结缔组织生长因子对胃癌细胞增殖、侵袭迁移的影响及其作用机制的研究

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1、万方数据温州医学院硕士学位论文论文题目：StudiesoftheeffectandmechanismofConnectiveTissue．GrowthFactoringastriccancercellproliferation,invasionand．．黄苤胜教援逝江雀厶民医院万方数据温州医学院硕士学位论文目录中文摘要(关键词)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要(关键词)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3前言···⋯⋯⋯⋯⋯······⋯⋯⋯⋯·········⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯···5日lJ舌“一“”“⋯⋯⋯””””⋯⋯“““““”“”

2、”””””””””””⋯⋯⋯。b第一部分胃癌细胞系CTGF表达水平测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(一)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6(二)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯00Q00⋯000⋯9第二部分pCDNA3．卜CTGF表达载体构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10(一)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10(二)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15第三部胃癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(一)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(二)结果⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯O00100⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯26第四部分表达谱芯片检测上调CTGF表达后胃癌细胞差异表达基因30(一)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30(二)结果⋯⋯⋯⋯000100⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31第五部分胃癌细胞VASPmRNA表达水平鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36(一)材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36(二)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38小结⋯⋯000⋯000⋯⋯⋯⋯⋯000⋯⋯⋯0044万方数据参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45附

4、录···········⋯⋯⋯················⋯···⋯························⋯⋯⋯49致谢⋯⋯⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯···⋯···⋯⋯⋯····⋯⋯··⋯···⋯······50综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯59万方数据温州医学院硕士学位论文结绫缉组生长国王越量痘细胞增殖≥堡蓥适整数量喧盈甚佳用扭制的班究中文摘要目的：构建CTGF真核表达载体pcDNA3．1一CTGF及其阴性对照pCDNA3．1．EGFP，转染相对低表达CTGF的胃癌细胞，观

5、察上调CTGF表达水平对胃癌细胞增殖及侵袭迁移的影响，并利用表达谱芯片分析差共同的差异表达基因。方法：提取胃癌细胞(AGS、SGC．7901、MKN-45和BGC．823)总RNA，利用PCR技术检测胃癌细胞系CTGFmRNA表达水平差异。构建pcDNA3．1．CTGF表达载体，运用细胞转染技术对相对低表达CTGF的胃癌细胞转染经测序鉴定后的peDNA3．1．CTGF和pcDNA3．1．EGFPD表达载体，转染pcDNA3．1．CTGF质粒的作为实验组，转染pcDNA3．1．EGFP的细胞作为阴性对照，转染后细胞经过G418筛选，Q-PCRwesternblot鉴定，选

6、择CTGF表达最高的实验组和表达最低的阴性对照组，通过MTT、trans．well实验，分析转染pcDNA3．1．CTGF后胃癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的变化。利用安捷伦表达谱芯片分析转染pcDNA3．1．CTGF前后基因表达变化并进行差异聚类分析，并对差异明显基因进行PCR检测验证。缝蟹拿日爿写：1．胃癌细胞系CTGFmRNA相对表达水平BGC．823>SGC．7901>AGS>MKN-452．成功构建了pcDNA3．1．CTGF真核表达载体及阴性表达载体pcDNA3．1．EGFP。3．通过重组质粒DNA转染、RT-qPCR检测，成功获得CTGF表达水平最高的实验组(

7、MKN45．CTGF、AGS．CTGF、SGC7901．CTGF)和表达最低的Negativecontrol组(MKN45．EGFP、AGS．EGFP、SGC7901．EGFP)细胞。4．MTT实验显示，72h后，实验组相对增殖率分别是对应Negativecontrol的1．37、1．47、1．64倍。迁移实验表明，24小时后实验组穿过膜的细胞数达到140．7±17．2、132．7±12．0、146．0±13．9个；Negativecon仃01组穿过膜的细胞数为74．3±9．6、83．0±8．0、93．3±11．5个；实验组细胞穿膜个数分