研医学生物技术有限公司生产;Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)试剂盒,由北京北方生物技术研究所生产。  1.5实验方法将大鼠随机分为5组,即正常组、模型组、春和丹低剂量(20g生药/kg)、春和丹高剂量组(40g生药/kg)及护肝片组(1.

7、5g/kg),每组8只。除正常对照组外,其余各组大鼠均首次皮下注射纯四氯化碳(CCl4)5mL/kg,以后皮下注射40%CCl4豆油溶液3mL/kg,2次/周,连续9周[2]。除正常组和模型组外,于实验第5周开始对春和丹高、低剂量组和护肝片3组分别进行灌胃给药,连续5周。末次给药前各组大鼠均禁食12h,给药后2h,分别麻醉,颈总动脉取血,分离血清检测肝功能、肝纤4项指标。  1.6检测指标及方法血清ALT、血浆TP和血浆AL1b用检测试剂盒测定;放免法测定血清HA、PCⅢ、CⅣ、LN含量;取左叶肝

8、组织,10%甲醛固定,石蜡包埋,切片,HE染色观察肝脏病理组织改变;取部分肝组织匀浆后用酸水解法测量肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量。  1.7统计学方法统计学处理采用SPSS13.0forWido.  2.4各组对肝纤维化大鼠肝组织Hyp含量的影响见表3。  表3各组对肝纤维化大鼠肝组织Hyp含量的影响(略)  与模型组比较,*P<0.05  2.5各组对肝纤维化大鼠肝组织病理变化的影响见表4。  表4各组对肝纤维化大鼠肝组织病理变化的影响(略)  表4结果经Ridit分析,正常组、

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