莱菔子多糖的分离纯化、生化鉴定及功能性质的初步的研究

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1、摘要莱菔子作为药食同源植物材料，在我国有着悠久的使用历史和广泛的来源。莱菔子具有诸多保健功能，如抗菌、降压、祛痰镇咳平喘、增强消化道运动和抗肾上腺素的作用。目前，对莱菔子功能成分的研究主要在水溶性生物碱与莱菔子素，对其多糖成分的研究较少。本文对莱菔子(SemenRaphani)多糖的提取、分离纯化、理化性质、抑菌及保鲜作用等进行了较为系统的研究，为莱菔子的开发利用提供了科学依据，对充分利用我国中药资源具有重要意义。通过单因素实验与正交实验研究确定了莱菔子多糖热水浸提及微波辅助提取的最佳工艺参数分别为

2、：料液LLI：35，浸提温度75℃，热水浸提时间3h，浸出率为6．85％．微波功率540W，料液比1：30，微波处理10min，浸出率达5．63％。实验结果表明，微波辅助能明显缩短浸提时间，提高多糖浸出率。莱菔子多糖醇沉工艺的研究结果表明，浸提液加入4倍体积无水乙醇，醇沉4h，沉淀得率最大。分别采用Sevag法、三氯乙酸法和三氯乙酸．正丁醇法脱除莱菔子粗多糖中蛋白质，对3种脱蛋白方法的工艺进行研究，得到各自的最佳工艺参数，并进行比较。研究发现：莱菔子多糖宜采用三氯乙酸．正丁醇法脱蛋白，最佳工艺参数：

3、样液与三氯乙酸．正丁醇混合液体积比1：2，三氯乙酸与正丁醇体积比1：15，振荡时间30min，静置时间1h，蛋白脱除率达68．68％，多糖损失率仅为14．71％，具有较好的脱蛋白效果。对粉末活性炭与过氧化氢2种脱色方法的工艺研究结果表明：粉末活性炭有一定的脱色效果，但多糖损失较严重，莱菔子多糖采用H202脱色率明显高于粉末活性炭脱色。莱菔子粗多糖经脱蛋白、脱色、透析除杂，得到莱菔子多糖SRP。SRP经DEAE一纤维素柱层析，分别用磷酸盐缓冲液，NaCL溶液，NaOH溶液洗脱，收集磷酸盐洗脱的主要组分

4、，记为SRPa。SRPa经SephadexG．200凝胶柱层析，洗脱曲线呈单一峰，同时用醋酸纤维薄膜电泳进行纯度鉴定。实验结果表明SRPa是均一中性多糖。采用SephadexG．200凝胶法和HPLC法测定SRPa分子量，结果分别为60228和59401。摘要研究了莱菔子多糖SRP的抑菌及保鲜作用。MIC实验结果表明：莱菔子多糖SRP对黑曲霉抑制作用较明显，MlC为10班。莱菔子多糖作为涂膜保鲜剂试材，在常温(25+2。C)条件下能有效抑制苹果、樱桃番茄体内营养物质的消耗，降低失水率，延缓果实的衰老

5、过程。关键词：莱菔子；多糖；提取；分离纯化；抑菌保鲜IIAbstractABSTRACTSemenRaphanithatisknownasatraditionalChinesemedicinalplant，hastheage—oldhistoryandbroadsource．Itpossesseslotsofphysiologicalfunctionssuchasantibacterial，antihypertensive，facilitatingexpectoration,suppressingc

6、oughandrelievingdyspnea,strengtheninggastrointestinalmovementandanti—adrenergic．Atpresent，mostresearchsofSemenRaphaniwerefocusedonSFNandalkaloidextractedfromit，andfewwerereportedOilpolysaccharide．Inthisthesis，theextraction，isolation，purification，gradat

7、ionandphysical—chemicalcharacteristics，aswellastheimpactofpolysaccharidefromSemenRaphanionantimicrobialandpreservationwerestudied．ThisresearchprovidesscientificreferenceforthefurtherstudyanddevelopmentofSemenRaphani弱aChinesemedicinalplant．Onthebasisofs

8、inglefactorexperiments，orthogonaldesignWasadoptedtosearchtheoptimumtechnologicalconditionsforhotwaterextractionandmicrowave-assistedextraction．Theresultshowedthatoptimumparameterasfollows：75℃ofextractiontemperature，3hofextractiontime，1：