反相高效液相色谱法测定不同制法华盖散中橙皮苷的含量

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1、反相高效液相色谱法测定不同制法华盖散中橙皮苷的含量作者：张明昶，邵进明，彭小冰，袁双秀，梁光义【摘要】目的对华盖散的分煎液与合煎液汤剂中的有效成分橙皮苷进行含量比较。方法采用AgilentZorbaxSB-C18柱（5μm，4.6mm×150mm）,流动相为甲醇-醋酸-水（34∶4∶62），流速为1ml/min，检测波长为283nm，柱温为25℃。结果华盖散分煎液中橙皮苷的平均含量小于合煎液中橙皮苷的含量。结论橙皮苷在华盖散分煎液与合煎液中含量存在显著性差异。其结果为该复方的研制开发提供了一定科学依据。【关键词】华盖散；反相高效液相色谱；合煎；分煎；橙皮苷China;2.TheKeyLa

2、boratoryofChemistryforNaturalProductsofGuizhouProvinceandChineseAcademyofSciences,Guiyang,Guizhou550007,ChinaAbstract：ObjectiveToparethecontentofthehesperidininthemixedmedicinedecoctionandthesinglemedicinedecoctionofHuaGaiSan.MethodsAnRP-HPLCmethodn(5μm，4.6mm×150mm),amobilephaseofmethonal-acetica

3、cid-l/min，acolumntemperatureof25℃andadetection.ResultsTheaveragecontentofhesperidinofthesinglemedicinedecoctionixedmedicinedecoction.ConclusionThereisremarkabledifferenceinthecontentofhesperidinindifferentdecoctionsofHuaGaiSan,etheoreticalbasisforthedevelopmentoftherefinedgranuleoftheHuaGaiSan.　　

4、Keyedicinedecoctions;Mixedmedicinedecoctions;Hesperidin　　中药复方汤剂是中药制剂的传统剂型，在临床使用广泛，但其煎煮具有随意性，使用不方便；而中药配方颗粒是将单味中药饮片通过水等溶剂，提取浓缩制得，可以类似中药饮片随证组方，解决传统汤剂使用不便之不足。但两者的临床疗效是否相近，其有效成分的含量有何差异是中药配方颗粒能否广泛应用于临床需要解决的重要问题。华盖散出自《博济方》，由麻黄30g，桑白皮30g，紫苏子30g，杏仁30g，赤茯苓30g，陈皮30g，炙甘草15g等7味药组成，具有宣肺解表，祛痰止咳之功效。主治素体痰多，肺感风寒证［

5、1］。　　1器材与试药Anglent1100型高效液相色谱仪，HP1100/orusalbaL.，紫苏子Perillafrutescens（L．）Britt.,杏仁PrunusarmeniacaL.，茯苓Poriacocos（Schl/min，检测波长：283nm，柱温：25℃。其对照品、合煎液、分煎液和阴性对照液色谱图见图1。　　2.2溶液的制备　　2.2.1对照品溶液的制备　　精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇溶解，制成0.194mg/ml的溶液，备用。　　2.2.2合煎液供试品溶液的制备（传统煎液法）　　按处方量称取药材粉末（粗粉），加水300ml，浸泡20min，沸后30min，过

6、滤，滤渣加水300ml，沸后20min，过滤，合并两次滤液，浓缩，干燥，粉碎成粗粉，备用［3］。精密称取粗粉约0.2g，置于25ml容量瓶中，加入甲醇23ml，超声提取30min，冷至室温后定容至刻度，滤过，取续滤液过0.45μm滤膜，滤液作为合煎供试品溶液。　　2.2.3分煎液供试品溶液的制备　　按处方量分别称取麻黄等7味药材粉末，分别加8倍水，6倍水煎煮两次，合并两次滤液后，干燥，并粉碎成粗粉。将各药材粗粉混合均匀，精密称取相当于合煎处方生药的0.25g干膏，同上法制得分煎液样品溶液。　　2.2.4阴性对照溶液的制备　　按处方分别称取除陈皮以外的其余6味药材饮片，按上法制成阴性对照溶

7、液。　　2.3线性关系　　考察精密吸取橙皮苷上述对照品溶液精密吸取上述对照品溶液稀释成6个不同浓度，不同浓度的对照品溶液取相同体积进样，按相应色谱条件测定峰面积，以峰面积（A）对含量（C）作线性回归，得回归方程为：A＝0.0006C+0.0004，r=0.99995，结果在0.0485～0.2425μg范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系。　　2.4精密度实验　　精密吸取对照品溶液2μl注入高效液相色谱仪，连续进样5次，测定橙皮苷相