毛金丝桃提取物的体外抗菌实验论文

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1、毛金丝桃提取物的体外抗菌实验论文朱明熊元君马秀敏丁剑冰古丽娜沙比尔【关键词】毛金丝桃；,,,提取物；,,,体外抗菌实验摘要：目的探讨新疆毛金丝桃醇提取物在体外抗菌作用。方法采用连续稀释法对毛金丝桃醇提取物进行MIC、MLC实验研究。结果毛金丝桃提取物在体外对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等有一定的抑制作用。结论毛金丝桃提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等有一定的抑制作用，是具有开发价值的抗菌中草药。关键词：毛金丝桃；提取物；体外抗菌实验AntimicrobialTestinvitroofExtractsfromHypericum

2、hirsutumL.Abstract:ObjectiveToexploretheantinuzrobialaltionofextractsfromhirsutumlinrtro.MethodsTheMICMLCexperimentsonasaeruginosa.ConclusionTheextractsofhirsutumlhaveobviousinhibitionsomebacteria.Keyhirsutuml;Extracts;Antimicrobialtestinvitro毛金丝桃（Hypericumhirsutum）是金丝桃属（H

3、ypericumL）的一种，属于藤黄科（Guttiferae）。该属植物全世界约有400余种，其中我国约有55种、8个亚种，全国各地均有分布，尤以华东、华西、川北及新疆、贵州等地分布较为集中。该属植物多个品种为药用植物，传统中医学认为，具有清热解毒、收敛止血、利湿之功效.freell，用超声波清洗器超声30min后，在不断搅拌下浸提24h，过滤所得滤液回收乙醇后，加热浓缩成浸膏，再加入蒸馏水15ml，不断搅拌下浸提24h，过滤所得滤液回收乙醇后，加热浓缩成浸膏，再加入蒸馏水15ml，不断搅拌使浸膏溶解，并调整pH为7.4后，滤膜过滤除菌，配

4、成2g/ml醇提毛金丝桃药液15ml，装入无菌棕色瓶中放置冰箱保存，于48h内使用，以保证药效稳定。1.1.3菌种及培养金黄色葡萄球菌（ATCC29213）；绿脓杆菌（ATCC27853）；大肠杆菌（ATCC25922）；购自中国药品生物制品检定所，水解酪蛋白（MuellerHinton,MH）肉汤、琼脂培养基购自杭州生物试剂厂。实验菌种经传代纯培养后，取1接种环菌种接种于MH肉汤培养基中，37℃恒温箱培养6h，经比浊法测定细胞数为109CFU/ml，稀释至106CFU/ml为工作浓度。通过倾注平板法计数，实验中每毫升液体培养基加入0.1m

5、l细菌液，37℃24h恒温培养，计数后为最终实验浓度，其中金黄色葡萄球菌为3.6×105CFU/ml；绿脓杆菌为3.5×105CFU/ml；大肠杆菌为3.1×105CFU/ml。表1毛金丝桃的抑菌实验（略）“+++”细菌明显长；“++”细菌少量生长；“0”无菌生长1.2抑菌实验的方法与结果［6~10］采用液体培养基连续稀释法将被检药液用MH肉汤培养基作一系列倍比稀释为9管，使MH肉汤培养基含药浓度分别为133.3，66.5，33.25，16.63，8.31，4.16，2.08，1.04，0.52mg/ml。第10管不加药液为MH肉汤培养基接

6、种相同菌种作对照管，每支试管为1.8ml，然后每支试管加入0.2ml实验细胞液，置37℃培养24h，肉眼观察试管混浊情况，能抑制实验菌生长的最低浓度为毛金丝桃的最低抑菌浓度（Minimalinhibitionconcentration,MIC）。结果见表1。将澄清的未长菌各试管中取0.1ml培养液和10ml营养琼脂分别倾注平皿中，混匀凝固后置37℃培养24h（每管每个浓度均倒3块平皿）观察有无细菌生长，凡平板上无菌生长的该药物最低浓度为毛金丝桃的最低杀菌浓度（Minimallethalconcentration,MIC）。结果见表2。表2毛

7、金丝桃的杀菌实验（略）“+++”细菌明显生长；“++”细菌少量生长；“+”细菌少量生长；“0”取培养基再接种无菌生长2讨论毛金丝桃在新疆有着悠久的用药历史，临床应用广泛，近年虽然在药理学研究方面做了大量工作并取得了一定成果，但对其在抑菌实验方面的报道却很少，本实验采用连续稀释法进行毛金丝桃MIC的测定，对了解毛金丝桃有无抗菌作用、抗菌效果如何，确定毛金丝桃的用药剂量和研究抗菌机理等方面具有重要意义。毛金丝桃在水中溶解度差，易溶乙醇，用乙醇提取后需回收乙醇，并使药液的pH接近中性，才能保持药物的稳定性又不致影响试验菌的生长，但中药制剂内往往含

8、有鞣质，并且有特殊色泽，影响结果的判断，因此本实验还测定了毛金丝桃醇提取物在体外对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌均有一定程度的抑菌杀菌作用，毛金丝桃醇提取物对金黄色葡萄球菌、