叶下珠提取物体外抗菌活性的实验研究.pdf

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1、第19卷第3期新余学院学报V01．19．NO．32014年6月JOURNALOFXINYUUNIVERSIIYJun．2014叶下珠提取物体外抗菌活性的实验研究●杨映玲，戴卫波(1．广东省中山市古镇人民医院，广东中山528421；2．广东省中山市中医院，广东中山528401)摘要：目的：研究叶下珠乙醇和水提取物的体外抗茵活性。方法：以临床分离的6种菌株为供试茵，采用常量稀释法分别检测叶下珠乙醇、水提取物的体外最低抑茵浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)。结果：叶下珠乙醇和水提取物对6种菌株均有体外抑茵和杀

2、菌活性。叶下珠水提取物对产BLs金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌及产ESBLs阴性大肠杆菌的MIC分别为1．953goL。。、1．953goL～、7．8125goL～、3．90625goL～，抑菌作用强，对产BLs金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和产ESBLs阴性大肠杆菌的MBC分别为3．90625goL～、3．90625goL～、31．25go～，杀菌作用强。结论：叶下珠提取物对多种病原茵有不同程度的抗茵活性，可供开发此药用资源作参考。关键词：叶下珠；抗茵活性；实验研究中图分类号：R96文献标识码：A文章

3、编号：2095—3054(2014)O3—0o20—03叶下珠又名珍珠草、夜合草、阴阳草、油柑草等，医院、中山市中医院分离，由中山医学院微生物学教是大戟科植物PhyllanthusurinariaL．的带根全草，为研室提供。广东地产药材，具有清热利尿、平肝明目、消积、解1．1．3主要仪器毒、止泻的功效Ll0。现代临床及民间应用均表明其恒温培养箱(上海瑞稳仪器设备厂，型号：DHP在肾炎水肿、肾盂肾炎、尿路感染等多类泌尿系感染一9272)；医用净化工作台(北京东联哈尔仪器制造疾病有很好的疗效，是中山市中医院医院

4、制剂利尿有限公司，型号：DL—CJ一1N)；高压灭菌器(四川省合剂的重要处方组成，也是国医大师邓铁涛教授治新德医疗器械有限公司，型号：YXQ—L31—400)。疗泌尿系统感染常用药之一，具有很好的药用开发1．1．4试剂价值。本试验对叶下珠乙醇和水提取物的抗菌活性MH琼脂、MH肉汤均为杭州天和微生物试剂有进行研究，以期为叶下珠的临床应用提供科学依据。限公司产品，批号：20120615和20120608。1材料与方法1．2方法1．1材料1．2．1体外抑菌试验1．1．1受试药采用常量肉汤稀释法_3测定叶下珠乙醇、

5、水提叶下珠购自广州市药材公司，经广东药学院田取物的MIC。素英副教授鉴定为大戟科植物叶下珠Phyllanthus1．2．1．1药液培养基的制备urinariaL．的带根全草。分别取50℃恒重的叶下珠在无菌操作台上，用MH肉汤作二倍递减浓度稀100g，粉碎后各经95％乙醇和蒸馏水回流提取、真空释已配制好的叶下珠．乙醇、水提取物药液(0．5g·干燥，将提取物用蒸馏水稀释成浓度为0．5g／mL。溶mL)，即按1：2，1：4，1：8，⋯，1：256比例将药液依解物过滤，经l15．6clc高压灭菌20min后，4℃保

6、存备次稀释，药液最终浓度分别为0．25，0．125，0．0625，用。⋯0．001953g·L一。，1．1．2菌株1．2．1．2菌株的接种与培养临床分离菌株6个，为产B一内酰胺酶(BLs)的取灭菌带棉塞试管1000支，分别加入上述不同金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌，产超广谱浓度药液培养基各1mL，然后分别加入0．1mL相应酶(ESBLs)阴性的大肠杆菌、绿脓杆菌及肺炎克雷伯菌液(将9号试管作为阴性对照，不加菌液，只加入杆菌，所有菌株均为临床菌株，2012年从中山市人民最低稀释倍数的药液，观察药液或肉汤

7、是否被污染；收稿日期：2014—03—16基金项目及第一作者简介：2013年中山市科技计划项目《叶下珠防治泌尿系感染药学研究及制剂二次开发》(20132A166)。杨映玲(1977一)，女，广东梅州人，主管药师。杨映玲，戴卫波：叶下珠提取物体外抗菌活性的实验研究将10号管作为阳性对照，不加药液，只加入肉汤和菌养(37℃，18～20h)。未见细菌生长或菌落数少于5液，观察细菌是否正常生长)。所有试管置于恒温培个的最低药液浓度即为药液的MBC。养箱中培养(37℃，18～20h)，观察并判定叶下珠乙2结果醇、水提

8、取物对每种菌株的MIC。2．1叶下珠乙醇、水提取物的MIC1．2．1．3体外MIC的确定叶下珠水提取物对临床分离的产BLs金黄色葡培养后目测各试管，试验管澄明，且摇匀后仍澄萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌和产ESBLs阴性大肠明，则表明试管内液体无菌生长，受试药液有抑菌活杆菌、绿脓杆菌菌株的MIC均低于叶下珠乙醇提取性；试验管混浊，表明试管内液体有菌生长，受试药物，而产ESBLs阴性肺炎克雷伯杆菌的MIC高于叶液无抑