不同底物诱导下白囊耙齿菌的酶学性质及胞内蛋白质组学分析

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1、万方数据学校代码：10225学号：S14556学位论文不同底物诱导下白囊耙齿茵的酶学性质及胞内蛋白质组学分析指导教师姓名：申请学位级别：论文提交日期：授予学位单位：李海峰王秋玉教授东北林业大学硕士学科专业：遗传学2014年4月论文答辩日期：2014年6月14日东北林业大学授予学位日期：2014年6月25日答辩委员会主席：论文评阅人：春多厶栉景犬学万方数据UniversityCode：10225RegisterCode：S14556DissertationfortheDegreeofMasterEnzymaticpropertiesandintra

2、cellularproteomicanalysisoflrpexlacteusinducedbydifferentsubstratesCandidate：Supervisor：AssociateSupervisor：AcademicDegreeAppliedfor：Speciality：Dateof0ralExamination：University：LiHaifengProf．WangQiuyuMasterGeneticsJune，2014NortheastForestry万方数据摘要本文以木材白腐真菌．白囊靶齿菌为研究材料，探讨其在PDA固体

3、平板培养基中生长趋势，发王见它与大多数真菌生长特点一样，即起始较为缓慢，之后生长迅速呈指数上升，最后转为平缓增长。在不同的培养温度下(23℃、28℃)，其生长速度差异较大，在28℃条件下的生长速度高于23℃条件，说明白囊靶齿菌更适合在28℃下生长。采用白桦和云杉木屑为诱导物，非木屑处理为对照，检测了白囊靶齿菌分泌的木质纤维素酶活性，研究显示该菌分泌的木质素降解酶中漆酶活性最强，木质素过氧化物酶次之，锰过氧化物酶活性最低。木屑诱导下的白囊靶齿菌产生的木质素降解相关酶酶活性大都高于对照样品，且锰过氧化物酶和漆酶活性在处理组与对照组间差异达显著和极显著

4、水平。纤维素酶酶活中葡萄糖外切酶活性远大于葡萄糖内切酶活性，而外切酶活性随培养时间增加而上升，内切酶活性是先上升后下降，两种酶活总体上趋于稳定，表达量较高，受培养时间的影响变化不明显。利用2-DE双向电泳和考染串联．质谱技术分析了白囊耙齿菌在不同树种木屑诱导下的菌体胞内蛋白质组变化，未加木屑的对照组检测到823个蛋白质点，白桦处理组检测到673个蛋白质点，云杉处理组检测到684个蛋白质点。与对照组相比，在白桦和云杉木屑处理组中检测发现32个明显差异蛋白点，有22个蛋白点是上调表达，10个蛋白点下调表达。白桦和云杉处理组各有3个特异差异蛋白点，白桦

5、木材诱导下特异表达蛋白与膜蛋白、膜运输和能量提供有关，而云杉诱导组特异表达蛋白均与蛋白合成有关。在全部的差异蛋白点中有三个蛋白点与哺乳动物的蛋白质有很高的同源性。而675、506、508、228、和211五个差异蛋白点的质谱结果显示为假设蛋白，其功能目前还不明确，可能是新发现蛋白质。其余的22个差异蛋白点的功能包括有机物质代谢蛋白、ATP合成蛋白、物质运输蛋白、呼吸作用蛋白、转录／翻译蛋白、能量代谢蛋白、氧化还原蛋白、调节蛋白等。在胞内蛋白质组检测中几乎没有发现木质纤维素降解酶差异表达，也进一步证实该菌木质纤维素酶类为胞外分泌酶。关键词：白囊耙齿

6、菌；木质纤维素酶；蛋白质组；差异表达万方数据AbstractInthispaper，thewhite—rotfungus(Irpexlacteus)isusedasthematerials，thefungalgrowthinPDAsolidplatemediumisinvestigated．Theresultshowsthatitsgrowthcharacteristicsissimilarwiththemostotherfungi，withslowstart，thenrapidexponentialrise，finallyfiatgrowth．

7、Indifferentculturetemperatures(23℃，28℃)，itsgrowthrateiscleardifferentwhenthefungalgrowthat28℃isfasterthanthatat23℃．indicatingthatthetemperatureof28。Cismoresuitableforthegrowthofthefungus．Usingbirchandsprucesawdustastheinducerandwithoutinducerasthecontr01．thelignocellulosicenz

8、ymeactivitysecretedbythefungusisdetected．Theresultdisplaysthatthelac