毛金丝桃提取物的体外抗菌实验

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1、毛金丝桃提取物的体外抗菌实验朱明熊元君马秀敏丁剑冰古丽娜・沙比尔【关键词】毛金丝桃；,,,提取物；,,,体外抗菌实验　　摘要：目的探讨新疆毛金丝桃醇提取物在体外抗菌作用。方法采用连续稀释法对毛金丝桃醇提取物进行MIC、MLC实验研究。结果毛金丝桃提取物在体外对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等有一定的抑制作用。结论毛金丝桃提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等有一定的抑制作用，是具有开发价值的抗菌中草药。　　关键词：毛金丝桃；提取物；体外抗菌实验　　AntimicrobialTestinvitr

2、oofExtractsfromHypericumhirsutumL.　　Abstract:ObjectiveToexploretheantinuzrobialaltionofextractsfromhirsutumlinrtro.MethodsTheMICMLCexperimentsonasaeruginosa.ConclusionTheextractsofhirsutumlhaveobviousinhibitionsomebacteria.　　Keyhirsutuml;Extracts;Antimic

3、robialtestinvitro　　毛金丝桃（Hypericumhirsutum）是金丝桃属（HypericumL）的一种，属于藤黄科（Guttiferae）。该属植物全世界约有400余种，其中我国约有55种、8个亚种，全国各地均有分布，尤以华东、华西、川北及新疆、贵州等地分布较为集中。该属植物多个品种为药用植物，传统中医学认为，具有清热解毒、收敛止血、利湿之功效，用于治疗咯血、吐血、肠风下血、外伤出血、风湿骨痛、口鼻生疮等症〔1~3〕。近年来研究发现，该属植物中含有金丝桃素（Hypericin）和假

4、金丝桃素（Pesudohypericin）具有抗抑郁、抗肿瘤、抗病毒、镇痛、抗菌消炎、创伤收敛等药理活性。其中毛金丝桃在新疆阿勒泰一带分布较多，在新疆民间广泛应用，但对其他抑菌实验方面的报道却很少，笔者采用连续稀释法对毛金丝桃乙醇提取物进行了抑菌作用的测定，现将结果报道如下。　　1材料与方法　　1.1材料　　1.1.1药材毛金丝桃的全草2004-03由新疆中药民族药研究所提供及鉴定，其在水中溶解度差，易溶乙醇。　　1.1.290%乙醇提毛金丝桃药液的制备〔4，5〕称取一定量的毛金丝桃将其粉碎，过筛后得到

5、粗粉20g，加入90%乙醇100ml，用超声波清洗器超声30min后，在不断搅拌下浸提24h，过滤所得滤液回收乙醇后，加热浓缩成浸膏，再加入蒸馏水15ml，不断搅拌下浸提24h，过滤所得滤液回收乙醇后，加热浓缩成浸膏，再加入蒸馏水15ml，不断搅拌使浸膏溶解，并调整pH为7.4后，滤膜过滤除菌，配成2g/ml醇提毛金丝桃药液15ml，装入无菌棕色瓶中放置冰箱保存，于48h内使用，以保证药效稳定。　　1.1.3菌种及培养金黄色葡萄球菌（ATCC29213）；绿脓杆菌（ATCC27853）；大肠杆菌（ATC

6、C25922）；购自中国药品生物制品检定所，水解酪蛋白（MuellerHinton,MH）肉汤、琼脂培养基购自杭州生物试剂厂。实验菌种经传代纯培养后，取1接种环菌种接种于MH肉汤培养基中，37℃恒温箱培养6h，经比浊法测定细胞数为109CFU/ml，稀释至106CFU/ml为工作浓度。通过倾注平板法计数，实验中每毫升液体培养基加入0.1ml细菌液，37℃24h恒温培养，计数后为最终实验浓度，其中金黄色葡萄球菌为3.6×105CFU/ml；绿脓杆菌为3.5×105CFU/ml；大肠杆菌为3.1×105CF

7、U/ml。　　表1毛金丝桃的抑菌实验（略）　　“+++”细菌明显长；“++”细菌少量生长；“0”无菌生长　　1.2抑菌实验的方法与结果〔6~10〕采用液体培养基连续稀释法将被检药液用MH肉汤培养基作一系列倍比稀释为9管，使MH肉汤培养基含药浓度分别为133.3，66.5，33.25，16.63，8.31，4.16，2.08，1.04，0.52mg/ml。第10管不加药液为MH肉汤培养基接种相同菌种作对照管，每支试管为1.8ml，然后每支试管加入0.2ml实验细胞液，置37℃培养24h，肉眼观察试管混浊情

8、况，能抑制实验菌生长的最低浓度为毛金丝桃的最低抑菌浓度（Minimalinhibitionconcentration,MIC）。结果见表1。将澄清的未长菌各试管中取0.1ml培养液和10ml营养琼脂分别倾注平皿中，混匀凝固后置37℃培养24h（每管每个浓度均倒3块平皿）观察有无细菌生长，凡平板上无菌生长的该药物最低浓度为毛金丝桃的最低杀菌浓度（Minimallethalconcentration,MIC）。结果见表2。　　表2毛金丝桃的杀菌