医学毕业论文白眉蝮蛇蛇毒中l

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1、白眉蝮蛇蛇毒中L姓名:2014年6月25日白眉蝮蛇蛇毒中L作者:魏晓龙,魏继福,黄阗,陈秋玉,刘岳宁,何韶衡【关键词】LAcutelunginjuryinducedbyLaminoacidoxidasepurifiedfromAgkistrodonblomhoffiiussurensisvenom【Abstract】AIM:TopurifytheLaminoacidoxidasefromAgkistrodonblomhoffiiussurensisvenomandstudyitseffectonlung.M

2、ETHODS:AnLaminoacidoxidasewaspurifiedfromthesnakevenomofAgkistrodonblomhoffiiussurensis(ABULAO)byusingacombinationofHeparinSepharoseFFcolumnandQSepharoseHPcolumn.TheBALB/cmicewereinjectedivwith50,5,0.5jigABULAOorsaline.At6or24hfollowinginjection,miceweresa

3、crificedandthelungsweredissected.Sections(4pm)werepreparedandstainedwithhematoxylineosinforlightmicroscopicobservation.Themeannumbersofredbloodcells(RBCs),intraalveolarpolymorphonuclearleucocytes(IAPLs),alveolarseptapolymorphonuclearleucocytes(ASPLs)inahig

4、hpowerfieldandmeanalveolarcavityarea(MACA)withimagesoftwarewerecalculated.RESULTS:ABULAOwaspurifiedtoelectrophoretichomogeneity.Themolecularweightoftheenzymeis60kDwhenexaminedbySDSpolyacrylamidegelelectrophoresis.ThecalculationsofRBCs,IAPLs,ASPLsandMACAinm

5、icetreatedwithABULAOweresignificantlyhigherthanthosetreatedwithsaline(P0.0125).CONCLUSION:ABULAOwaspurifiedbyatwostepchromatographicprocess.Theenzymecaninduceseriousacutelunginjurywhenbeinginjectedintomice.【Keywords】Laminoacidoxidase;Agkistrodonblomhoffiiu

6、ssurensis;Acutedisease;lung/injuries;mice,inbredBALBC【摘要】目的:从白眉蝮蛇蛇毒分离纯化L氨基酸氧化酶,并研究其对肺组织的影响.方法:通过HeparinSepharoseFF及QSepharoseHP从白眉腹蛇蛇毒中分离纯化得到一个L氨基酸氧化酶,命名为ABULAO.给Balb/c小鼠静脉注射50,5,0.5(ig药物或生理盐水100pL,每组6只,6h或24h后取材,肺组织常规切片,HE染色.高倍镜视野下计算平均红细胞数(RBCs)、平均肺泡内多形核白

7、细胞数(IAPLs)、平均肺泡隔多形核白细胞数(ASPLs);用图像分析仪测平均肺泡面积(MACA).结果:纯化ABULAO并在SDSPAGE上测定其表观Mr约为60000.与生理盐水组相比RBCs,IAPLs,ASPLs,MACA在注射ABULAO后有显著改变(P0.0125).结论:通过两步层析法分离纯化得到ABULAO,它能诱导小鼠发生严重的急性肺损伤.【关键词】L氨基酸氧化酶;白眉蝮蛇;急性病;肺/损伤;小鼠,近交BALBC0引言L氨基酸氧化酶广泛存在于蛇毒中.它能专一催化L氨基酸的脱氨基作用,生成

8、相应的ot酮酸、氨和过氧化氢[1].该酶有抗菌、诱导水肿、溶血、出血、抗病毒、诱导细胞凋亡等活性[2].我们从白眉蝮蛇蛇毒中分离得到一个L氨基酸氧化酶并通过SDSPAGE测定其表观Mr约为60000,并对其诱导的急性肺损伤进行Y研究,对进一步了解该酶的毒理作用及为临床诊治提供一些参考数据.1材料和方法1.1材料4〜6wk的Balb/c小鼠48只,雌雄各半,体质量(20士2)g.按ABULAO剂量(0.5,5和50

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