尼罗罗非鱼和奥尼罗非鱼幼鱼蛋白质营养需求研究

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PROTEINREQUIREMENTOFJUVENILENILETILAPIA(Oreochromisniloticus)ANDHYBRIDTILAPIA(OreochromisniloticusxO．aureus)ByXuQiqunSupervisor：Prof．YangHongAThesisSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementForMasterDegreeofAquacultureWuxiFisheryCollegeNanjingAgriculturalUniversityWuXi214081December2012 研究生学位论文原创性声明J；YIIIIl2U36H11lIM7。H6本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：么姗I学位论文版权使用授权书扩哞7明歹日本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。?保密口，在——年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密邑(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名：导师签名：7胁弘彳他劭f汐jz年fz，月歹日工引z年严月3日 目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯IuABSTRACT⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．V第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．12影响鱼类蛋白质需求量的因素⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一12．1试验设计与统计方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．12．2食性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22．3个体大小和发育阶段⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42．4蛋白源⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52．5非蛋白能量⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52．6温度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62．7盐度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．62．8日投喂量⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73罗非鱼蛋白质需求量的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一74本研究的目的及意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．9第二章尼罗罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．111前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．112材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112．1试验饲料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l12．2试验分组饲养管理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132_3测定指标与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132．4数据统计与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．143结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯143．1饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼生长性能的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．143．2饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼体组成的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．163．3饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼血液指标的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．163．4饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼肝脏非特异性免疫指标的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．174讨论⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．184．1饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼生长性能的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯184．2饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼体组成的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯194．3饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼血液指标的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．194．4饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼肝脏非特异性免疫指标的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．195结j沧⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一20第三章奥尼罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．211前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯212材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯212．1试验饲料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯212．2试验分组饲养管理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22 目录2．3测定指标与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232．4数据统计与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．243结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243．1饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼生长和饲料利用的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．243．2饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼体组成血液指标的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．253．3饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼肝脏非特异性免疫指标的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．263．4饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼抗病力的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．27z}讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．274．1饲料蛋白质水5I‘对奥尼岁非鱼幼鱼生长和饲料利用的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯274．2饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼体组成血液指标的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯284-3饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼肝脏非特异性免疫指标的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．284．4饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼抗病力的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．295结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一29全文总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33致谓|⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43攻读硕士学位期间发表的学术论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45II 摘要尼罗罗非鱼和奥尼罗非鱼幼鱼蛋白质营养需求研究以鱼粉、豆粕、棉粕、菜粕、酪蛋白和明胶为蛋白源配制成5组蛋白质水平分别为25％、30％、35％、40％和45％的等能饲料(脂肪含量为9％)，探讨饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼和奥尼罗非鱼幼鱼生长、饲料利用和免疫功能的影响。(1)蛋白质水平对尼罗罗非鱼的终体重、增重率、特定生长率、饲料系数、成活率、肥满度、肝体比和内脏比不产生显著影响(黔0．05)。蛋白质效率随蛋白质水平的增加显著下降(P<0．05)。蛋白质水平对罗非鱼幼鱼鱼体水分、粗蛋白质和灰分含量影响不显著(P>0．05)，但显著影响了鱼体粗脂肪的含量(P<0．05)。25％蛋白质组尼罗罗非鱼粗脂肪含量显著高于其他组(P<0．05)。饲料蛋白质水平不会对尼罗罗非鱼鱼血液白细胞总数、红细胞总数和红细胞压积产生显著的影响(P>0．05)，然而会对血红蛋白含量有显著的影响(P<0．05)，蛋白质水平为40％的实验组的血红蛋白含量显著高于25％的实验组伊>0．05)。蛋白质水平对罗非鱼血清中的肌酐、总蛋白、白蛋白、球蛋白、碱性磷酸酶、甘油三酯和胆固醇的含量无显著的影响(尸>0．05)。25％蛋白质组尼罗罗非鱼肝脏溶菌酶(LzM)活性最低，显著低于其它组(尸<0．05)。各实验组之问肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活性无显著差异(胗O．05)。45％蛋白质组尼罗罗非鱼肝脏丙二醛(MDA)含量最高，显著高于其它组(P<0．05)，其余四组之间差异不显著(胗0．05)。综合以上结果，在脂肪含量为9％条件下，尼罗罗非鱼幼鱼饲料中蛋白质含量为25％可以满足生长需求，然而机体的溶菌酶(LZM)活性相对于高蛋白饲料组的罗非鱼较低，这表明肝脏非特异性免疫功能较弱。(2)饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼生长和饲料利用率以及成活率不产生显著影响，蛋白质效率和蛋白质沉积率伴随着蛋白水平的升高显著下降。35％(D35)饲料组奥尼罗非鱼肝脏过氧化氢酶含量显著高于其它饲料组，然而奥尼罗非鱼肝脏溶菌酶、超氧化物歧化酶活性以及丙二醛含量并不受饲料蛋白水平的影响。无乳链球菌攻毒实验结果表明，蛋白水平对奥尼罗非鱼在攻毒后24tJ',时和48d'．时后的累积死亡率不存在显著影响。本实验的结果表明24．8％(D25)蛋白水平饲料能够满足奥尼罗非鱼正常生长、以及维持机体正常的非特异性免疫功能和抗病力的营养需求。关键词：尼罗罗非鱼；奥尼罗非鱼；蛋白质水平；生长；饲料利用；免疫功能III ABSTRACTPROTEINREOUIREMENT0FJUVENILENILETILAPIA(Oreochromisniloficus、)ANDHYB对DTILAPIA(OreochromisiloticusX0．aureus)UreochromlSmlotzcusXaureus1．．1．Thestudywasconductedtodeterminetheeffectofdietaryproteinlevelongrowthperformance，feedutilizationandimmunefunctioninjuvenileNiletilapiaandhybridtilapia(OreochromisniloticusxO．aureus)．Fishmeal，soybeanmeal，cottonseedmeal，rapeseedmeal，caseinandgelatinwereusedasproteinsourcetoformulatefiveisoenergeticexperimentaldiets(9％offatcontent)atvariousproteinlevels(25％，30％，35％，40％and45％)．(1)Theresultsshowedthatfinalbodyweight，weightgain(WGR)，specificgrowthrate(SGR)，feedconversionration(FCR)，survivalrate(SR)，conditionfactor,hepatosomaticindex(HSI)，viscerosomaticindex(VSI)werenotsignificantlyaffectedbydietaryproteinlevel(尸>O．05)．Proteinefficiencyratio(PER)wassignificantlydecreasedwiththeincreaseofdietaryproteinlevel．Moisture，crudeproteinandashcontentsofwholebodywerenotsignificantlyaffectedbydietaryproteinlevel(胗0．05)，buttotalfatcontentinwholebodywassignificantlyaffectedbydietaryproteinlevel(P<0．05)．Wholebodytotalfatcontentoffishfed25％dietaryproteindietwassignificantlyhigherthanthoseofotherdiettreatmentsWhitebloodcellcount(W-BC)，redbloodcellcount(RBC)andhaematocrit(HCT)werenotsignificantlyaffectedbydietaryproteinlevelpO．05)，buthaemoglobin(HB)wassignificantlyaffectedbydietaryproteinlevel(P<0．os)，haemoglobinoffishfed40％dietaryproteindietwassignificantlyhigherthanthatoffishfed25％dietaryproteindiet沪0．05)。各组试验鱼的饲料系数、成活率、肥满度、肝体比和内脏比无显著差异(尸>O．05)。饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼蛋白质效率和蛋白质沉积率有显著影响(P<0．05)。尼罗罗非鱼幼鱼蛋白质效率随饲料蛋白质水平的增加而显著降低(P<0．05)，以蛋白质水平为25％的组最高，蛋白质水平为45％的组最低。罗非鱼幼鱼蛋白质沉积率随饲料蛋白质水平的 第二章尼罗罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究增加呈现先升高后下降的趋势，蛋白质水平为25％和30％的组显著高于蛋白质水平为35％、40％和45％的组(P0．05)表2-2饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼生长性能的影响Table2-2EffectsofdietaryproteinlevelOilgrowthperformanceofjuvenileNiletilapia,OreochromisHfloticus注：同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(尸>0．05)，不同小写字母表示差异显著(尸<0．05)，不同大写字母表示差异极显著(p0．01)。下表同。Note：Inthesamerow,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(尸>0．05)，whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference妒<0．05)，andwithdifferentcapitallettersuperscriptsmeansignificantdifference作，>0．01)．Thesameasbelow．15 尼罗罗非鱼和奥尼罗非鱼幼鱼蛋白质营养需求研究3．2饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼体组成的影响由表2—3可知，饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼全鱼粗脂肪含量有显著影响(P0．05)。尼罗罗非鱼全鱼粗脂肪含量随饲料蛋白质水平的增加变化趋势不明显，以蛋白质水平为25％的组最高，显著高于其他各组(P<0．05)，其他各组问差异不显著(p0．05)。表2．3饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼体组成的影响(湿重基础)Tabe3EffectsofdietaryproteinlevelonbodycompositionofjuvenileNiletilapia，Oreochromisniloticus(wetweightbasis)注：同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(，>0．05)，不同小写字母表示差异显著(P<0．05)，不同大写字母表示差异极显著(尸>0．01)。Note：Inthesamerow,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(扮O．05)，whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference(户<0．05)，andwithdifferentcapitallettersuperscriptsmeansignificantdifference(尸>O．o1)．3-3饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼血液指标的影响由表2-4可知，饲料中不同蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼全血中血红蛋白含量有显著影响(P<0．05)，而对全血中白细胞、红细胞含量以及红细胞压积无显著影响(胗O．05)。尼罗罗非鱼全血中血红蛋白含量随饲料蛋白质水平的增加呈现上升的趋势，蛋白质水平为40％的组最高，蛋白质水平为25％的组最低，这2组间差异显著(P<0．05)，其他组间差异不显著(P>0．05)。饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼血清中肌酐、总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、胆固醇含量以及碱性磷酸酶活性均无显著影响(pO．05)。16 第二章尼罗罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究表2．4饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼血液指标的影响Table2-4EffectsofdietaryproteinlevelonhematologicalindexesofjuvenileNiletilapia,Oreochromisniloticus注：同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(尸>O．05)，不同小写字母表示差异显著(尸<0．05)，不同大写字母表示差异极显著(p0．01)。Note：Inthesamerow,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(胗0．05)，whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference妒O．01)．3．4饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼肝脏非特异性免疫指标的影响由表2—5可知，饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼肝脏中溶菌酶、过氧化氢酶活性以及有显著的影响(P<0．05)。肝脏中溶菌酶活性以蛋白质水平为45％的组为最高，显著高于蛋白质水平为25％的组(尸<0．05)，但与蛋白质水平为30％、35％和40％的组相比无显著差异(胗O．05)。肝脏中过氧化氢酶活性随饲料蛋白质水平的增加呈现先上升后下降的趋势，以蛋白质水平为25％的组最低，显著低于蛋白质水平为35％和45％的组(尸O．05)，不同小写字母表示差异显著俨0．01)。Note：Inthesamerow,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(扮0．05)，whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference(P<0．05)，andwithdifferentcapitallettersuperscriptsmeansignificantdifference(P>O．01)．4讨论4．1饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼生长性能的影响大量的研究表明鱼类的生长和对饲料的利用效率受饲料蛋白质水平影响【59；75；761。然而，本试验结果表明，以增重率、特定生长率、成活率为指标，在本试验设计的饲料蛋白质水平范围(25％～45％)内，当饲料脂肪(鱼油和豆油的等量混合物)水平为9％(分析值为9．52％)时，尼罗罗非鱼幼鱼的生长性能不受饲料蛋白质水平的影响，饲料中蛋白质水平为25％(分析值为24．83％)即可满足尼罗罗非鱼幼鱼的生长需要，同时蛋白质效率和蛋白质沉积率均较高。本试验得出的尼罗罗非鱼幼鱼的蛋白质需求量低于Hafedh[硎和Abdel．Tawwab等【62】报道的结果(35％～45％)，这可能与本试验设计的饲料脂肪水平较高有关。本试验设计的饲料脂肪水平为9％(分析值为9．52％)，高于尼罗罗非鱼的对脂肪的最低需求量(5．1％)，得出的蛋白质需求量相对较低，表明通过提高饲料中脂肪水平，可以在不影响生长的情况下，起到降低尼罗罗非鱼幼鱼蛋白质需求量的作用。在大西洋鲑鱼177‘791和鲶鱼[80】上的研究也得出提高饲料中脂肪水平可以起到降低鱼类对蛋白质的需求量，即脂肪可以对蛋白质起到节约作用。 第二章尼罗罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究4．2饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼体组成的影响本试验中，罗非鱼全鱼粗脂肪含量受饲料蛋白质水平的影响显著，其中蛋白质水平为25％的组全鱼粗脂肪含量显著高于其他各组；而全鱼的水分、蛋白质和灰分含量各组间差异不显著。本试验设计的各试验饲料是保持等脂水平的，高蛋白质饲料含有较低的淀粉水平(表1)：相反，低蛋白质饲料含有较高的淀粉水平。在对其他鱼类的研究中发现，饲料可消化淀粉水平较高会引起糖原在肝脏中积累，造成肝体比升高[81-83】。同时，Yang等剐对银鲈的研究发现，肠系膜脂肪含量和肝体比会伴随着饲料淀粉水平的减少而降低。然而，本试验中各组问肝体比不存在显著差异，由此推断摄食低蛋白质饲料的尼罗罗非鱼幼鱼能够有效利用过多的糖原转化成鱼体脂肪，即具有高效利用饲料中淀粉的能力。4．3饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼血液指标的影晌本试验中，随着饲料蛋白质水平的增加，尼罗罗非鱼幼鱼全血中血红蛋白含量呈现先上升后下降的趋势，这与Kang—Woong等【851报道的牙鲆全血中血红蛋白含量伴随着饲料蛋白质水平的增加呈现先上升后下降的趋势相同。本试验中，饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼全血中白细胞、红细胞含量以及红细胞压积均无显著影响，这与Welker掣86】报道的相同规格健康罗非鱼血液指标相似，由此可知，25％的饲料蛋白质水平已经可以满足血液细胞的形成和发育。由于血红蛋白含量、红细胞压积和红细胞总数同鱼类的非特异性免疫功能具有一定的相关性，能够反映鱼类健康状况，高含量的血红蛋白被认为是动物健康的表现。在本试验中，血红蛋白的上升趋势表明饲料蛋白质水平较高时对鱼类的健康具有促进作用。正常情况下，鱼类血清生化成分含量受神经和内分泌调节保持相对稳定，可以作为机体健康状况的评价指标。本试验中，饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼血清中肌酐、总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯和胆固醇含量以及碱性磷酸酶活性均无显著影响，且这些血液生化指标都属于健康范围[87】之内。由此可见，25％的饲料蛋白质水平即可满足尼罗罗非鱼幼鱼机体正常的生理代谢需求。4．4饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼肝脏非特异性免疫指标的影响鱼体中的溶菌酶是一类有溶菌活性的碱性蛋白，在水产动物抵抗病原微生物感染中具有重要作用188；891，其活性的高低是衡量机体免疫状态的指标之一。丙二醛是脂质过氧化物的最终分解产物之一，具有很强的生物毒性，其含量能直接反映机体脂质过氧化程度，并间接反映机体抗氧化能力和细胞损伤程度。本试验中，蛋白质水平为25％ 尼罗罗非鱼和奥尼罗非鱼幼鱼蛋白质营养需求研究的组试验鱼肝脏中溶菌酶活性显著低于其他各组，而在其他各组间不存在显著差异。同时，蛋白质水平为25％的组试验鱼肝脏中丙二醛含量却较高，显著高于蛋白质水平为45％的组。超氧化物歧化酶是生物机体内重要的抗氧化酶之一，可以减弱活性氧自由基对机体的损伤。本试验中，饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼肝脏中超氧化物歧化酶活性未产生显著影响。过氧化氢酶(CAT)能催化H202等生成H20和02【90】，防止自由基对细胞的毒害，是机体内活性氧自由基的天然清除剂。肝脏中过氧化氢酶活性随饲料蛋白质水平的增加呈现先上升后下降的趋势，其中蛋白质水平为25％的组罗非鱼肝脏中过氧化氢酶活性显著低于35％和45％蛋白水平组。上述结果说明尼罗罗非鱼的非特异性免疫功能在一定程度上受到了饲料蛋白质水平的影响，适当提高饲料蛋白质水平可提高机体抗病能力。5结论①当饲料脂肪水平为9％(分析值为9．52％)时，饲料蛋白质水平(25％～45％)对尼罗罗非鱼幼鱼的生长性能、体组成和血液生化指标影响不大，25％的饲料蛋白质水平即可满足体质量为(4．70-士0．01)g的尼罗罗非鱼幼鱼的生长需求。②适当提高饲料蛋白质水平可在一定程度上提高尼罗罗非鱼幼鱼的非特异性免疫功能，主要表现在提高肝脏溶菌酶和过氧化氢酶活性。 第三章奥尼罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究l刖舌在实际养殖生产过程中，由无乳链球菌和海豚链球菌引起的罗非鱼链球菌病对我国罗非鱼养殖业的健康发展已造成了严重影响‘9¨。蛋白质营养不良会降低动物的免疫性能‘92-95]，增加感染疾病的机率。然而，目前关于蛋白质对鱼类免疫性能和抗病力的影响研究相对不足，蛋白质水平对奥尼罗非鱼免疫性能以及抗病力未见报道。有鉴于此，本实验探讨蛋白质水平对奥尼罗非鱼生长、免疫功能以及对无乳链球菌抗病力的影响。以期为生产上配制高能低氮的环保型奥尼罗非鱼配合饲料提供数据参考和科学依据。2材料与方法2．1试验饲料配制三组饲料来评价蛋白质水平对奥尼罗非鱼生长、免疫功能以及抗病力的影响。饲料的组成以及营养分析值见表1。通过调节酪蛋白和明胶含量配制D25、D30和D35三种蛋白水平饲料，饲料的粗蛋白含量实测值分别为24．8％，29．8％和34．9％，通过调节配方中玉米淀粉的含量确保各饲料等能。各种饲料原料粉碎后过60目筛，按表1的配方准确称量各种饲料原料，微量添加成分采取逐级扩大法混合均匀，再添加30％左右的水分，再次混匀后，压制成粒径为2mm粒径的颗粒饲料，在空气中自然风干，放入封口袋后在冰箱中冷冻备用。 尼罗罗非鱼和奥尼罗非鱼幼鱼蛋白质营养需求研究表3-1实验配方组成(％)Table3-1Compositionofexperimentaldiets(％)注帅多维和多矿由广州市诚一水产科技有限公司提供，a每公斤饲料含硫胺素，20mg；核黄素，20mg；吡哆醛，10mg；尼克酸，100mg；泛酸钙，50mg；生物素，1mg；叶酸，5mg；肌醇，500mg；维生素E，50rag；维生素A，2mg；维生素B12，O．02mg；维生素K3，10mg；维生素D3，0．05mg：b．每公斤饲料含七水硫酸锌，525．5mg；一水硫酸锰，49．2mg；碘化钾，5．23mg；七水硫酸亚铁，238．8mg；七水硫酸镁，4．62g；五水硫酸铜，11．8rag；六水氯化钴，0．2mg；硒酸钠，0．66mg；氯化钾，600mg；氯化钠，107．1mgNotes：a．perkgdietcontainThiamine，20mg；Riboflavin，20mg；Pyridoxine，10mg；Nicotinicacid，100mg；CalciumPantothenate，50mg；Biotin，1mg；folacin，5mg；Inositol，500mg；VitaminE，50mg；VitaminA，2mg；VitaminB12，0．02mg；VitaminK3，10mg；VitaminD3，O．05mg．b．perkgdietcontainZnS04’7H20，525．5mg；MnS04‘H20，49．2mg；KI，5．23mg；FeS04+7H20，238．8mg；MgS04‘7H20，4．62g；CuS04‘5H20，11．8mg；CoCI‘6H20，0．2mg；Sodiumselenium，0．6mg；KCI，600mg；NaC!，107．1mg．2．2试验分组饲养管理实验所用的奥尼罗非鱼来自于国家罗非鱼产业技术体系研发中心试验基地。实验开始前用商业饲料暂养2周。挑选健康，规格一致的奥尼罗非鱼随机分放在300-L的玻璃钢桶中，每桶放养均重为2．06左右的奥尼罗非鱼45尾，每种饲料随机投喂3个 第三章奥尼罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究实验桶，每天投喂三次，时间分别为8：00、12：00和18：00，并确保杂交罗非鱼能在投喂饲料之后的半小时内能够吃完，投饵量约为6_7％体重，每天记录每个水族箱中奥尼罗非鱼的摄食量，并根据前一天的摄食量以及死鱼情况调整投喂量。整个实验期间，不间断充气增氧，水温恒定控制在28。C。2．3测定指标与方法2．3．1生长指标养殖试验结束后，记录每个桶试验鱼的数目和总体重，然后每个桶随机抽取3尾鱼进行取样，测定鱼的体长、体质量、肝脏质量、内脏质量以及取出内脏后的鱼体质量，以计算生长指标。增重率(WGR，％)=【(终末鱼体质量+死亡鱼体质量一初始鱼体质量)／初始鱼体质量】×100；摄食量(FI，g，尾)=投喂量／鱼尾数；蛋白质效率(PER，％)=【(终末鱼体质量+死亡鱼体质量一初始鱼体质量)／蛋白质摄入量]×100；特定生长率(SGR％／d)=【(1n终末鱼体质量--ln初始鱼体质量)／饲养天数】x100；饲料系数(FCR)=摄食量／(终末鱼体质量+死亡鱼体质量一初始鱼体质量)：蛋白质沉积率(PP、‘％)=【(终末鱼体蛋白质含量一初始鱼体蛋白质含量)／蛋白质摄入量]×100；成活率(SR，％)=(终末鱼尾数／初始鱼尾数)×100；]]撇(CF,g／cm3)=终末鱼体质量／终末鱼体长3；肝体L匕(HSI，％)_(肝脏质量／鱼体质重)×100；脏体Lr．(VSI，％)=(内脏质量／鱼体质重)×100。2．3．2血液指标养殖试验结束后，每桶随机取5尾鱼于尾静脉处采血，全血样品送江苏省无锡市江原医院检测。全血样品检测白细胞总数、红细胞总数、血红蛋白含量以及红细胞压积。2．3．3肝脏非特异性免疫指标养殖试验结束后，每桶随机取6尾鱼的肝脏于．80℃冷冻，备测肝脏中溶菌酶23 尼罗罗非鱼和奥尼罗非鱼幼鱼蛋白质营养需求研究(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量。上述指标的测定均采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，所用试剂盒均购自美国Assay公司(上海朗顿生物技术有限公司代理)。2．3．4抗病力指标生长实验结束后开始，每个水族箱中取9尾奥尼罗非鱼进行无乳链球菌(S．agalactiae)应激实验，悬液浓度为9．95x107个／ml，注射剂量为0．2ml／尾(浓度及剂量通过预实验确定)，注射方式为腹腔注射。分别在24d"时、36d'时以及48d"时观察记录奥尼罗非鱼的累积死亡率。2．4数据统计与分析试验数据用平均值4-标准差表示，采用SPSS18．0统计软件的单因素方差分析(one—wayANOVA)进行方差分析，并采用Duncan氏法多重比较检验组间差异的显著性，P0．05)，不同小写字母表示差异显著(P．，o．05)，不同大写字母表示差异极显著C黔O．01)。Note：Inthesamerow,valueswithnOletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(，．>0．05)，whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference妒0．o1)．3．2饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼体组成血液指标的影响饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼血液指标的影响见表3．3。从表中的结果来看，饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼血红蛋白含量、红细胞总数以及血细胞比容的影响不显著。然而白细胞总数受饲料蛋白水平的影响显著，其中投喂D30饲料蛋白水平的奥尼罗非鱼白细胞总数显著低于其它饲料组。 尼罗罗非鱼和奥尼罗非鱼幼鱼蛋白质营养需求研究表3．3饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼血液指标的影响Table3-3Effectsofdietaryproteinlevelonhaemolymphparametersofjuveniletilapia(Oreochromisniloticus×O．aureus)注：同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(尸>O．05)，不同小写字母表示差异显著妒<0．05)，不同大写字母表示差异极显著(尸>0．01)。Note：Inthesamerow,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(P>0．05)，whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference(P<0．05)，andwithdifferentcapitallettersuperscriptsmeansignificantdifference(JP>O．01)．3．3饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼肝脏非特异性免疫指标的影响饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼免疫功能的影响见表3—4。表中的结果表明，高蛋白水平组(D35饲料组)奥尼罗非鱼肝胰腺中的过氧化氢酶(CAT)活性显著高于其它饲料组，然而，各饲料蛋白水平之间奥尼罗非鱼肝胰腺中的溶菌酶、超氧化物歧化酶活性以及丙二醛含量不存在显著差异。表3-4饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼免疫功能的影响Table3-4Effectsofdietaryproteinlevelonimmunityofjuveniletilapia(OreochromisniloticusxO．aureus)指标Item实验饲料ExperimentaldietsD25D30D35注：同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(尸>O．05)，不同小写字母表示差异显著妒<0．05)，不同大写字母表示差异极显著(JP>O．01)。Note：Inthesamerow,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(pO．05)，whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference(P<0．05)，andwithdifferentcapitallettersuperscriptsmeansignificantdifference(尸>0．01)．26 第三章奥尼罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究3．4饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼抗病力的影响饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼抗病力的影响见表3—5。表中的结果表明，低饲料蛋白水平(D25饲料组)奥尼罗非鱼在36d',时的应激实验过程中，成活率显著低于高蛋白水平饲料(D30饲料组、D35饲料组)的奥尼罗非鱼，然而，24小时和48小时内的抗病力实验结果显示，各饲料蛋白水平之间奥尼罗非鱼成活率不存在显著差异，即蛋白质水平不会对奥尼罗非鱼抗病力产生影响。表3．5饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼抗病力的影响(％)Table5Effectsofdietaryproteinlevelondiseaseresistanceofjuveniletilapia(Oreochromisniloticus×O．aureusl(％)24小时36小时48小时48．1士17．063．0士6．4b81．5+6．4263．0：E17．081．5士12．8885．2+6．42注：同行数据肩标相同字母或无字母表示差异不显著(JP>O．05)，不同小写字母表示差异显著(P<0．05)，不同大写字母表示差异极显著(尸>O．01)。Note：Inthesamerow,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdifference(，>0．05)，whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference妒<0．05)，andwithdifferentcapitallettersuperscriptsmeansignificantdifference(P>0．o1)．4讨论4．1饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼生长和饲料利用的影响本实验的结果表明，各蛋白质水平之间奥尼罗非鱼在增重率、特定生长率以及成活率上都不存在显著差异，即蛋白水平为24．8％能够满足奥尼罗非鱼生长的需求。以往对奥尼罗非鱼的研究表明，奥尼罗非鱼仔鱼(初始体重为0．0219)的蛋白质需求量为45％[601，相对较高，上述实验结果的差异，一方面说明了不同的生长阶段其蛋白质需求量是存在差异的。同时由于鱼类对蛋白质的需求量不是一个绝对的量，蛋白质需求水平受饲料中脂肪以及淀粉水平的影响。董晓慧等(2009)得出的奥尼罗非鱼蛋白质需求量是建立在配方脂肪水平为6％水平下的，得出的蛋白质需求量为45％相对于本实验的研究结果较高，而本实验的脂肪水平较高(10％)，得出的蛋白质需求量相对较低，这表明通过提高饲料中脂肪水平，可以在不影响生长的情况下，起到降低奥尼罗非鱼蛋白质需求量。同样，在对大西洋鲑鱼【96】和鳞科鲶鱼【97】的研究中也同样发现，提27∞矿轮脚龇逝巧孔虬 尼罗罗非鱼和奥尼罗非鱼幼鱼蛋白质营养需求研究高饲料中脂肪水平可以起到降低鱼类对蛋白质的需求量，即脂肪可以对蛋白质起到节约作用。然而，在对军曹鱼【981、白鲷例、琥珀鱼[1001和红吉罗‘1011的研究中发现脂肪对蛋白质的节约效应不存在。本实验中蛋白质效率伴随着饲料蛋白水平的升高而显著下降，这表明高蛋白饲料组奥尼罗非鱼排放到养殖水体中的氮排泄量增加了，在对金头鲷[102]的研究中也发现相似的研究结果。而且，在本实验中各饲料组之间是保持等能水平的，高蛋白饲料组含有较低的淀粉水平(如表1)，相反低蛋白饲料组含有较高的淀粉水平。Engin和Carter[1031的研究结果表明增加饲料中非蛋白能量水平可以降低氮排泄从而提高氮的沉积率。同样，在对银鲈【104】的研究中也发现，氮排泄量伴随着饲料蛋白水平的升高和碳水化合物水平的降低而增加，这主要是由于增加饲料中淀粉水平会降低肝胰腺中氨基酸降解酶的活性，从而导致氮排泄量降低和蛋白质沉积率增加【105】。本实验中蛋白质水平对奥尼罗非鱼形态学指标产生了显著影响。肝体比伴随着饲料蛋白水平的升高而显著下降，与饲料中的淀粉水平成正相关。在对其它鱼类的研究中也发现类似的现象‘106；1071，提高饲料中的可消化淀粉含量会导致肝体比上升，这主要是由于糖元在肝脏中积累造成的。同时，在Yang等[104】对银鲈的研究发现，肠系膜脂肪含量和肝体比也都会伴随着饲料中淀粉水平的升高而降低，因此本实验中低蛋白组罗非鱼的内脏比显著高于其它饲料组，这主要是由于肝体比以及肠系膜脂肪含量的增加造成的结果。4．2饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼体组成血液指标的影响血红蛋白、血细胞比容和红细胞总数同鱼类的非特异性免疫功能具有一定的相关性，高含量的血红蛋白和红细胞总数被认为是动物健康的表现。在本实验中，血红蛋白、血细胞比容和红细胞总数不受饲料中蛋白水平的影响，这表明饲料蛋白水平在24．8％情况下，能够维持血液细胞的正常发育和形成，使鱼体保持健康状态。4．3饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼肝脏非特异性免疫指标的影响鱼体抗氧化能力的强弱与健康状况存在着密切的关系，抗氧化能力降低时常常导致各种疾病的产生。其中，超氧化物歧化酶(SOD)是生物机体内重要的抗氧化酶之一，丙二醛(MDA)是脂质过氧化物的最终分解产物之一，具有很强的生物毒性，常作为机体抗氧化能力的测定指标，其含量能直接反映机体脂质过氧化程度，并间接反映机体抗氧化能力和细胞损伤程度。本实验的研究结果表明，肝胰腺中超氧化物歧化酶以及丙二醛的含量在各蛋白水平饲料组之间不存在显著差异，进一步验证了上述推论，即 第三章奥尼罗非鱼幼鱼对蛋白质需求量的研究24．8％蛋白水平饲料可以为奥尼罗非鱼肝脏抗氧化酶合成提供比较充足的蛋白质营养，确保机体的抗氧化系统稳定，维持机体的健康状况。溶菌酶是鱼类重要的非特异性免疫指标，可以准确反应鱼类机体对寄生虫、细菌以及病毒的抵抗能力‘108；1091。对异育银鲫瞰1的研究显示，溶菌酶活性不受蛋白质水平的显著影响，这与本试验的研究结果相似。以往的研究表明，蛋白质营养不良会降低机体的免疫性能‘93；941，增加感染疾病的机率。Kiron掣951研究发现，投喂蛋白缺乏组饲料(10*／o饲料蛋白水平)虹鳟鱼溶菌酶以及C．反应蛋白水平显著下降，降低机体的非特异性免疫性能。然而，本实验中，低蛋白饲料组奥尼罗非鱼溶菌酶含量相对于高蛋白饲料组并不存在显著差异。4．4饲料蛋白质水平对奥尼罗非鱼幼鱼抗病力的影响无乳链球菌应激实验结果表明，低蛋白饲料组奥尼罗非鱼在24小时和48小时的累积死亡率相对于高蛋白饲料组不存在显著差异，进一步表明饲料蛋白水平为24．8％能够满足奥尼罗非鱼的蛋白质营养需求，可以维持机体的正常免疫性能和抗病力。5结论①当饲料脂肪水平为9％(分析值为9．52％)时，饲料蛋白质水平(25％～35％)对奥尼罗非鱼幼鱼的生长性能、血液生化指标影响不大，25％的饲料蛋白质水平即可满足体质量为2．069左右的奥尼罗非鱼幼鱼的生长需求。②饲料蛋白质水平(25％～35％)对奥尼罗非鱼幼鱼的非特异性免疫功能和抗病力没有显著性影响。29 全文总结1．当饲料脂肪水平为9％(分析值为9．52％)时，饲料蛋白质水平(25％～45％)对尼罗罗非鱼幼鱼的生长性能、体组成和血液生化指标影响不大，25％的饲料蛋白质水平即可满足体质量为(4．70士0．01)g的尼罗罗非鱼幼鱼的生长需求；。2．适当提高饲料蛋白质水平可在一定程度上提高尼罗罗非鱼幼鱼的非特异性免疫功能，主要表现在提高肝脏溶菌酶和过氧化氢酶活性。3．当饲料脂肪水平为9％(分析值为9．52％)时，饲料蛋白质水平(25％～35％)对奥尼罗非鱼幼鱼的生长性能、血液生化指标影响不显著，即25％的饲料蛋白质水平可以满足体质量为2．069左右的奥尼罗非鱼幼鱼的生长需求。4．饲料蛋白质水平(25％～35％)对奥尼罗非鱼幼鱼的非特异性免疫功能和抗病力没有显著性影响。综合以上结论可得出当饲料脂肪水平为9％(分析值为9．52％)时，尼罗罗非鱼幼鱼和奥尼罗非鱼对蛋白质的需求水平都较低，25％蛋白水平饲料能够满足最佳生长需求；在免疫方面，适当提高饲料蛋白质水平可在一定程度上提高尼罗罗非鱼幼鱼的非特异性免疫功能，但高蛋白质饲料对奥尼罗非鱼幼鱼的非特异性免疫功能和抗病力不会产生显著影响。 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致谢本研究及学位论文的选题和研究过程是在我的导师杨弘研究员的悉心指导、亲切关怀和热心帮助下完成的。在两年半的研究生求学生涯中，杨弘给予我很多的启发和帮助，让我得以接触到很多书本上学不到的知识，同时杨老师给我提供了良好的实验环境，在科研上给了我大量的、极其有益的建议和具体的指导。此外，杨老师还在生活和思想上关心我、照顾我。在此，我表示万分的感谢!感谢生物技术研究室乐贻荣老师，从课题设计、试验研究到论文撰写，乐贻荣老师倾注了大量的时间和精力，此外感谢祝瑕琳老师、肖炜老师、李大宇老师、邹芝英老师、韩珏老师和单航宇老师在本试验准备、开展和结尾的过程中，给予的关心、帮助。是你们的帮助才使得我快速的掌握了生物技术研究室的实验室基本操作，从而为我的研究生学习阶段打下了坚实的基础。在此谨向各位老师表示我诚挚的感谢。感谢江苑、王倩、强俊、柒壮林、崔素丽、万金娟、柏爱旭、顾伟、周明、孙磊、王莹等师兄师姐和同学对我试验的帮助。特别感谢顾伟、孙磊、柒壮林、王杰、夏正龙、刘道玉、袁晖、张鹏、马庆南、张文宜、景丽、孙超、崔素丽、万金娟、夏飞、周琼、王璐、贾旭淑、李真真、张宁等同学在我硕士学习期间在生活和学习中给予的帮助，有你们的陪伴，这段日子值得回忆。特别的感谢给我的家人，是他们在生活上、物质上和精神上给了我巨大的理解与支持，是他们无私奉献的爱给了我无限的欢乐和动力!辛苦了!论文即将完成之际，我的心情无法平静，从开始进入课题到论文的顺利完成，所有师长、同学、朋发给我无言的帮助，请允许我在这里致以诚挚的谢意。徐起群2012年11月于南农 攻读硕士学位期间发表的学术论文[1】杨弘，徐起群，乐贻荣，祝瑕琳，等．饲料蛋白质水平对尼罗罗非鱼幼鱼生长性能、体组成、血液指标和肝脏非特异性免疫功能的影响【J】．动物营养学报(已接受，待发表)。【2】乐贻荣，杨弘，徐起群，邹芝英，等．饲料蛋白水平对奥尼罗非鱼(O垤oc办mm括niloticus×O．aureus)生长、免疫功能以及抗病力的影响【J】．海洋与湖沼(已接受，待发表)45