hla测序技术在非亲缘性脐血移植应用价值探讨

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1、HLA测序技术在非亲缘性脐血移植应用价值探讨作者：廖灿，杨昕，李焱，黄以宁，许遵鹏，吴洁莹，汤雪薇，陈劲松，吴韶清【摘要】1998年6月至2004年7月，广州脐血库向国内21家移植中心54例患者提供了非亲缘性异基因脐血。为了探讨非亲缘性脐血移植供/受者HLA等位基因及其亚型与脐血移植GVHD发生率的关系，对54例非亲缘性脐血移植病例中，半年后有反馈随访资料的48例，利用盐析或柱提法提取移植的非亲缘性脐血的DNA及移植病例的全血DNA，采用HLA-SBT方法分别对HLA-A、B、DRB1位点进行了高分辨分型，并与我库脐血收集常规采用的HL

2、A-SSP（HLA-Sequencingspecificprimers）低分辨结果进行了比较分析。结果发现，HLA不合位点不多于2个和HLA不合位点不少于3个的病例GVHD的发生率具有统计学显著性差异（P<0.05）。在对HLA-A、B、DRB1等位基因高分辨单因素分型结果中，HLA-B和HLA-DRB1等位基因匹配全相合的病例GVHD发生率显著低于不完全相合病例GVHD的发生率（P=0.000，P=0.005）。结论：PCR-SBT技术在非亲缘性脐血移植HLA配型方面具有重要的临床应用价值。【关键词】非亲缘性脐血移植；HLA配型

3、;HLA测序技术；HLA-SBT；脐血　　ClinicalApplicationofHLASequencinginUnrelatedUmbilicalCordBloodTransplantation　　AbstractFromJune1998toJuly2004,Guangzhouumbilicalcordbloodbankprovidedunrelatedumbilicalcordbloodfor54patientstomorethan21transplantationcenters.HLAsequencing-basedtyping

4、(SBT)ationabout48outof54patientsonthsoffollobilicalcordbloodunits,andtheobtainedresultsismatchedHLAsitesandlessthan3sitessinglefactoranalysisandhigh-resolutiontypingofHLA-A,BandDRB1alleles,themismatchbetportantroleinumbilicalcordbloodtransplantation,andtheincidenceofGVHD

5、ishigherinthetransplantationismatching.　　Keybilicalcordbloodtransplantation;HLAmismatch;HLAsequencing;HLAsequencingbasedtyping;umbilicalcordblood　　HLA高分辨分型技术不仅可以对HLA血清学配型起到积极的校正作用，对研究哪些HLA等位基因相合可以明显减弱GVHD，哪些等位基因不相合可以耐受等方面以及制定相对个体化的HLA配型策略都具有重要的临床应用价值。在骨髓造血干细胞移植中，HLA测序分型技

6、术得到了广泛的应用和发展，在预防GVHD方面具有十分重要的意义。本研究采用以测序为基础的HLA分型技术（HLA-sequencingbasedtypingHLA-SBT）对可随访的48例非亲缘性脐血移植病例HLA配型结果进行回顾性分析，以探讨HLA-A/B/DRB1等位基因匹配程度对非亲缘性脐血移植GVHD的影响。　　材料和方法　　脐血来源　　脐血样本全部来自广州脐血库，脐血分离、冷冻、保存以及相关检测参考相关　　在HLA-B等位基因亚型分型结果中，HLA-B等位基因亚型匹配0/2、1/2和2/2位点相合病例分别为11、33、4例，GV

7、HD发生率分别为72.7%（8/11）、45.5%（15/33）和50%（2/4），统计分析未发现HLA-B等位基因亚型匹配完全相合与不完全相合GVHD发生率具有统计学显著差异（P=0.000）（表2）。在HLA-DRB1等位基因亚型分型结果中，HLA-DRB1等位基因亚型匹配0/2、1/2和2/2位点相合病例分别为16、25和7个，其GVHD发生率分别为25%（4/16）、64.0%（16/25）和71.4%（5/7）。统计分析发现，HLA-DRB1等位基因亚型相合与否与GVHD发生率具有强相关性（P=0.003）（表2）。在38例H

8、LA-DRB1等位基因全相合病例中，HLA-DRB1等位基因亚型匹配0/2、1/2和2/2位点相合病例分别为16、18和4个，GVHD发生率分别为25%（4/16）、61.1%（11/18）和50%（2/4