不同海参多糖的分离纯化与生化性质分析

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1、不同海参多糖的分离纯化及生化性质分析摘要海参(SeaCucumber)是我国一种传统的名贵滋补品，体内富含多种生物活性物质，具有较高的食用及药用价值。在我国，人们对于海参及海参制品的需求随生活水平的提高而日益增加。海参多糖是海参体内最重要的生物活性物质之一，具有抗凝血、抗血栓、降血脂和抑肿瘤等多种活性。海参多糖主要由海参硫酸软骨素(SC．CHS)和海参岩藻聚糖硫酸酯(SC—FUC)2种多糖组成。本论文以9种不同种类和不同生长海域的海参为研究对象，对其体壁中的SC．CHS和SC—FUC进行了系统的生化性质分析，为海参种类的鉴别、海参品

2、质的评价以及海参制品质量标准的建立，提供了理论基础和科学依据，具有重要的理论意义和应用价值。主要内容包括以下几个部分：1．采用温和的酶提取法获得了9种海参粗多糖，通过DEAE．52离子交换层析进分级纯化出SC．CHS和SC．FUC2种组分，由高效凝胶过滤色谱法和醋酸纤维薄膜电泳法进行了纯度鉴定。SC．CHS的分子量为12．49．21．53万，SC—FUC分子量在70万以上。比较而言，温带海域海参富含SC．CHS，热带亚热带海域的海参富含SC．FUC，而寒带海域海参2种组分的比值介于前两者之间。2．采用柱前衍生．HPLC法和离子色谱法

3、分别对SC．CHS和SC．FUC进行了单糖组成分析、硫酸基含量测定。建立了三氟乙酸水解一离子色谱(IC)测定海参多糖中硫酸根的方法。SC．CHS的组成单糖在种类上为类硫酸软骨素的特征，主要由葡萄糖醛酸(GlcUA)、氨基半乳糖(GlaN)和岩藻糖(Fuc)构成，它们之间的摩尔比呈现一定的种间差异。SC．FUC的单糖组成则以岩藻糖为主。海参粗多糖的硫酸基(S042-)含量为23．61％．31．03％，SC．CHS和SC-FUC的S042。含量分别为27．52％一32．66％、23．42％．29．31％。SC?CHS的硫酸基含量高于同种

4、海参的SC．FUC。单糖组成分析和硫酸基含量的准确测定对于质量评价标准的建立、海参多糖的活性研究具有重要意义。3．以SC．CHS为重点研究对象，对SC．CHS和SC．FUC进行了IR和1HNMR·不同海参多糖的分离纯化及生化性质分析分析。由瓜初步分析SC．CHS岩藻糖支链上硫酸基取代，不同SC．CHS的红外吸收具有一定的特征差异。红外光谱操作简便、费用低廉，可以作为海参SC．CHS初步分析鉴定的方法。经1HNMR分析，根据SC．CHS硫酸酯化岩藻糖支链上异头氢信号和不同海参的生长海域特征，可以将岩藻糖支链上硫酸基取代归纳为4种类型：

5、1)寒带海域海参：以2，4一diOS03、3,4．diOS03双取代为主，含部分4．OS03取代；2)温带海域海参：以2，4．diOS03取代为主，含部分4．OS03取代；3)热带亚热带海域海参：只含有2，4．diOS03取代，或以2，4．diOS03取代和4．OS03取代为主，含部分非硫酸酯化的岩藻糖；4)亚热带热带海域的Sandfish的硫酸软骨素岩藻糖上硫酸基取代类似于温带海域海参，但4．OS03取代更多。以1HNMR分析确定SC．CHS中硫酸酯化岩藻糖支链上硫酸基的取代类型，为SC—CHS的构效关系研究提供了重要的科学依据。

6、4．建立了市售不同海参制品中海参多糖含量的HPLC澳f]定方法。该方法以岩藻糖单糖转化系数为媒介，经PMP．HPLC澳JJ定不同海参制品中海参多糖的含量。该方法具有准确、灵敏的特点，可应用于多种海参制品中总多糖含量的测定，并为海参质量标准的建立提供了基础方法。关键词：海参硫酸软骨素；化学组成；岩藻糖支链；硫酸基：差异2不同海参多糖的分离纯化及生化性质分析■一■●一●一■●■●’■rlSOIation．puritIcationandcharacterizationotdifferentkindsofseacucumberpoIysac

7、charidesAbstractSeacucumberisatraditionalcostfultonicfoodinChina，whichcontainsmulti·kindsofbioactivecomponents．Itiswellknownthatholothuriansareofhavemghnutritionandpharmicvalues．Inourcountry,thedemandforseacucumberandseacucumberproductsisincreasingwitllthelivingstandar

8、dimproving．Polysaccharidesisoneofthemostimportantbioactivecompositioninseacucumber,ithasbeenprovedtoexhibitvariousbio